外泌體能攜帶多種生物活性分子循環(huán)于血液／體液中并介導(dǎo)長(zhǎng)距離的細(xì)胞間通訊，中流來(lái)源外泌體富含的蛋白質(zhì)、核苷酸、脂質(zhì)等分子能夠反映其來(lái)源細(xì)胞的生理及病理狀態(tài)，外泌體特殊的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)能保護(hù)其內(nèi)RNA等分子免于降解，因此，檢測(cè)中流外泌體成為液體活檢一個(gè)明顯優(yōu)勢(shì)。臨床試驗(yàn)研究表明，外泌體在多種疾病的早期診斷、療效和預(yù)后監(jiān)測(cè)等方面都具備較好的應(yīng)用價(jià)值，正逐漸成為臨床診療中新的、理想的生物標(biāo)志物和可能的靶向藥物載體。隨著技術(shù)的進(jìn)步，組學(xué)時(shí)代的到來(lái)，大規(guī)模蛋白質(zhì)組學(xué)已經(jīng)被聯(lián)合應(yīng)用于篩選和揭示多種ai癥細(xì)胞外囊泡的標(biāo)志物。來(lái)源于ai細(xì)胞的外泌體對(duì)自然殺傷細(xì)胞具有細(xì)胞毒性作用。江西胸水外泌體鑒定
從體液中高精度分離小細(xì)胞外囊泡 (sEV) 對(duì)于開(kāi)發(fā)下一代液體活檢和再生療法至關(guān)重要。然而，目前的 sEV 分離方法需要專門(mén)的設(shè)備和耗時(shí)的協(xié)議，并且難以產(chǎn)生高純度的 sEV 亞群。在這里，我們介紹了通過(guò)波柱激發(fā)共振 (ANSWER) 進(jìn)行的聲學(xué)納米級(jí)分離，它允許單步、快速（<10 分鐘）、高純度（>96% 小外泌體，>80% 外泌體）分離來(lái)自無(wú)需任何樣品預(yù)處理的體液樣品。粒子通過(guò)激發(fā)共振以尺寸選擇性的方式迭代偏轉(zhuǎn)。這種以前未發(fā)現(xiàn)的現(xiàn)象使用表面聲波在流體中產(chǎn)生虛擬的、可調(diào)諧的柱狀聲場(chǎng)模式。無(wú)需樣品預(yù)處理或復(fù)雜納米制造方法的高精度 sEV 分離已使用 ANSWER 進(jìn)行了證明，顯示出作為強(qiáng)大工具的潛力，可以對(duì) sEV 亞群的復(fù)雜性、異質(zhì)性和功能進(jìn)行更深入的研究。北京血清外泌體外泌體在組織修復(fù)領(lǐng)域均起著重要的作用，并且可以作為很好靶向給藥系統(tǒng)。
微小RNA(miRNA)和細(xì)胞外囊泡中包含的其他成分可能反映疾病的存在。特發(fā)性肺纖維化(IPF)患者的肺組織、痰液和血清顯示出miRNA表達(dá)的改變。我們?cè)O(shè)計(jì)這項(xiàng)研究是為了測(cè)試來(lái)自IPF個(gè)體的尿液和/或組織來(lái)源的外泌體miRNA是否攜帶可促進(jìn)纖維化的物質(zhì)。從尿液(U-IPFexo)、肺組織肌成纖維細(xì)胞(MF-IPFexo)、患有IPF的個(gè)體(n=16)和年齡/性別匹配的無(wú)肺病對(duì)照(n=10)的血清中分離外泌體。我們分析了分離的外泌體的microRNA表達(dá)及其體內(nèi)生物分布。我們研究了對(duì)離體皮膚傷口愈合和體內(nèi)小鼠肺模型的影響。U-IPFexo或MF-IPFexo表達(dá)miR-let-7d、miR-29a-5p、miR-181b-3p和miR-199a-3p，這與之前關(guān)于從IPF患者的肺組織/血清中獲得的miRNA表達(dá)的報(bào)道一致。體內(nèi)生物分布實(shí)驗(yàn)在靜脈輸注后5分鐘內(nèi)檢測(cè)到正常C57Bl6小鼠肺部的生物發(fā)光外泌體，隨后分布到其他organ，無(wú)論外泌體來(lái)源如何。在肺泡上皮I型和II型細(xì)胞中觀察到用金納米粒子標(biāo)記并通過(guò)透射電子顯微鏡成像的外泌體。用U-IPFexo或MF-IPFexo處理非纖維化肺獲得的人和小鼠肺穿孔產(chǎn)生纖維化表型。在人體離體皮膚模型和體內(nèi)肺模型中也誘導(dǎo)了纖維化表型。我們的結(jié)果提供了IPF系統(tǒng)特征的證據(jù)，即從纖維化來(lái)源獲得的外泌體含有促纖維化miRNA。
在利用外泌體運(yùn)輸PTX進(jìn)行抗中流的研究中，由于間充質(zhì)干細(xì)胞可以歸巢(homing)至中流細(xì)胞微環(huán)境并且可以不通過(guò)基因操作即可對(duì)PTX運(yùn)輸，因此Pessina等采用間充質(zhì)干細(xì)胞SR4987作為分泌外泌體的母代細(xì)胞，而后將SR4987與PTX共混，使SR4987分泌的外泌體含有PTX，再利用超速離心法將載有PTX的外泌體分離出來(lái)，研究其對(duì)體外人胰腺ai細(xì)胞株的影響。結(jié)果表明外泌體可以有效的運(yùn)載PTX并不破壞其功能，小泡(主要指外泌體)溶液的蛋白質(zhì)濃度在0.047～0.095mg/mL之間時(shí)可以誘導(dǎo)中流細(xì)胞凋亡50%，這種抑制效果與純PTX對(duì)體外ai細(xì)胞的抑制效果相當(dāng)。外泌體參與細(xì)胞分化、新生血管形成、促進(jìn)血流恢復(fù)和毛xi血管網(wǎng)形成。
在運(yùn)輸DOX的研究中，Wei等選擇了已經(jīng)在臨床上使用的未成熟的樹(shù)突細(xì)胞作為母代細(xì)胞，通過(guò)化學(xué)轉(zhuǎn)染使其分泌的外泌體表面含有Lamp2b，這種蛋白可以與αv整合蛋白特異性iRGD肽結(jié)合，使外泌體對(duì)DOX的運(yùn)輸具有靶向性。將對(duì)iRGD肽靶向的外泌體和未經(jīng)靶向性處理的外泌體用DiR染料標(biāo)記，并分別靜脈注射入移植了人乳腺ai細(xì)胞的小鼠體內(nèi)，觀察到靶向的外泌體在注射30min后已經(jīng)出現(xiàn)在中流組織處，在注射2h后外泌體的含量高，而未經(jīng)靶向性處理的外泌體在注射后主要集中在肝臟，幾乎很少到達(dá)中流組織處，說(shuō)明對(duì)iRGD肽靶向的外泌體具有很好的靶向性。中流細(xì)胞來(lái)源的外泌體能促進(jìn)中流的轉(zhuǎn)移。江蘇外泌體染色
健康母乳來(lái)源的外泌體含與免疫功能相關(guān)的miRNA，能在體外增強(qiáng)外周血來(lái)源的T調(diào)節(jié)細(xì)胞數(shù)量，調(diào)節(jié)免疫耐受。江西胸水外泌體鑒定
由于卵巢中流細(xì)胞質(zhì)膜上的磷脂酰絲氨酸（phosphati[1]dylserine，PS）可以外泌體形式分泌入血，惡性卵巢ai患者血漿外泌體中的PS水平明顯高于卵巢良xing病變患者和健康對(duì)照者，因此外泌體中的PS可用于協(xié)助早期卵巢惡性中流的篩查和診斷。外泌體可穿透血-腦脊液屏障的特點(diǎn)也為腦中流患者提供了早期診斷的重要工具。血漿微囊泡EGFRvIII mRNA已被證明可作為膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者診斷的支持證據(jù)。2020年，David Lyden和William R. Jarnagin教授團(tuán)隊(duì)合作，通過(guò)探究來(lái)自不同ai種組織、血漿和其他體液的426個(gè)人類樣品中細(xì)胞外囊泡和顆粒（extracellular vesicle and particle，EVP）的蛋白質(zhì)組學(xué)特征，鑒定出一批中流特異性血漿EVP蛋白（特異度和靈敏度分別為95%和90%），并可區(qū)分患者的中流類型，使基于外泌體的中流診斷和鑒別診斷向前邁進(jìn)了一步。江西胸水外泌體鑒定
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