在多細(xì)胞生物體內(nèi),遠(yuǎn)處的細(xì)胞可以通過傳遞單個分子或細(xì)胞外囊泡(EVs,包括 exosomes和microvesicles等)交換信息。該綜述介紹了一些EVs引人注目的功能,以及我們目前對其生理作用認(rèn)識的局限。盡管有初步研究表明,EVs在體內(nèi)具有一些生理功能,但EVs的本質(zhì)特性仍有待進(jìn)一步澄清。這篇綜述主要關(guān)注種瘤細(xì)胞和微環(huán)境,但類似的結(jié)果和挑戰(zhàn)也適用于EVs介導(dǎo)的其他的病理/生理過程。功能神經(jīng)的能力和完整性需要感覺運動神經(jīng)元、神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞之間的交互式信息交流。神經(jīng)細(xì)胞來源的外泌體含有與神經(jīng)退行性疾病相關(guān)的分子。江蘇細(xì)胞外泌體WB
多年來,外泌體被認(rèn)為參與無用的細(xì)胞內(nèi)含物質(zhì)的釋放。但是近年來,外泌體在活內(nèi)作為運載脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、RNA等細(xì)胞間信息傳遞的新型媒介而倍受矚目。隨著其功能在生理及病理功能的闡明,外泌體在臨床應(yīng)用的相關(guān)研究中,特別是診斷醫(yī)治、生物標(biāo)記的開發(fā)也迅速發(fā)展起來。現(xiàn)在,外泌體研究幾乎涉及所有的研究領(lǐng)域(免疫、神經(jīng)系統(tǒng)、癥狀、內(nèi)分泌、循環(huán)系統(tǒng)等)。例如,免疫細(xì)胞來源的外泌體含有抗原肽/MHC復(fù)合體和可能控制著免疫細(xì)胞間抗原信息的交換、免疫細(xì)胞活化/非活化等各種免疫應(yīng)答機制的各種抗原。湖南腦脊液外泌體外泌體提取在短時間(一周之內(nèi))使用,可以放在4度保存,如果長時間保存可以放在-20度或-80度保存。
外泌體中這些物質(zhì)的結(jié)構(gòu)與它們在分泌細(xì)胞內(nèi)的結(jié)構(gòu)不同,所以可能存在一種外泌體特異蛋白和mRNA/miRNA在外泌體內(nèi)選擇性積累的機制。這種特異性可將外泌體內(nèi)的RNA作為生物標(biāo)記,更進(jìn)一步作為醫(yī)治開發(fā)方法的靶點。外泌體中的mRNA一旦被靶細(xì)胞吞噬,能夠引起這個細(xì)胞內(nèi)的功能性蛋白的表達(dá),但外泌體中多數(shù)的miRNA是前體而非功能性miRNA,這些miRNA起著何種生理性意義,學(xué)者們正在研究。由于外泌體含有各種蛋白質(zhì)、RNA和脂質(zhì),研究人員正將其進(jìn)行細(xì)胞分類,建立數(shù)據(jù)庫(ExoCarta)。此外,在世界各地分別進(jìn)行著運用蛋白質(zhì)組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)和系統(tǒng)生物學(xué)的大規(guī)模分析工作,而FunRich的EV plugin作為一種通用的分析手段已被公布出來。今后,在推進(jìn)外泌體研究方面,各領(lǐng)域的研究人員信息共享至關(guān)重要。
外泌體免疫磁珠法,這種方法可以保證外泌體形態(tài) 的完整,特異性高、操作簡單、不需要昂貴的儀器設(shè)備,但是非中性pH 和非 生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性, 不便進(jìn)行下一步的實驗 。PS親和法,該方法將PS(磷脂酰絲氨酸)與磁珠結(jié)合,利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似,獲得的外泌體形態(tài)完整,純度高。由于不使用變性劑,不影響外泌體的生物活性,外泌體可用于細(xì)胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射。2016.9 《Scientific Reports》 雜志發(fā)表了該方法新數(shù)據(jù),表明PS法可提取相當(dāng)高純度的外泌體。色譜法,這種方法分離到的外泌體在 電鏡下大小均 一, 但是需要特殊的設(shè)備 , 應(yīng)用不普遍 。癥狀細(xì)胞來源的外泌體含有與癥狀進(jìn)展相關(guān)的分子。
各種細(xì)胞粘著分子在外泌體膜表面表達(dá),由其決定外泌體被運輸往哪一種細(xì)胞,期望開發(fā)利用該特征的新型DDS。外泌體在體液中十分穩(wěn)定,同時外囊泡所含的蛋白質(zhì)和RNA被外泌體的脂質(zhì)雙層膜所包被也不會分解。另外在從體液中提取外泌體后,體液可長期穩(wěn)定保存,因此外泌體有望成為臨床檢測的新型疾病生物標(biāo)記。外泌體與各種疾病的相關(guān)性被檢測出,特別是血液中釋放的病細(xì)胞來源的外泌體,其與正常細(xì)胞來源外泌體在結(jié)構(gòu)分子上的差異倍受矚目,并作為癥狀早期診斷技術(shù),應(yīng)用于與癥狀進(jìn)展相關(guān)的研究。甚至人們期望將尿液中的外泌體作為腎臟、前列腺疾病、膀胱疾病的新型診斷標(biāo)記,髓液中的外泌體作為腦內(nèi)種瘤和神經(jīng)退行性疾病的新型標(biāo)記物。干細(xì)胞外泌體攝取流式細(xì)胞技術(shù)是細(xì)胞和小顆粒定性和定量表征的有效方法。山東腹水外泌體透射電鏡檢測
通過壓制或去除這些外泌體,有希望壓制疾病發(fā)生。江蘇細(xì)胞外泌體WB
由于這些胞外囊泡(EV)與生理和病理狀況之間的關(guān)系,人們對EV的興趣呈指數(shù)增長。 EVs對新型診斷和臨床轉(zhuǎn)化有很大希望。近的研究已經(jīng)將這些交流所需的一些任務(wù)歸結(jié)為細(xì)胞外囊泡(如外泌體和微泡),主要參與髓鞘膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元之間的相互信號傳遞從而促進(jìn)神經(jīng)元存活、由小膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答、突觸組裝和可塑性。這種囊泡也被認(rèn)為是神經(jīng)變性疾病和腦病擴(kuò)散的重要因素。這些細(xì)胞外囊泡功能為以前無法識別的神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)跨細(xì)胞相互作用增加了新方式。江蘇細(xì)胞外泌體WB