由于這些胞外囊泡（EV）與生理和病理狀況之間的關(guān)系，人們對(duì)EV的興趣呈指數(shù)增長(zhǎng)。 EVs對(duì)新型診斷和臨床轉(zhuǎn)化有很大希望。近的研究已經(jīng)將這些交流所需的一些任務(wù)歸結(jié)為細(xì)胞外囊泡（如外泌體和微泡），主要參與髓鞘膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元之間的相互信號(hào)傳遞從而促進(jìn)神經(jīng)元存活、由小膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答、突觸組裝和可塑性。這種囊泡也被認(rèn)為是神經(jīng)變性疾病和腦病擴(kuò)散的重要因素。這些細(xì)胞外囊泡功能為以前無(wú)法識(shí)別的神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)跨細(xì)胞相互作用增加了新方式。免疫印跡法（WB）和Elisa檢測(cè)法作為被普遍應(yīng)用的外泌體檢測(cè)的一般方法。江西外泌體miRNA芯片
為了解決外泌體實(shí)驗(yàn)遇到的上述的各種問(wèn)題, Wako 研發(fā)出MagCapture?外泌體提取試劑盒PS（MagCapture? Exosome Isolation Kit PS）提取高純度細(xì)胞外囊泡。外泌體膜含有分泌細(xì)胞源的蛋白和脂質(zhì)，眾所周知磷脂酰絲氨酸（PS）在活細(xì)胞通過(guò)翻轉(zhuǎn)酶作用導(dǎo)向細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)，暴露在外泌體膜外側(cè)3）。另外，T-cell immunoglobulin domain and mucin domain-containing protein 4（Tim4 通過(guò)巨噬細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞凋亡的吞噬受體）蛋白通過(guò)細(xì)胞外域IgV域與含有鈣離子的PS結(jié)合4）。基于上述知識(shí)，我們利用Tim4固化磁珠，在鈣離子存在下捕捉培養(yǎng)上清和血清等樣品中的外泌體，再添加螯合劑洗脫外泌體，這種外泌體純化方法是和金澤大學(xué)醫(yī)學(xué)系免疫學(xué)華山教授共同開(kāi)發(fā)，并取得了成功。5）這是迄今為止取代黃金標(biāo)準(zhǔn)超速離心法的新型外泌體純化方法。植物外泌體染色PKH67/PKH26外泌體可以作為“天然的納米粒子”來(lái)進(jìn)行藥物遞送。
膜封閉的囊泡釋放到周?chē)h(huán)境中已經(jīng)成為近幾年來(lái)越來(lái)越受關(guān)注的問(wèn)題。令人信服的證據(jù)表明囊泡可交換復(fù)雜的信息有助于這種興趣的興起。但是，也已經(jīng)清楚，不同類(lèi)型的分泌囊泡共存，具有不同的細(xì)胞內(nèi)起源和形成模式，因此可能具有不同的組成和功能。外泌體是分泌囊泡的一種亞型。它們?cè)谡婧思?xì)胞內(nèi)的多泡小體中形成，并且當(dāng)這些多泡小體與質(zhì)膜融合時(shí)分泌到細(xì)胞外。有趣的是，不同的分子家族已被證明參與細(xì)胞內(nèi)形成外泌體及其隨后的分泌，這表明即使在外泌體中也存在不同的亞型。
理論上，所有促進(jìn)肺病細(xì)胞分泌外泌體的機(jī)制都可以被用來(lái)作為肺病醫(yī)治的潛在靶點(diǎn)，但目前關(guān)于其可行性的研究還比較少。有研究表明，種瘤來(lái)源的外泌體對(duì)種瘤免疫的調(diào)控具有一定的影響作用，包括免疫壓制和免疫開(kāi)啟兩個(gè)方面。Romagnoli等研究發(fā)現(xiàn)，肺病細(xì)胞可以刺激樹(shù)突狀細(xì)胞等抗原提呈細(xì)胞產(chǎn)生攜帶特異抗原的外泌體，這些外泌體可以遷移到區(qū)域淋巴結(jié)，進(jìn)而開(kāi)啟CD4+T與CD8+T細(xì)胞產(chǎn)生抗種瘤免疫反應(yīng)，進(jìn)而壓制種瘤生長(zhǎng)。Besse等研究發(fā)現(xiàn)，在晚期NSCLC患者中，裝載有IFN-γ，MHC I和MHCⅡ限制抗原的樹(shù)突狀細(xì)胞外泌體增強(qiáng)了NK細(xì)胞的抗種瘤免疫功能，研究證實(shí)外泌體參與相關(guān)種瘤生理病理過(guò)程，在NSCLC免疫醫(yī)治中有著重要的臨床應(yīng)用價(jià)值，為NSCLC的醫(yī)治打開(kāi)了新的視野。疾病的進(jìn)展和對(duì)診療的反應(yīng)可以通過(guò)外泌體的多組分分析來(lái)確定。
全自動(dòng)外泌體熒光檢測(cè)分析系統(tǒng)的基本原理是一種基于特異性免疫捕獲技術(shù)，允許研究者直接分析特定群體的外泌體或外囊泡。通過(guò)配套的試劑盒，客戶一次性能夠分析多達(dá)9個(gè)不同的樣本，很大節(jié)省了時(shí)間和經(jīng)濟(jì)成本。全自動(dòng)外泌體熒光檢測(cè)分析系統(tǒng)兼容各種生物樣本，除了純化的外泌體之外，對(duì)于血液、尿液、腹水中的外泌體也可直接檢測(cè)分析，很大拓展了研究范圍。全自動(dòng)的可對(duì)單個(gè)外泌體進(jìn)行表征分析的全新設(shè)備。該設(shè)備能夠提供全部的外泌體表征信息，包括外泌體粒徑大小、計(jì)數(shù)、分布、攜帶蛋白表達(dá)、生物標(biāo)志物（CD9，CD81，CD63等）共定位等。操作簡(jiǎn)單，結(jié)果可靠。一經(jīng)推出，便引起了外泌體領(lǐng)域科研工作者的普遍關(guān)注，短短兩年時(shí)間在全球已有50多個(gè)實(shí)驗(yàn)室采用該技術(shù)，發(fā)表重要文獻(xiàn)近百篇。隨著EV研究倍受世界矚目，各國(guó)啟動(dòng)了大型研究項(xiàng)目。江西外泌體miRNA芯片
突狀細(xì)胞釋放的外泌體可以強(qiáng)化殺傷性T細(xì)胞對(duì)癥狀細(xì)胞的特異性反應(yīng)。江西外泌體miRNA芯片
過(guò)細(xì)胞分泌到外泌體中的分子引起的。其中已發(fā)現(xiàn)外泌體內(nèi)含有分泌細(xì)胞來(lái)源mRNA和miRNA，外泌體與細(xì)胞間遺傳基因表達(dá)信息的水平傳播相關(guān)性倍受矚目。這些RNA被外泌體的脂質(zhì)雙層膜所保護(hù)，不會(huì)被核糖核酸酶所分解，可以在血液和體液中穩(wěn)定存在。被靶細(xì)胞吞噬的外泌體通過(guò)與內(nèi)體膜融合，將RNA釋放到靶細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中。釋放出來(lái)的mRNA翻譯為蛋白質(zhì)，但miRNA壓制目的基因的翻譯，因此外泌體在靶細(xì)胞內(nèi)控制基因的表達(dá)。外泌體的蛋白質(zhì)有數(shù)萬(wàn)種，mRNA、miRNA的種類(lèi)有數(shù)千種以上，它們的結(jié)構(gòu)除了受細(xì)胞來(lái)源不同的影響，還受到細(xì)胞狀態(tài)不同的影響。江西外泌體miRNA芯片