外泌體的提取主要包括以下幾種方式：一是超速離心法，這是目前外泌體提取常用的方法 。此種方法得到的外泌體量多，但是純度不足，電鏡鑒定時發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊， 由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標準，也有一些研究認為此種 方法得到的是微泡不是外泌體 。二是過濾離心， 這種操作簡單、省時，不影響外泌體的生物活性 ，但同樣存在純度不足的問題。三是密度梯度離心法， 用此種方法分離到 的外泌體純度 高，但是前期準備工作繁雜，耗時，量少。關(guān)于外泌體相關(guān)的實驗技術(shù)，關(guān)于需要改進的課題存在很多。吉林血液外泌體
人體內(nèi)多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體，包括干細胞、免疫細胞、內(nèi)皮細胞、血小板及平滑肌細胞等。外泌體被包裹在堅硬的雙層膜中。雙層膜保護外泌體的內(nèi)容物，使外泌體能夠在組織中長距離移動。干細胞外泌體因在上皮組織的增殖、遷移、再生、炎癥和瘢痕控制等方面的作用，有望成為“無細胞的細胞治理”工具。干細胞來源的外泌體可通過囊泡，將干細胞的精華部分——mRNA、miRNA、IncRNA及蛋白質(zhì)等生物活性物質(zhì)，打包運出干細胞體外。通過“細胞間高速公路”來“快遞”到人體各個組織內(nèi)。遼寧腹水外泌體提取外泌體是一種由活細胞分泌的，直徑約為40～160nm的具有雙層膜結(jié)構(gòu)的生物活性囊泡。
Aqil等在進行裸鼠實驗時發(fā)現(xiàn)，加載至外泌體中的雷公藤紅素（Exo-CEL）比普通的CEL有更強的抗種瘤功效，且在小鼠中未發(fā)現(xiàn)明顯全身性或系統(tǒng)性毒性，由此可以證明，外泌體制劑可以有效增強CEL功效并降低與劑量有關(guān)的毒性。到目前為止，外泌體在肺病醫(yī)治方面的研究主要集中于免疫壓制，有效的外泌體藥物遞送平臺的搭建以及外泌體相關(guān)的潛在醫(yī)治靶點的探索。已有的研究表明外泌體在肺病醫(yī)治領(lǐng)域有著廣闊的前景，期待外泌體在肺病醫(yī)治領(lǐng)域早日得到突破，造福更多的患者。
外泌體早見于1981年，EG Trams 等在體外培養(yǎng)的綿羊紅細胞上清液中發(fā)現(xiàn)了有膜結(jié)構(gòu)的小囊泡，并命名為 exosome。對于外泌體的作用，當時推測為細胞排泄廢物的一種方式。1996年G Raposo 等發(fā)現(xiàn)類似于B 淋巴細胞的免疫細胞也會分泌抗原呈遞外泌體（antigen presenting vesicle），所分泌的外泌體可以直接刺激效應CD4+ 細胞的抗種瘤反應。2007 年H Valadi 等進一步發(fā)現(xiàn)細胞之間可以通過外泌體中RNA 交換遺傳物質(zhì)。隨著有關(guān)外泌體研究越來越多，研究者發(fā)現(xiàn)它普遍參與了機體免疫應答、抗原呈遞、細胞分化、種瘤生長于侵襲等各種生物過程中。外泌體由細胞分泌釋放出來，在血液等體液內(nèi)傳播，然后又可被其他細胞吞噬，是細胞間通訊的重要介質(zhì)。
過細胞分泌到外泌體中的分子引起的。其中已發(fā)現(xiàn)外泌體內(nèi)含有分泌細胞來源mRNA和miRNA，外泌體與細胞間遺傳基因表達信息的水平傳播相關(guān)性倍受矚目。這些RNA被外泌體的脂質(zhì)雙層膜所保護，不會被核糖核酸酶所分解，可以在血液和體液中穩(wěn)定存在。被靶細胞吞噬的外泌體通過與內(nèi)體膜融合，將RNA釋放到靶細胞的細胞質(zhì)中。釋放出來的mRNA翻譯為蛋白質(zhì)，但miRNA壓制目的基因的翻譯，因此外泌體在靶細胞內(nèi)控制基因的表達。外泌體的蛋白質(zhì)有數(shù)萬種，mRNA、miRNA的種類有數(shù)千種以上，它們的結(jié)構(gòu)除了受細胞來源不同的影響，還受到細胞狀態(tài)不同的影響。外泌體在體液中十分穩(wěn)定，同時外囊泡所含的蛋白質(zhì)和RNA被外泌體的脂質(zhì)雙層膜所包被也不會分解。湖北血漿外泌體
外泌體復雜的內(nèi)容物被認為是疾病診斷的無創(chuàng)或微創(chuàng)生物標志物。吉林血液外泌體
結(jié)果表明，PS親和法可以檢測到許多目前為止都無法檢測的外泌體蛋白質(zhì)和RNA。應用Tim4的外泌體強結(jié)合能力，可用ELISA或FACS高靈敏度定性檢測、定量分析外泌體。以前無法用超速離心法提取的微囊泡，也通過運用PS親和法實現(xiàn)高純度提取。本指導書中對該技術(shù)進行詳細說明，這項技術(shù)的有用性今后將受到世界各方評價，有望在外泌體和微囊泡生理功能的分析研究上起重大貢獻。外泌體的檢測和提取還遇到一個困難即：對各種外泌體的分類。研究人員尚未統(tǒng)一定義以何種方法提取的細胞外囊泡可以稱之為外泌體，給實驗數(shù)據(jù)的分析和重復性確認帶來困難。近年，隨著國際細胞外囊泡協(xié)會的成立、世界性研究者研討會的舉辦，提案MISEV指南作為國際標準，計劃或已經(jīng)開始進行EV研究的科學家請務必閱讀這些方針。吉林血液外泌體