江蘇植物葉組織外泌體粒徑檢測(cè)

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-10-14

通過(guò)對(duì)28例前列腺ai癥患者和19例正常人尿液外泌體中的miRNA進(jìn)行深度測(cè)序分析,發(fā)現(xiàn)兩種miRNA(miR-196a-5p和miR-501-3p)在前列腺ai患者組明顯下調(diào),表明尿液外泌體中的特異性miRNA可能作為前列腺ai的新型生物標(biāo)志物。Khurana等[100]將研究對(duì)象由miRNAs擴(kuò)大至多種類型RNA,通過(guò)對(duì)慢性腎病患者尿液外泌體中各類RNA進(jìn)行系統(tǒng)研究,在慢性腎病患者組中識(shí)別出30種明顯差異的lncRNAs,表明尿液外泌體中的lncRNAs具有作為慢性腎病早期診斷標(biāo)志物的潛力。Skotland等的研究則表明尿液外泌體中的脂質(zhì)能夠作為前列腺ai的新型標(biāo)志物,3種脂質(zhì)標(biāo)志物結(jié)合使用能夠有效提高對(duì)前列腺ai的診斷靈敏度(93%)和特異性(100%)。中流外泌體內(nèi)的lncRNA分子在一些中流相關(guān)疾病中具有重要的診斷應(yīng)用價(jià)值。江蘇植物葉組織外泌體粒徑檢測(cè)

妊娠期間胎盤可釋放外泌體到全身循環(huán)系統(tǒng),參與妊娠期間母胎界面的免疫調(diào)節(jié)、子宮螺旋動(dòng)脈重塑和胎盤屏障的形成等重要事件調(diào)控,在正常妊娠過(guò)程維持中發(fā)揮重要作用。而很多妊娠并發(fā)癥,如子癇前期等胎盤功能紊亂相關(guān)疾病的發(fā)生,很可能與胎盤來(lái)源外泌體異常密切相關(guān)。目前外泌體分離方法主要包括:多步差速離心、蔗糖密度梯度離心、試劑盒沉淀、免疫磁珠分選、色譜法、過(guò)濾離心等方法。其中,多步差速離心是制備外泌體的經(jīng)典方法,該方法是根據(jù)外泌體的沉降系數(shù)差速離心將其分離出來(lái),然而妊娠期母血清中除含有胎盤組織釋放的外泌體,還包括許多其他種類細(xì)胞釋放的外泌體,如樹突狀細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等,且血清中可能還存在一些大小類似的物質(zhì)混雜其中,這些因素都會(huì)影響胎盤來(lái)源外泌體的分離純化。江蘇海洋生物組織外泌體Western blot檢測(cè)干細(xì)胞外泌體通過(guò)改變細(xì)胞外基質(zhì),改變受體細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)組,調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡,生長(zhǎng),增殖和分化途徑。

為獲得外泌體的大小、濃度、形態(tài)及蛋白質(zhì)組成等信息,可以通過(guò)電鏡、動(dòng)態(tài)光散射、納米顆粒跟蹤分析儀、蛋白質(zhì)免疫印跡、酶聯(lián)免疫吸附法、流式細(xì)胞儀等對(duì)外泌體進(jìn)行表征。通過(guò)電鏡可獲得外泌體的形態(tài)信息,不同類型的顯微鏡由于操作環(huán)境不同,得到的外泌體形態(tài)存在差異。例如,在掃描電鏡、透射電鏡和原子力顯微鏡中,外泌體呈現(xiàn)囊泡獨(dú)有的茶托形,可能由于樣品在固定或染色過(guò)程中極度脫水,導(dǎo)致外泌體塌陷所致。與之相反,在冷凍電鏡中外泌體呈現(xiàn)圓形,由于不會(huì)脫水變性,所得的外泌體形態(tài)可能更加接近囊泡的真實(shí)狀態(tài)。另外,由于透射電鏡和原子力顯微鏡具有較高分辨率,也能夠提供外泌體磷脂雙分子層厚度、粒徑分布等信息。

姜黃素的臨床應(yīng)用也存在著問(wèn)題,比如其水溶性差,在體內(nèi)代謝快速以及易被快速清chu。利用鼠淋巴瘤細(xì)胞系(EL-4)的外泌體作為姜黃素的載體,可以提高姜黃素的溶解性、穩(wěn)定性以及生物利用度,將姜黃素和載有姜黃素的外泌體腹膜內(nèi)注射到脂多糖(LPS)誘發(fā)的敗血性休克的小鼠模型中,結(jié)果顯示經(jīng)外泌體運(yùn)載的姜黃素可促進(jìn)小鼠肺部抑制免疫反應(yīng)的CD11b+Gr-1+細(xì)胞的凋亡而表現(xiàn)出抗yan癥的效果,而單純姜黃素的注射不能起到促進(jìn)CD11b+Gr-1+細(xì)胞的凋亡效果(與注射PBS的對(duì)照組類似)。研究者還進(jìn)行了目前常用的脂質(zhì)體負(fù)載姜黃素,與外泌體負(fù)載姜黃素對(duì)比。脂質(zhì)體和外泌體均具備作為姜黃素的載體的能力,但外泌體由于其更易被Gr-1+細(xì)胞吞噬,從而可以起到更好的zhiliao效果。天然或者工程化修飾的外泌體或可用于zhiliao難治性中流。

外泌體作為細(xì)胞外囊泡的一個(gè)亞群, 直徑集中于30~150 nm。目前, 基于粒徑大小分離外泌體的方法有超濾法、尺寸排除色譜法、靜水過(guò)濾透析法和非對(duì)稱場(chǎng)流分離法等。超濾法利用不同孔徑的濾膜, 對(duì)樣品進(jìn)行選擇性分離以獲得外泌體, 一般分為壓力超濾和離心超濾。其中離心超濾效果更好, 不jin能減輕力對(duì)外泌體的破壞, 而且可通過(guò)增大離心力和延長(zhǎng)離心時(shí)間提高外泌體產(chǎn)物濃度。但離心力過(guò)大或離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)均有可能導(dǎo)致超濾膜或外泌體破裂。此外, 超濾法可以和切向流過(guò)濾法、微控流法、超速離心法或凝膠過(guò)濾色譜法等方法結(jié)合進(jìn)一步提高分離效率。在裸鼠模型中皮下注射人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源外泌體,可增加體內(nèi)和梗死區(qū)周新生血管,保護(hù)心臟功能。水果外泌體NTA

妊娠期間,胎盤可釋放外泌體到母體循環(huán),在正常妊娠或胎盤相關(guān)妊娠并發(fā)癥中發(fā)揮重要作用。江蘇植物葉組織外泌體粒徑檢測(cè)

唾液中包含來(lái)自于唾液腺上皮體外細(xì)胞的外泌體,Michael等從唾液中提取外泌體,并對(duì)唾液外泌體中的miRNA進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)此類miRNA有望作為成為唾液腺疾病的生物標(biāo)志物。Wu等成功從汗液中提取得到外泌體,并進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)分析,在汗液外泌體中鑒定到1062種蛋白質(zhì),其中包含多種抗jun肽和免疫因子,表明汗液外泌體參與皮膚免疫。Liu等從患有阿爾茲海默癥患小鼠的腦脊髓液中提取得到外泌體,并與野生型小鼠進(jìn)行對(duì)比,發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組miR-193b明顯下調(diào)。江蘇植物葉組織外泌體粒徑檢測(cè)

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