外泌體的提取方法在外泌體載藥系統(tǒng)中應(yīng)用——尺寸排阻色譜法。尺寸排阻色譜法時外泌體提取的一種方法，利用分子篩理論,開始是根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小分離蛋白質(zhì)的色譜技術(shù)。該方法的主要優(yōu)點是不需要很大的離心力,從而保證了外泌體的完整性。對比超高速離心和尺寸排阻色譜法得到的外泌體蛋白,結(jié)果顯示, 尺寸排阻色譜法得到的外泌體的蛋白豐度高于超高速離心法。這些基于過濾或尺寸排阻色譜的新方法為外泌體大規(guī)模的生產(chǎn)和臨床應(yīng)用提供了可能。超濾也是根據(jù)外泌體的尺寸將其分離出來的一種方法,超濾一般被認(rèn)為是外泌體分離過程中的一個準(zhǔn)備過程,通過超濾除去大分子和小分子的蛋白質(zhì)。不過連續(xù)的超濾可以分離出外泌體,和超高速離心相比,超濾不需要特殊的設(shè)備就可以較短時間內(nèi)分離出外泌體。但是,超濾膜對外泌體的黏附作用會降低外泌體的產(chǎn)量,并且超濾過程中施加的外力可能會使外泌體變形或者破裂。外泌體已開發(fā)作為多種藥物的載體，主要包括抗中流藥物類、kang炎藥物類、基因類及蛋白類等其他類型藥物。上海細(xì)胞樣本外泌體載藥實驗價格比較
中流壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TNFrelatedapoptosisinducedligand，TＲAIL)能夠在多種中流細(xì)胞中誘導(dǎo)選擇性凋亡，而對正常細(xì)胞無毒性作用，已經(jīng)成為臨床前研究中有發(fā)展前景的抗中流藥物之一。Shamili等人利用非病毒載體將編碼TＲAIL-GFP的質(zhì)粒載入間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）。研究結(jié)果表明，MSCs衍生的負(fù)載TＲAIL的外泌體(Exo TＲAIL)通過促使ai細(xì)胞大量壞死抑制黑色素瘤進展，并且其抗中流活性呈現(xiàn)劑量依賴性。間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體（MSC-Exo）還能夠通過遞送內(nèi)源性或者外源性的miＲNA或蛋白質(zhì)，zhiliao其他多種中流。組織外泌體載藥參考價裝載紫杉醇的外泌體可有效抑制胰腺ai細(xì)胞的增殖。
通過體外實驗結(jié)果得出，負(fù)載miＲ-132的間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體能夠明顯增加內(nèi)皮細(xì)胞的管腔樣結(jié)構(gòu);在體內(nèi)實驗中，外泌體預(yù)處理的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞具有更強的血管生成能力。此外，在小鼠缺血心臟中植入的包載miＲ-132的外泌體明顯增強了梗塞周圍區(qū)域新血管生成并保護了心臟功能。心肌梗死后，移植MSCs的zhiliao作用也可能是由負(fù)載miＲ-125b-5p的外泌體改善自噬流實現(xiàn)的。有研究利用重組腺病毒介導(dǎo)miＲ-486基因修飾MSCs，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，其能夠提高MSC-Exo中miＲ-486的水平，而且發(fā)現(xiàn)高表達(dá)miＲ-486的MSC-Exo具有促進心肌細(xì)胞增殖、遷移以及抑制心肌細(xì)胞凋亡的作用，有望成為心臟再生修復(fù)的新策略。
由于外泌體中含有大量的蛋白質(zhì)和核酸，因此外泌體能將這些物質(zhì)轉(zhuǎn)運至靶細(xì)胞，對機體生物學(xué)功能發(fā)揮調(diào)控作用?；谕饷隗w自身的結(jié)構(gòu)特點和生物學(xué)功能，其作為藥物載體和zhiliao系統(tǒng)用于臨床惡性中流疾病的zhiliao成為研究熱點。在外泌體載藥系統(tǒng)中，外泌體作為藥物載體，信息傳遞（如mRNA）效率低及缺乏設(shè)計外泌體的方法阻礙了它們zhiliao干預(yù)的發(fā)展。目前的大部分研究是通過基因工程技術(shù)將靶向肽定位到外泌體膜上，從而使外泌體獲得靶向性。在小鼠模型中利用外泌體裝載姜黃素和過氧化氫酶可證明其在神經(jīng)保護方面的作用。
疏水性的小分子藥物如紫杉醇、紫衫酚、阿霉素（DOX）、姜黃素等可以通過與分離純化的外泌體共孵育，將藥物負(fù)載到外泌體中。這種方法的載藥量往往較低，通過高效液相色譜檢測紫衫醇的載藥量一般為7.2％，DOX的載藥量一般為11.2％。為了達(dá)到高效負(fù)載藥物的目的，研究人員采用了電穿孔、擠出、輔助超聲、低滲透析等一系列載yao方式將疏水性卟啉化合物載入到外泌體中。研究結(jié)果顯示，電穿孔法、擠出、超聲、低滲透析等一系列載yao方式都可以提高卟啉化合物的載藥量。尤其是超聲和低滲透析方法可以提高卟啉化合物的載藥量到11倍。將姜黃素裝載到cRGD外泌體上，外泌體的施用對病變區(qū)域的炎癥反應(yīng)和細(xì)胞凋亡具有強烈的抑制作用。組織外泌體載藥參考價
外泌體載藥中外泌體提取的方法可聯(lián)合使用各種方法,從而得到高純度和高產(chǎn)量的外泌體。上海細(xì)胞樣本外泌體載藥實驗價格比較
外泌體載藥系統(tǒng)一直是眾多研究者關(guān)注的焦點。外泌體作為一種潛在的理想型藥物遞送載體，可以利用化學(xué)和基因工程等方法對其進行內(nèi)部及膜表面工程化改造，將化學(xué)藥物、功能短肽、小干擾RNA等多種生物活性物質(zhì)包載到外泌體中，可實現(xiàn)特定類型的細(xì)胞或組織的靶向藥物遞送。外泌體的生成是一個自然過程，與其他人工合成的載藥系統(tǒng)相比，其裝載方案有多種，如分泌前細(xì)胞工程裝載和純化后外泌體裝載。但需要注意的是，外泌體裝載合成的反應(yīng)條件可能會對外泌體及其母細(xì)胞產(chǎn)生不利的影響，而且體外實驗和體內(nèi)動物模型實驗都需要大量的母細(xì)胞分泌產(chǎn)生足夠的外泌體。因此，如何提高外泌體載藥系統(tǒng)的產(chǎn)量應(yīng)用于臨床疾病的zhiliao將是一個挑戰(zhàn)。上海細(xì)胞樣本外泌體載藥實驗價格比較
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