蛋白質(zhì)類藥物在疾病zhiliao中發(fā)揮越來越重要的作用,但句有分子量大、穩(wěn)定性差、不能口服等缺點(diǎn)。為克服上述缺點(diǎn),更好地發(fā)揮其zhiliao作用,各種載帶蛋白質(zhì)類藥物的載體應(yīng)運(yùn)而生,如脂質(zhì)體、聚合物囊泡、樹狀聚合物、無機(jī)納米粒等。高免疫原性、低包封率和穩(wěn)定性差等缺點(diǎn)限制這些載體的應(yīng)用。因外泌體句有良好的生物相容性、高生物滲透性和低免疫原性、低毒性等優(yōu)點(diǎn),被應(yīng)用于蛋白質(zhì)藥物靶向遞送,有望成為蛋白類藥物遞送系統(tǒng)發(fā)展過程中的一項(xiàng)重要突破。外泌體裝載PTX,磷脂雙分子層可直接靶向融合細(xì)胞,增加PTX的細(xì)胞內(nèi)化量,提高藥物zhiliao效果。內(nèi)蒙古外泌體載藥技術(shù)原理
外泌體的提取方法在外泌體載藥系統(tǒng)中應(yīng)用——尺寸排阻色譜法。尺寸排阻色譜法時(shí)外泌體提取的一種方法,利用分子篩理論,開始是根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小分離蛋白質(zhì)的色譜技術(shù)。該方法的主要優(yōu)點(diǎn)是不需要很大的離心力,從而保證了外泌體的完整性。對比超高速離心和尺寸排阻色譜法得到的外泌體蛋白,結(jié)果顯示, 尺寸排阻色譜法得到的外泌體的蛋白豐度高于超高速離心法。這些基于過濾或尺寸排阻色譜的新方法為外泌體大規(guī)模的生產(chǎn)和臨床應(yīng)用提供了可能。超濾也是根據(jù)外泌體的尺寸將其分離出來的一種方法,超濾一般被認(rèn)為是外泌體分離過程中的一個(gè)準(zhǔn)備過程,通過超濾除去大分子和小分子的蛋白質(zhì)。不過連續(xù)的超濾可以分離出外泌體,和超高速離心相比,超濾不需要特殊的設(shè)備就可以較短時(shí)間內(nèi)分離出外泌體。但是,超濾膜對外泌體的黏附作用會降低外泌體的產(chǎn)量,并且超濾過程中施加的外力可能會使外泌體變形或者破裂。內(nèi)蒙古外泌體載藥技術(shù)原理外泌體可以包載疏水性的姜黃素,提高其溶解度、穩(wěn)定性和體內(nèi)生物利用度。
傳統(tǒng)藥物往往存在水溶性差、易被人體快速qing除、生物相容性差、體內(nèi)分布不理想和向細(xì)胞滲透能力低等缺陷,這些問題在一定程度上限制了它們的臨床應(yīng)用。藥物投遞系統(tǒng)就是要解決上述一個(gè)或多個(gè)問題以達(dá)到增加藥物的安全性和效果的目的。在外泌體載藥中,外泌體作為藥物載體進(jìn)行藥物運(yùn)輸有獨(dú)特的優(yōu)勢,主要體現(xiàn)在:(1)當(dāng)使用自源外泌體時(shí),外泌體引起的有害免疫反應(yīng)極低;(2)外泌體在人血液中的穩(wěn)定性好;(3)向細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)“貨物”的效率高;(4)外泌體運(yùn)載藥物時(shí)句有一定的靶向性;(5)外泌體直徑在40~100nm之間,因此可以很好地利用增強(qiáng)滲透滯留(EPR)效應(yīng),有選擇性地滲入到中流或者炎癥組織部位。
近年來,藥物載體層出不窮,基于脂質(zhì)體的載體和基于聚合物的載體是目前廣fan研究的2類藥物載體,然而一般的納米載體在體內(nèi)循環(huán)時(shí)易被肝和脾網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)巨噬細(xì)胞吞噬,且血液中循環(huán)時(shí)間短,穩(wěn)定性差,靶向性低。然而,外泌體作為來源于細(xì)胞的納米級囊泡狀結(jié)構(gòu),句有天然的生物學(xué)起源和復(fù)雜性,在細(xì)胞間信息交流的過程中起著重要作用,并且它在人體內(nèi)分布廣fan,可穿過細(xì)胞膜,不易引起免疫反應(yīng),作為藥物載體句有獨(dú)特優(yōu)勢,為基因、抗中流等藥物的輸運(yùn)開辟了一條新的道路。MHS來源外泌體裝載連翹苷(phil)后粒徑稍微增大。
miRNA的運(yùn)載也存在著種種挑戰(zhàn):miRNA體內(nèi)穩(wěn)定性差、生物分布不理想、易被體內(nèi)酶降解以及容易引起副反應(yīng)等。越來越多的研究表明外泌體也是體內(nèi)運(yùn)載miRNA的優(yōu)良載體,并且利用外泌體運(yùn)輸miRNA的zhiliao方法已經(jīng)在許多疾病模型中得以應(yīng)用。采用轉(zhuǎn)染間充質(zhì)干細(xì)胞的方法,使外泌體載有anti-miR-9。在進(jìn)行間充質(zhì)細(xì)胞和多形性成角質(zhì)細(xì)胞瘤(GBM)細(xì)胞間anti-miR-9傳遞的實(shí)驗(yàn)時(shí),發(fā)現(xiàn)兩種細(xì)胞不jin可以通過縫隙連接介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊(GJIC)也可以通過外泌體傳遞anti-miR-9。且anti-miR-9降低兩種GBM細(xì)胞(U87和T98G)對中流藥物替莫唑胺(TMZ)的抵抗能力的功能主要由外泌體傳遞的anti-miR-9實(shí)現(xiàn),而非經(jīng)GJIC傳遞的anti-miR-9,顯示出外泌體在運(yùn)載miRNA進(jìn)行基因zhiliao時(shí)的潛力。外泌體已開發(fā)作為多種藥物的載體,主要包括抗中流藥物類、kang炎藥物類、基因類及蛋白類等其他類型藥物。遼寧動物血液樣本外泌體載藥實(shí)驗(yàn)大概費(fèi)用
口服遞送裝載紫杉醇(PAC)的外泌體作用于人肺ai荷瘤小鼠,其中流的生長明顯受到抑制。內(nèi)蒙古外泌體載藥技術(shù)原理
外泌體載帶蛋白質(zhì)藥物的方法包括直接和間接兩種載yao方式。間接載yao方式是目前實(shí)現(xiàn)外泌體載帶目標(biāo)蛋白質(zhì)的主要方法,通過基因工程使目標(biāo)蛋白質(zhì)核酸轉(zhuǎn)染供體細(xì)胞,待供體細(xì)胞表達(dá)目標(biāo)蛋白質(zhì)后,分離純化其培養(yǎng)基,得到載帶有目標(biāo)蛋白質(zhì)的外泌體遞送系統(tǒng)。主要缺點(diǎn)是載藥周期長、載藥量和載藥過程不可控,在一定程度上限制該方法在構(gòu)建外泌體遞送系統(tǒng)上的應(yīng)用;直接載yao方式是指不涉及外泌體供體細(xì)胞,直接通過某種化學(xué)或物理作用將外源性蛋白質(zhì)載入外泌體中的方法。因周期短、操作簡單、過程可控等優(yōu)點(diǎn),成為一種極句前景的研究方法。內(nèi)蒙古外泌體載藥技術(shù)原理
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