湖北植物組織外泌體蛋白標志物檢測

來源: 發(fā)布時間:2022-09-05

與正常細胞相比,中流細胞外泌體的分泌量增多,內容物也存在明顯差異。由于囊泡結構的保護,中流細胞來源的外泌體內攜帶有大量中流細胞來源的活性生物分子,其特點包括:(1)提供具有穩(wěn)定構象的蛋白質分子;(2)保持蛋白質的生物活性;(3)攜帶其中的生物分子經體液運輸至遠端qi官;(4)膜融合的作用方式使得中流細胞來源的外泌體能夠與靶細胞之間進行更有效的信息交流。外泌體介導中流轉移:體外研究和體內成像實驗表明惡性中流細胞產生的外泌體可以在全身水平上被同一中流或遠端中流中惡性程度較低的ai細胞攝入,其內所包含的與轉移相關的mRNAs進入轉移性較低的細胞后,能夠增強其轉移能力。免疫印跡法(WB)和Elisa檢測法作為被普遍應用的外泌體檢測的一般方法。湖北植物組織外泌體蛋白標志物檢測

前列腺ai患者尿液外泌體中的miR-574-3p、miR-141-5p和miR-21-5p的表達水平明顯上升,表明這些miRNAs可用于前列腺ai的早期篩查。膽管ai是惡性程度較高的消化系統(tǒng)中流,發(fā)展隱蔽且臨床癥狀及體征出現(xiàn)晚,故給早期診斷帶來困難。高通量小RNA測序篩查了來自膽管ai和膽囊ai患者外泌體中一系列差異表達的miRNA,小RNA長度在正常個體、膽管ai患者和膽囊ai患者之間的分布存在明顯差異,膽管ai患者的外泌體中miR-96-5p、miR-151a-5p、miR-191-5p、miR-4732-3p明顯升高,而膽囊ai患者的外泌體中miR-151a-5p略有升高,為膽管ai和膽囊ai提供了一套新的生物診斷標志物。湖北植物組織外泌體蛋白標志物檢測外泌體復雜的內容物被認為是疾病診斷的無創(chuàng)或微創(chuàng)生物標志物。

血清中的miR-122和miR-145非常不穩(wěn)定, 將血清在4 °C短期保存期間即發(fā)生降解, 這可能是由外泌體的異質性所導致的。–80 °C保存被公認是保存各種生物標本如尿、牛奶、血液和支氣管肺泡灌洗液適宜的保存環(huán)境, 雖然這樣保存血漿可能產生含有大量“污染物”的外泌體。4 °C保存雖然容易導致外泌體中蛋白和核酸的損失, 但卻能夠避免凍融過程造成的囊泡破壞。外泌體雖然建議保存于-80 °C環(huán)境下, 但在處理或運輸過程中有時很難維持這種低溫條件。CHAROENVIRIYAKUL等提出一種凍干法以保存外泌體, 在冷凍過程中使用海藻糖作為保護劑, 海藻糖可以提供生物保護作用, 如穩(wěn)定蛋白質、細胞膜和脂質體; 減少冷凍過程中冰的形成; 防止蛋白質以及外泌體的聚集; 減少分離和保存過程中細胞外囊泡的損失等。

外泌體(Exosome)是一種直徑為30-100nm的納米級脂質包裹體結構,內部包裹了蛋白、mRNA和microRNA等物質。外泌體由細胞分泌釋放出來,在血液等體液內傳播,較后又可被其他細胞吞噬,是細胞間通訊的重要介質。源自于間充質干細胞內分泌的外泌體,富含一百多種胞外基質蛋白,mRNA信使核糖核酸和多重生長因子。在臨床上,干細胞外泌體主要治理燒傷、燙傷、皮膚潰瘍,再生健康皮膚;在護膚方面,主要是對外傷受損、衰老中毒皮膚進行修復,比較全的調理皮膚、改善膚質,令肌膚恢復年輕、健康的狀態(tài)。蛋白質分子在外泌體信號傳遞過程中起到了非常重要的作用。

細胞分泌外泌體的過程一般分為三個階段: (1) 質膜內陷, 形成早期內吞小泡; (2) 內吞小泡向內萌發(fā)成熟, 形成多囊泡體; (3) 多囊泡體與質膜融合, 并釋放出囊泡內容物, 形成外泌體。外泌體具有獨特的理化性質, 其密度為1.13~1.19 g/mL, 由平均厚度小于5 nm的雙層脂膜所包裹, 具有典型杯狀形態(tài), 呈現(xiàn)為扁平球形。外泌體表面富含多糖鏈, 其質膜主要由溶血磷脂酸、磷脂酰絲氨酸、膽固醇、神經酰胺和鞘磷脂構成, 另有與細胞來源相關的部分特殊脂類。外泌體可攜帶蛋白質、核酸和脂質等生物活性大分子, 其中主要為蛋白質, 且大部分蛋白為所有來源外泌體所共有, 只有小部分與其來源有關, 為其分泌細胞的特有蛋白, 能夠反映分泌細胞的類型和生理病理狀態(tài)。除此之外, 外泌體可攜帶大量mRNA和miRNA等核酸, 并將其運輸到靶細胞, 發(fā)揮相應的生物學功能。類風濕關節(jié)炎患者的滑膜成纖維細胞所釋放的外泌體。浙江植物葉組織外泌體wb檢測

結果表明,PS親和法可以檢測到許多目前為止都無法檢測的外泌體蛋白質和RNA。湖北植物組織外泌體蛋白標志物檢測

外泌體(exosome)是多種活細胞經過“內吞–融合–外排”等一系列過程主動向胞外分泌的直徑為30~150 nm的雙層膜結構細胞外囊泡(extracellular vesicles, EVs), 廣fan存在于血液、尿液和唾液等生物體液中, 并通常作為細胞間胞質蛋白、核酸和脂質的轉移載體發(fā)揮運輸調控作用, 被認為是細胞間通訊的核xin部分。外泌體于1983年在HARDING等和PAN等研究羊網織紅細胞分化的過程中被發(fā)現(xiàn), 并于1996年由RAPOSO等證實能夠作為一種細胞間通訊結構在免疫系統(tǒng)中發(fā)揮作用后得到了廣fan關注。近年來, 隨著外泌體在中流、心血管和感ran性疾病等多種疾病形成中的生物學作用和功能被逐漸揭示, 尤其是2015年MELO等發(fā)現(xiàn), 外泌體Glypican-1蛋白可有效區(qū)分慢性胰腺炎與胰腺ai以來, 外泌體作為疾病診斷、預后預測標志物以及藥物靶向zhiliao載體的轉化醫(yī)學應用也得到了迅速的推進。湖北植物組織外泌體蛋白標志物檢測

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