中流細胞的異常增殖和高遷移水平是惡性中流細胞發(fā)生轉(zhuǎn)移的重要特征。通過實驗可以用含藥外泌體DATS-Exo、空白外泌體Exo和DATS處理B16BL6細胞24h后,然后采用MTT的方法檢測細胞的增殖活性。實驗結(jié)果顯示,DATS-Exo與DATS都能夠有效抑制B16BL6細胞的增殖,且與DATS組相比,DATS-Exo的抑制作用更強。通過經(jīng)典的劃痕法考察含藥外泌體DATS-Exo的抑制中流細胞水平遷移能力,DATS-Exo組與DATS組相比具有更強的抑制效果。實驗結(jié)果表明,將大蒜素DATS制備成外泌體載藥系統(tǒng)是可以明顯提高其體外抗中流細胞轉(zhuǎn)移的能力。外泌體載帶miR一26a、miR一200b等可用于抗中流、糖尿病性創(chuàng)傷、腸纖維化的zhiliao。遼寧動物組織樣本外泌體載藥價格比較
有研究發(fā)現(xiàn),在外泌體載藥系統(tǒng)中,對外泌體的產(chǎn)生環(huán)境進行干擾(如,缺氧)能夠改變外泌體的分泌組分。Zhu等人研究了缺氧處理的間充質(zhì)干細胞(MSCs)來源外泌體(ExoH)在心肌修復(fù)方面是否優(yōu)于其在常氧條件下產(chǎn)生的外泌體(ExoN)。在小鼠心肌梗死實驗中,ExoH處理的小鼠具有更高的生存率、更小的疤和更好的心臟功能恢復(fù)。進一步研究發(fā)現(xiàn),相比于ExoN,ExoH具有更高表達水平的miR-210以及對外泌體分泌至關(guān)重要的中性鞘磷脂酶2(nSMase2)的表達。類似地,Zhu等人發(fā)現(xiàn)缺氧條件下MSC-Exo遞送的miR125b-5p能夠通過改善心肌細胞凋亡來促進缺血性心臟修復(fù)。此外,他們還將ExoH與缺血心肌靶向肽綴合,構(gòu)建了一種新型的藥物遞送載體,增強了缺血性疾病的藥物遞送特異性。組織樣本外泌體載藥實驗價格比較裝載了連翹酯苷A(FTA)的A549來源的外泌體可以被A549細胞攝取。
間充質(zhì)干細胞(MSC)的外泌體成為有潛力的天然藥物遞送載體的優(yōu)勢:與其他來源外泌體的產(chǎn)生機制一致,即首先由細胞質(zhì)膜內(nèi)陷形成內(nèi)體,然后內(nèi)體向內(nèi)出芽形成多泡體,而多泡體具有兩種命運,一種是移動到細胞表面與質(zhì)膜融合,以胞吐的方式將外泌體釋放到細胞外;另一種是與溶酶體結(jié)合,將內(nèi)容物降解。MSC-Exo具有外泌體的共同特征,即富含四跨膜蛋白CD9、CD63、CD81,整合素,主要組織相容性復(fù)合物Ⅰ、Ⅱ,熱休克蛋白,多泡體合成相關(guān)蛋白(ALIX、TSG101),核酸,膽固醇、磷酸甘油酯、鞘磷脂等。此外,MSC-Exo還具有特異性標志物,例如,CD29、CD90、CD73和CD44等。MSC-Exo具有與MSCs相似的生物學(xué)功能,而且避免了細胞移植的風(fēng)險,易于獲取、儲存和管理;可控性高、免疫原性低、安全性好。
中流壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TNFrelatedapoptosisinducedligand,TRAIL)能夠在多種中流細胞中誘導(dǎo)選擇性凋亡,而對正常細胞無毒性作用,已經(jīng)成為臨床前研究中有發(fā)展前景的抗中流藥物之一。Shamili等人利用非病毒載體將編碼TRAIL-GFP的質(zhì)粒載入間充質(zhì)干細胞(MSCs)。研究結(jié)果表明,MSCs衍生的負載TRAIL的外泌體(Exo TRAIL)通過促使ai細胞大量壞死抑制黑色素瘤進展,并且其抗中流活性呈現(xiàn)劑量依賴性。間充質(zhì)干細胞外泌體(MSC-Exo)還能夠通過遞送內(nèi)源性或者外源性的miRNA或蛋白質(zhì),zhiliao其他多種中流。對于水溶性的藥物可用電穿孔的方法將藥物載入外泌體中。
間充質(zhì)干細胞外泌體(MSC-Exo)在外泌體載藥中作為藥物遞送的載體具有獨特優(yōu)勢。目前臨床上普遍使用MSCs的原代細胞,雖然其可以產(chǎn)生大量的外泌體,但是對于大規(guī)模生產(chǎn)來說,它的增殖能力有限,產(chǎn)生的外泌體可能具有批次間的差異。Chen等人發(fā)現(xiàn),使用c-myc轉(zhuǎn)染人胚胎干細胞衍生的間充質(zhì)干細胞(hESC-MSC),能夠在不影響外泌體生產(chǎn)質(zhì)量的前提下,提高MSCs的增殖率,縮短生產(chǎn)時間。轉(zhuǎn)染的hESC-MSC能夠供應(yīng)毫克范圍內(nèi)的外泌體,為生產(chǎn)具有生物學(xué)效益的外泌體提供了一定的可行性。此外,還可以對外泌體進行功能化修飾,進一步增強外泌體的作用優(yōu)勢。外泌體的功能化修飾能夠延長外泌體的循環(huán)時間、增強外泌體在細胞質(zhì)的遞送效率和促使外泌體具有更強的靶向性。外泌體作為內(nèi)源性的天然納米材料,在藥物的遞送中有著獨特的優(yōu)勢。湖南組織外泌體載藥參考價格
將藥物載入外泌體的方法主要有兩種:前轉(zhuǎn)載和后轉(zhuǎn)載。遼寧動物組織樣本外泌體載藥價格比較
外泌體的提取方法在外泌體載藥系統(tǒng)中應(yīng)用——聚合物沉淀法。用于分離病毒和其他的生物大分子,已有50多年歷史,近幾年,將其作為一種新的方法來分離外泌體。目前,市場已經(jīng)有應(yīng)用聚乙二醇(polyeth yleneglycol,PEG)溶液提取外泌體的試劑盒,常見的是SystemBiosciences公司的ExoQuick?和ExoQuick-TC?kits,該試劑盒操作簡單不需要特殊的儀器,但是價格昂貴。提取外泌體的試劑盒主要成分是PEG8000(30%~50%),將試劑盒與體液或細胞培養(yǎng)液4℃孵育過夜,之后再低速離心。即可進行外泌體的提取,此方法實行起來較為簡單。遼寧動物組織樣本外泌體載藥價格比較
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