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外泌體可以調(diào)控星狀細(xì)胞(HSC)活化,并參與HSC細(xì)胞遷移的進(jìn)程?;罨腍SC來源的外泌體中,CCN2表達(dá)升高,Twist1和miR-214表達(dá)被抑制,這些外泌體還能誘導(dǎo)靜止的HSC細(xì)胞表達(dá)CCN2。此外,Twist1可以誘導(dǎo)miR-214表達(dá)從而抑制CCN2的表達(dá)。CCL4處理的外泌體和外泌體SK1/S1P會誘導(dǎo)HSC遷移。MSC分泌的外泌體可以有效減緩肝纖維化過程,這可能成為肝纖維化治理的靶點(diǎn)。研究顯示,CP-MSC來源的外泌體miR-125b可以抑制Hedgehog信號通路的活化,抑制纖維化;而HUC-MSC分泌的外泌體可以逆轉(zhuǎn)細(xì)胞形態(tài)和TGF-β1誘導(dǎo)的EMT進(jìn)程,減弱肝纖維化。所有真核細(xì)胞類型包括造血細(xì)胞、上皮細(xì)胞、干細(xì)胞、脂肪細(xì)胞均可在培養(yǎng)條件下分泌外泌體。浙江胸水外泌體示蹤
雖然外泌體作為藥物載體具有生物兼容性、穩(wěn)定性和內(nèi)在靶向性等潛在優(yōu)勢,但是外泌體在藥物遞送中的應(yīng)用研究才剛剛起步,尚有許多問題需解決:選擇何種細(xì)胞作為外泌體的供體:如DCs來源的外泌體可用于免疫治理,因其富含組織相容復(fù)合物(MHC)及T細(xì)胞共刺激分子,能在體內(nèi)喚醒T淋巴細(xì)胞,進(jìn)而抑制瘤細(xì)胞增殖;骨髓來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)來源的外泌體對KRAS基因有抑制作用;γδT細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞(NK)、瘤細(xì)胞等均有研究報(bào)道可作為載藥級別外泌體的細(xì)胞來源。湖南體液外泌體鑒定隨著EV研究倍受世界矚目,各國啟動了大型研究項(xiàng)目。
外泌體的提取方法:超速離心法,這是外泌體提取比較常用的方法。超速離心法得到的外泌的體量比較多,但是純度不足,電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊,由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn),也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡而不是外泌體。過濾離心法,這種操作簡單、省時(shí),不會影響外泌體的生物活性,但同樣存在純度不足的問題。密度梯度離心法,用此種方法分離到的外泌體純度高,但是前期的準(zhǔn)備工作繁雜,比較耗時(shí),量少。
外泌體大小不均可能是由于MVB的限制膜不均勻內(nèi)陷,導(dǎo)致流體和固體的總含量不同;細(xì)胞的微環(huán)境和固有的生物學(xué)特性可能會影響外顯體的含量及其生物學(xué)標(biāo)記,如乳腺病細(xì)胞及其外泌體的蛋白質(zhì)組可以顯示來源細(xì)胞是上皮樣細(xì)胞還是間充質(zhì)樣細(xì)胞;由于細(xì)胞表面受體表達(dá)的不同,外泌體對受體細(xì)胞的影響可能不同,可能誘導(dǎo)細(xì)胞存活,也可能誘導(dǎo)凋亡,或誘導(dǎo)免疫調(diào)節(jié)等;異質(zhì)性也可以基于外泌體起源的組織,包括它們是否來自病細(xì)胞,瘤細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體傳遞致瘤miRNAs明顯促進(jìn)瘤細(xì)胞增殖。外泌體與各種疾病的相關(guān)性被檢測出,特別是血液中釋放的病細(xì)胞來源的外泌體。
與干細(xì)胞不同的是:干細(xì)胞外泌體對受損的微環(huán)境不響應(yīng),但它可以通過改變細(xì)胞外基質(zhì),改變受體細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)組,來調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡,生長,增殖和分化途徑。因此,干細(xì)胞外泌體具有減少細(xì)胞凋亡、減輕炎癥反應(yīng)、促進(jìn)血管生成、抑制纖維化、提高組織修復(fù)潛力等重要生物學(xué)功能,在調(diào)控組織再生方面存在良好的臨床應(yīng)用前景。干細(xì)胞外泌體的優(yōu)點(diǎn),體積?。杭{米級粒子,大小約為細(xì)胞的1/200,因此能很好地被人體所利用。免疫反應(yīng)程度低:外泌體不是細(xì)胞,只作為載具,外膜的表層上呈現(xiàn)較少的抗原,免疫系統(tǒng)難識別,對人體影響小??纱┩秆X障壁:體積小加上脂質(zhì)外膜的特性,使其可以通過血腦障壁,抵達(dá)腦部組織。各種細(xì)胞粘著分子在外泌體膜表面表達(dá),由其決定外泌體被運(yùn)輸往哪一種細(xì)胞。江西血清外泌體染色PKH67/PKH26
在人體體液內(nèi)尋找和檢測細(xì)胞分泌的外泌體可能會是一種新穎的、無創(chuàng)的、高度可靠的診斷方式。浙江胸水外泌體示蹤
外泌體(exosome),特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。其主要來源于細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中?,F(xiàn)已證實(shí)可以分泌外泌體的細(xì)胞有:肥大細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、種瘤細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞等。外泌體在免疫中抗原呈遞、種瘤的生長與遷移、組織損傷的修復(fù)等生理病理上起著重要的作用。同時(shí),不同細(xì)胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,可作為疾病診斷的生物標(biāo)志物。外泌體的形成與分泌目前的主流觀點(diǎn)認(rèn)為,外泌體的產(chǎn)生過程為:細(xì)胞膜內(nèi)陷,形成內(nèi)體(endosome),再形成多泡體(multivesicular bodies,MVB),后分泌到胞外成為外泌體。外泌體中攜帶有母細(xì)胞的多種蛋白質(zhì)、脂類、DNA和RNA等重要信息。浙江胸水外泌體示蹤