外泌體是具有雙層脂膜的囊泡結構, 其穩(wěn)定性較好, 可保護內(nèi)部生物分子免受體液中各種酶的影響, 從而保持其完整性和生物活性。外泌體被提取后一般懸浮于磷酸鹽緩沖液。目前, 常用的儲存方法為冷凍保存, 但是冷凍保存可能會導致外泌體形狀與物理性質的改變, 也可能導致多層囊泡的形成和聚集, 反復凍融會導致外泌體表面分子的生物特性、含量和標志物組成發(fā)生變化。血清中包含外泌體在內(nèi)的細胞外囊泡DNA在不同儲存環(huán)境可保持穩(wěn)定, 血漿存放于4 °C時其RNA會明顯降解, 在–20 °C下長期保存也會導致血漿中外泌體總RNA降解, 但miRNA卻十分穩(wěn)定, 這也提示了外泌體miRNA作為生物標志物的潛力。miRNA是中流外泌體檢測中較常見的標志物。廣州血漿外泌體
基于免疫細胞來源的外泌體能夠介導和調節(jié)機體對中流的免疫反應,外泌體在中流免疫zhiliao方面的潛力受到廣fan關注。其中樹枝狀細胞產(chǎn)生的外泌體包含大量的MHC-多肽復合物和免疫刺激相關的分子,能夠激huo相關的T細胞,介導體內(nèi)抗中流應答,在多個臨床試驗中表現(xiàn)出良好的抗中流療效。Morse等考察了樹枝狀細胞外泌體對非小細胞肺ai患者的療效。結果表明,患者對樹枝狀細胞外泌體耐受性良好,1/3患者表現(xiàn)出了對樹枝狀細胞外泌體的T細胞響應,2/4患者自然殺傷細胞活性得以激huo。浙江體液外泌體western blot外泌體可幫助預防胎盤感ran。
外泌體(Exosome)是由細胞分泌而來的微小囊泡,直徑約為30-200 nm,形態(tài)也呈現(xiàn)出多樣性。長鏈非編碼RNA(long non-coding RNA)是一類轉錄本長度超過200nt、不編碼蛋白的RNA。 近年來的研究表明lncRNA能在標貫遺傳、轉錄及轉錄后水平上調控基因表達,參與了X染色體沉默、基因組印記以及染色質修飾、轉錄jihuo、轉錄干擾、核內(nèi)運輸?shù)榷喾N重要的調控過程,與人類疾病的發(fā)生、發(fā)展和防治都有著密切聯(lián)系。 lncRNA芯片對lncRNA進行功能研究也被更多的關注,通過設計不同的lncRNA探針,可以更加快速、高通量地篩選出疾病或特定生物學過程中差異表達的lncRNA和mRNA信息,找到lncRNA的靶基因位點深入分析調控機制。
微流控芯片是一種可兼容多種外泌體分離方法的新興檢測平臺, 這些方法包括免疫親和分離、膜過濾、納米線捕獲、聲納米過濾和確定性側向位移分選等。微流控裝置是由幾十到幾百微米的不同直徑微通道網(wǎng)絡組成的緊湊單元, 能夠處理皮升到微升范圍內(nèi)的黏性介質樣品; 且根據(jù)特定的功能, 微通道可以相互連接, 使用額外的特定裝置來微調流體運動。微流控技術能夠以極高的準確性和特異性在微尺度上重現(xiàn)眾多實驗室過程, 取代昂貴的設備, 基于微流控技術的電化學外泌體檢測芯片已經(jīng)受到廣fan關注。雙層囊膜結構(茶托狀)是外泌體重要標志之一,但普通光學顯微鏡難以觀察到此種亞顯微結構。
外泌體(Exosome)是由細胞分泌而來的微小囊泡,直徑約為30-200 nm,形態(tài)也呈現(xiàn)出多樣性。microRNA(miRNA)是一種大小約21—23個堿基的單鏈小分子RNA,是由具有發(fā)夾結構的約70—90個堿基大小的單鏈RNA前體經(jīng)過Dicer酶加工后生成,不同于siRNA(雙鏈)但是和siRNA密切相關。microRNA通過和靶基因mRNA堿基配對引導沉默復合體(RISC)降解mRNA或抑制mRNA的翻譯,從而在轉錄后水平調控蛋白表達。microRNA在物種進化中相當保守,在動物、植物等中發(fā)現(xiàn)的microRNA表達均有嚴格的組織特異性和時序性。microRNA在細胞生長和發(fā)育過程中起多種作用,包括調控發(fā)育、分化、凋亡和增殖等。不同肝臟疾病中,細胞分泌的外泌體所攜帶的核酸和蛋白組分之間存在差異。上海血清外泌體
外泌體被包裹在堅硬的雙層膜中,雙層膜保護外泌體的內(nèi)容物,使外泌體能夠在組織中長距離移動。廣州血漿外泌體
外泌體研究可以指導診治肝損傷、酒精或非酒精性脂肪肝等其他肝臟疾病。藥物誘導肝損傷(DILI)大鼠模型中,尿外泌體中的蛋白含量減少,包括CD26、CD81和其他潛在的標志物蛋白。而另一項研究則發(fā)現(xiàn)DILI大鼠血清中分離到的外泌體含有更高水平的蛋白,如HSP70、HSP90等。MSCs來源的外泌體可以誘導肝細胞增殖相關基因表達,減弱CCL4誘導的肝損傷。而酒精刺激會促進外泌體的分泌,miRNAs水平也會升高,并促進細胞因子的分泌,喚醒單核細胞的分化。盡管已取得上述成果,我們對外泌體的研究尚不夠深入,外泌體在肝臟生理和病理中的重要作用及其臨床應用仍有待繼續(xù)探索。廣州血漿外泌體
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