外泌體的生物發(fā)生途徑主要包括三個關(guān)鍵的檢查點：ILV的形成，阻止MVEs的降解以及MVEs和細胞膜的融合，這三個檢查點都包含在內(nèi)體相關(guān)的囊泡運輸過程中。RABGTPase定位到特定膜結(jié)構(gòu)的表面，通過招募效應(yīng)因子來調(diào)節(jié)相應(yīng)膜結(jié)構(gòu)的囊泡運輸，例如，在內(nèi)體溶酶體運輸網(wǎng)絡(luò)中，RAB5調(diào)節(jié)早期內(nèi)體的形成及相互融合；內(nèi)體膜上RAB5到RAB7的轉(zhuǎn)換調(diào)節(jié)早期向晚期內(nèi)體的轉(zhuǎn)變；RAB7調(diào)節(jié)晚期內(nèi)體/MVEs與溶酶體的融合來降解ILVs；RAB27調(diào)節(jié)MVEs與細胞膜的對接和融合來釋放ILVs形成外泌體。內(nèi)吞的膜蛋白，特別是受體酪氨酸激酶家族的表皮生長因子受體，定位到內(nèi)體和MVEs，通過MVEs和溶酶體融合來進入溶酶體降解，此過程受多種RABGTPases和ESCRT復(fù)合體的調(diào)控。細胞表面受體表達不同，外泌體對受體細胞的影響可能不同，可能誘導(dǎo)細胞存活，也可能誘導(dǎo)凋亡或免疫調(diào)節(jié)等。天津海洋生物組織外泌體透射電鏡檢測
外泌體的形成始于細胞內(nèi)陷，成熟于多囊泡胞內(nèi)體，終于膜融合。細胞通過內(nèi)吞作用產(chǎn)生小囊泡，小囊泡融合形成早期胞內(nèi)體（earlyendosome），在多個蛋白的協(xié)同調(diào)控下，早期胞內(nèi)體出芽形成含有多個腔內(nèi)小囊泡的多泡體（multivesicularbodies，MVB），這個過程中這些腔內(nèi)小囊泡（intraluminalvesicles，ILVs）會裝載各種核酸和蛋白質(zhì)等分子，泡內(nèi)體較后在GTPase家族中RAB酶的調(diào)節(jié)下與細胞膜融合。隨后，這些小囊泡會被釋放到細胞外，稱為外泌體。外泌體是通過細胞內(nèi)吞細胞膜融合主動排除的物質(zhì)，大小均勻，而微泡是由細胞直接出芽脫落生成，大小不均一。上海植物莖組織外泌體透射電鏡檢測外泌體是細胞分泌囊泡的一種亞型，存在于生物體液中，并參與多種生理和病理過程。
外泌體的提取方法：超速離心法，這是外泌體提取比較常用的方法。超速離心法得到的外泌的體量比較多，但是純度不足，電鏡鑒定時發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標準，也有一些研究認為此種方法得到的是微泡而不是外泌體。過濾離心法，這種操作簡單、省時，不會影響外泌體的生物活性，但同樣存在純度不足的問題。密度梯度離心法，用此種方法分離到的外泌體純度高，但是前期的準備工作繁雜，比較耗時，量少。
外泌體在神經(jīng)系統(tǒng)中與神經(jīng)回路的控制相關(guān)，同時各種神經(jīng)退行性疾病的致病蛋白還可以通過外泌體釋放到細胞外并傳遞到其他細胞，與病情發(fā)展密切相關(guān)。病細胞釋放的外泌體含有許多與血管新生和免疫逃逸相關(guān)的分子，構(gòu)建適合病細胞生長的微環(huán)境，促進病細胞的發(fā)展。另外，病細胞來源的外泌體上粘著分子的表達形式?jīng)Q定著癥狀向身體部位的轉(zhuǎn)移途徑。近，有報告指出脂肪細胞釋放的外泌體對肝臟的遺傳基因表達有控制作用。許多病毒利用外泌體的產(chǎn)生路徑傳播細胞，受病毒傳播的細菌和寄生蟲通過外泌體控制其他受細胞傳播的細菌、寄生蟲的活動。隨著外泌體的功能逐漸被發(fā)現(xiàn)，近年來，應(yīng)用這些功能的醫(yī)治法也在被開發(fā)出來。
目前，提取外泌體的方法主要有超速離心法、PEG沉淀法，但這些方法混有非常多的雜質(zhì)，必須慎重分析得到的是否是外泌體。超速離心法存在操作繁雜、回收量不穩(wěn)定，不能用于定量分析、必須使用昂貴的超速離心機、無法進行多樣品分析等問題。因此外泌體研究相對困難，需要盡快開發(fā)操作簡單、可提取高純度外泌體的技術(shù)。因此，日本和光著眼于巨噬細胞的外泌體受體Tim4蛋白，制備Tim4細胞外域與磁珠結(jié)合的“Tim4磁珠”。Tim4通過磷酯酰絲氨酸（PS）法特異性結(jié)合Tim4蛋白和磁珠，再經(jīng)過含有EDTA的洗脫緩沖液進行分離，提取高純度的完整外泌體。必須慎重分析得到的是否是外泌體。北京動物組織外泌體分離
不同肝臟疾病中，細胞分泌的外泌體所攜帶的核酸和蛋白組分之間存在差異。天津海洋生物組織外泌體透射電鏡檢測
與干細胞不同的是：干細胞外泌體對受損的微環(huán)境不響應(yīng)，但它可以通過改變細胞外基質(zhì)，改變受體細胞的轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)組，來調(diào)節(jié)細胞凋亡，生長，增殖和分化途徑。因此，干細胞外泌體具有減少細胞凋亡、減輕炎癥反應(yīng)、促進血管生成、抑制纖維化、提高組織修復(fù)潛力等重要生物學功能，在調(diào)控組織再生方面存在良好的臨床應(yīng)用前景。干細胞外泌體的優(yōu)點，體積小：納米級粒子，大小約為細胞的1/200，因此能很好地被人體所利用。免疫反應(yīng)程度低：外泌體不是細胞，只作為載具，外膜的表層上呈現(xiàn)較少的抗原，免疫系統(tǒng)難識別，對人體影響小?？纱┩秆X障壁：體積小加上脂質(zhì)外膜的特性，使其可以通過血腦障壁，抵達腦部組織。天津海洋生物組織外泌體透射電鏡檢測