除了RAB蛋白，外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白（包括膜聯(lián)蛋白1、2、4、5、6、7、11等）。外泌體膜上富含參與外泌體運輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63, CD81 和CD9)）、熱休克蛋白家族（(HSP60, HSP70, HSPA5, CCT2 和HSP90以及一些細(xì)胞特異性的蛋白包括A33（結(jié)腸上皮細(xì)胞來源）、MHC-Ⅱ(抗原提呈細(xì)胞來源)、CD86(抗原提呈細(xì)胞來源)以及乳凝集素（不成熟的樹突狀細(xì)胞）。其它一些外泌體中的蛋白包括多種的代謝類的酶（DH, 烯醇化酶 1, 醛縮酶 1, PKM2, PGK1, PDIA3, GSTP1,DPP4, AHCY, TPL1, 抗氧化蛋白, P4HB, LDH, 親環(huán)素 A,FASN, MDH1 和CNP）、核糖體蛋白（RPS3）、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)因子（黑色素瘤分化相關(guān)因子, ARF1, CDC42, 人類紅細(xì)胞膜整合蛋白, SLC9A3R1）、粘附因子（MFGE8、整合素）、細(xì)胞骨架蛋白以及泛素等。尚未完全發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)外泌體細(xì)胞結(jié)合的途徑。體液外泌體western blot
外泌體是包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡 (30–150nm)，由所有體外和體內(nèi)細(xì)胞持續(xù)分泌。由于人體內(nèi)復(fù)雜的功能，包括細(xì)胞間通訊和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，外泌體正在改變研究。這些細(xì)胞外囊泡正在生長，這既是為了了解其生物學(xué)功能，也是為了將其用于實際應(yīng)用，如無創(chuàng)診斷和高級醫(yī)治開發(fā)。提供一系列外泌體分離產(chǎn)品和工具，用于表征和分析其RNA和蛋白質(zhì)含量，以及體外和體內(nèi)追蹤，以幫助您進(jìn)一步了解這些迷人的外泌體。超速離心方案可能冗長乏味且耗時的。您可使用靈活且可擴展的總外泌體分離試劑從細(xì)胞培養(yǎng)基或任何體液中即刻分離完整的外泌體。這些試劑及其隨附的方案是多種試驗的理想選擇，包括處理少量樣本和處理多個樣本。安徽外泌體脂質(zhì)組學(xué)隨著今后的研究發(fā)展，外泌體功能逐步清晰，并擴大臨床應(yīng)用。
全自動外泌體熒光檢測分析系統(tǒng)能夠?qū)?50 nm的外泌體進(jìn)行全方面的表征，無論是粒徑尺寸、粒徑分布還是外泌體的亞型均可在一次測試中得到。并且所用來測試的樣本無需進(jìn)行純化，避免因純化帶來的樣本偏差。分析不同大小和不同尺度的外泌體亞群，在CD171過表達(dá)系統(tǒng)中，100 nm以上的外泌體只表達(dá)了CD171。通過抗體捕獲的模式，全自動外泌體熒光檢測分析系統(tǒng)能夠量化含有不同標(biāo)記物的外泌體亞群，并對不同種群的外泌體進(jìn)行特異性計數(shù)和分析。整個過程無需純化，并且線性范圍可跨越3個數(shù)量級。
l 親脂染料標(biāo)記外泌體：目前已發(fā)表的外泌體文章中，外泌體大多使用親脂性染料進(jìn)行標(biāo)記，體內(nèi)和體外都有較多應(yīng)用。親脂性染料主要分為兩大類，一類是PKH67（綠色熒光）/PKH26（紅色熒光），由于它們可以與外泌體的脂質(zhì)雙層膜穩(wěn)定結(jié)合，所以染色效果較好，應(yīng)用較普遍。第二類是Di系列的親脂性染料，包括DiI（橙色熒光）、DiO（綠色熒光）、DiD（紅色熒光）、DiR（深紅色熒光）。其中DiR的紅外熒光可穿透細(xì)胞和組織，在活成像中用來示蹤。外泌體作為膜和細(xì)胞溶質(zhì)蛋白、脂質(zhì)和RNA細(xì)胞之間傳遞的載體。
外泌體是由各種細(xì)胞分泌的小型膜囊泡（直徑30~100nm），存在于大多數(shù)體液（如血液、尿液、髓液等）和細(xì)胞培養(yǎng)液中。外泌體是由脂質(zhì)雙層膜包被的膜囊泡，產(chǎn)生于稱為多囊泡體的細(xì)胞外囊泡中，多囊泡體通過與細(xì)胞膜融合將外泌體釋放到細(xì)胞外。外泌體含核內(nèi)體來源的蛋白質(zhì)（如ESCRTs）、細(xì)胞內(nèi)運輸相關(guān)蛋白（如RabGTPase等）及細(xì)胞膜來源蛋白（如CD63, CD81等）等各種內(nèi)分泌細(xì)胞來源的蛋白和RNA，同時還含有分泌細(xì)胞膜來源和內(nèi)體膜來源的脂質(zhì)（如膽固醇和鞘磷脂等）。外泌體的納米球膜型結(jié)構(gòu)由雙層脂質(zhì)形成。浙江胸水外泌體western blot
幾乎沒有混入外泌體以外的蛋白，回收量高，操作重復(fù)性好。體液外泌體western blot
結(jié)果表明，PS親和法可以檢測到許多目前為止都無法檢測的外泌體蛋白質(zhì)和RNA。應(yīng)用Tim4的外泌體強結(jié)合能力，可用ELISA或FACS高靈敏度定性檢測、定量分析外泌體。以前無法用超速離心法提取的微囊泡，也通過運用PS親和法實現(xiàn)高純度提取。本指導(dǎo)書中對該技術(shù)進(jìn)行詳細(xì)說明，這項技術(shù)的有用性今后將受到世界各方評價，有望在外泌體和微囊泡生理功能的分析研究上起重大貢獻(xiàn)。外泌體的檢測和提取還遇到一個困難即：對各種外泌體的分類。研究人員尚未統(tǒng)一定義以何種方法提取的細(xì)胞外囊泡可以稱之為外泌體，給實驗數(shù)據(jù)的分析和重復(fù)性確認(rèn)帶來困難。近年，隨著國際細(xì)胞外囊泡協(xié)會的成立、世界性研究者研討會的舉辦，提案MISEV指南作為國際標(biāo)準(zhǔn)，計劃或已經(jīng)開始進(jìn)行EV研究的科學(xué)家請務(wù)必閱讀這些方針。體液外泌體western blot