遼寧水果外泌體NTA

來源: 發(fā)布時間:2022-11-12

為獲得外泌體的大小、濃度、形態(tài)及蛋白質(zhì)組成等信息,可以通過電鏡、動態(tài)光散射、納米顆粒跟蹤分析儀、蛋白質(zhì)免疫印跡、酶聯(lián)免疫吸附法、流式細胞儀等對外泌體進行表征。通過電鏡可獲得外泌體的形態(tài)信息,不同類型的顯微鏡由于操作環(huán)境不同,得到的外泌體形態(tài)存在差異。例如,在掃描電鏡、透射電鏡和原子力顯微鏡中,外泌體呈現(xiàn)囊泡獨有的茶托形,可能由于樣品在固定或染色過程中極度脫水,導(dǎo)致外泌體塌陷所致。與之相反,在冷凍電鏡中外泌體呈現(xiàn)圓形,由于不會脫水變性,所得的外泌體形態(tài)可能更加接近囊泡的真實狀態(tài)。另外,由于透射電鏡和原子力顯微鏡具有較高分辨率,也能夠提供外泌體磷脂雙分子層厚度、粒徑分布等信息。外泌體由于包含的內(nèi)容物具有明顯的組織特異性,為其能成為瘤早期診斷的生物標志物提供了重要保障。遼寧水果外泌體NTA

與正常細胞相比,中流細胞外泌體的分泌量增多,內(nèi)容物也存在明顯差異。由于囊泡結(jié)構(gòu)的保護,中流細胞來源的外泌體內(nèi)攜帶有大量中流細胞來源的活性生物分子,其特點包括:(1)提供具有穩(wěn)定構(gòu)象的蛋白質(zhì)分子;(2)保持蛋白質(zhì)的生物活性;(3)攜帶其中的生物分子經(jīng)體液運輸至遠端qi官;(4)膜融合的作用方式使得中流細胞來源的外泌體能夠與靶細胞之間進行更有效的信息交流。外泌體介導(dǎo)中流轉(zhuǎn)移:體外研究和體內(nèi)成像實驗表明惡性中流細胞產(chǎn)生的外泌體可以在全身水平上被同一中流或遠端中流中惡性程度較低的ai細胞攝入,其內(nèi)所包含的與轉(zhuǎn)移相關(guān)的mRNAs進入轉(zhuǎn)移性較低的細胞后,能夠增強其轉(zhuǎn)移能力。河南水果外泌體外泌體型PD-L1穩(wěn)定且可與外泌體表面的主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ協(xié)同作用。

Pascucci等將包含有紫杉醇的間充質(zhì)細胞來源外泌體與胰腺ai細胞共培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)裝載紫杉醇的間充質(zhì)細胞外泌體具有很強的抗中流增殖效果。Tian等為降低免疫原性與毒性,采用小鼠未成熟樹突狀細胞所產(chǎn)生外泌體作為藥物載體。同時為實現(xiàn)外泌體運輸?shù)陌邢蛐?,使細胞表達能夠識別乳腺ai細胞的外泌體膜蛋白Lamp2b(lysosomeasso[1]ciatedmembraneglycoprotein2b,溶酶體相關(guān)膜蛋白2)。并采用電穿孔的方法,在純化所得的小鼠未成熟樹突狀細胞外泌體中載入阿霉素。結(jié)果表明該外泌體能夠特異性的將阿霉素傳遞給中流組織,抑制中流生長且無明顯毒性。

外泌體作為細胞外囊泡的一個亞群, 直徑集中于30~150 nm。目前, 基于粒徑大小分離外泌體的方法有超濾法、尺寸排除色譜法、靜水過濾透析法和非對稱場流分離法等。超濾法利用不同孔徑的濾膜, 對樣品進行選擇性分離以獲得外泌體, 一般分為壓力超濾和離心超濾。其中離心超濾效果更好, 不jin能減輕力對外泌體的破壞, 而且可通過增大離心力和延長離心時間提高外泌體產(chǎn)物濃度。但離心力過大或離心時間過長均有可能導(dǎo)致超濾膜或外泌體破裂。此外, 超濾法可以和切向流過濾法、微控流法、超速離心法或凝膠過濾色譜法等方法結(jié)合進一步提高分離效率。PD-L1除表達于細胞膜外,還可以外泌體型或可溶型形式分泌到細胞外。

外泌體是由細胞細胞質(zhì)內(nèi)的晚期內(nèi)泡小體以膜融合的方式通過胞吐方式主動分泌到細胞外環(huán)境的一種直徑30-100nm的微型囊泡,其形態(tài)規(guī)則,呈圓形或橢圓形杯狀結(jié)構(gòu),不同類型細胞分泌的外泌體具有很多共性,包括膜上富含脂筏及豐富的跨膜蛋白,如四次跨膜蛋白家族成員CD63、CD81等,表面為類似于細胞膜的脂質(zhì)雙分子層,具有一定的疏水性。外泌體能夠攜帶微小RNA(microRNAs,miRNAs)、RNA、蛋白質(zhì)等生物活性分子,并在細胞外環(huán)境穩(wěn)定存在,而且通過傳遞供體細胞信息,調(diào)節(jié)靶細胞的代謝通路。外泌體可由多種類型細胞分泌,妊娠期母體血清中存在表達胎盤堿性磷酸酶(placentalalkalinephosphatase,***P)的胎盤來源外泌體,并且在妊娠中發(fā)揮重要的作用。外泌經(jīng)核內(nèi)體途徑產(chǎn)生,在一些類似核內(nèi)體的質(zhì)膜區(qū)域也可形成,但核內(nèi)體起源是定義外泌體的常用標準。江蘇植物莖組織外泌體粒徑檢測

黑色素瘤細胞來源的外泌體中miR-9促進內(nèi)皮細胞的遷移和血管生成。遼寧水果外泌體NTA

外泌體作為疾病診斷的標志物具有其獨特優(yōu)勢:(1)與正常細胞相比,病變細胞產(chǎn)生的外泌體在分泌量和內(nèi)容物方面存在明顯差異。病變的細胞和組織能夠產(chǎn)生更多外泌體。(2)由于特殊的生成方式,外泌體的組成不同于來源細胞。其內(nèi)包含的一些特異性蛋白質(zhì)能夠揭示外泌體的起源、結(jié)構(gòu)和運輸方式,有利于深入了解外泌體的產(chǎn)生機制。(3)病變細胞分泌的外泌體通過胞吐的過程進入血液、尿液等體液,囊泡狀結(jié)構(gòu)能夠保護外泌體內(nèi)部生物分子不受體液中蛋白酶、磷酸酶、核酸酶等干擾,有利于保持其結(jié)構(gòu)完整和生物活性,通過對此類體液進行分析可以實現(xiàn)疾病的無創(chuàng)或微創(chuàng)檢測。遼寧水果外泌體NTA

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