外泌體(Exosome)是由細(xì)胞分泌而來(lái)的微小囊泡，直徑約為30-200 nm，形態(tài)也呈現(xiàn)出多樣性。microRNA(miRNA)是一種大小約21—23個(gè)堿基的單鏈小分子RNA，是由具有發(fā)夾結(jié)構(gòu)的約70—90個(gè)堿基大小的單鏈RNA前體經(jīng)過(guò)Dicer酶加工后生成，不同于siRNA（雙鏈）但是和siRNA密切相關(guān)。microRNA通過(guò)和靶基因mRNA堿基配對(duì)引導(dǎo)沉默復(fù)合體（RISC）降解mRNA或抑制mRNA的翻譯，從而在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控蛋白表達(dá)。microRNA在物種進(jìn)化中相當(dāng)保守，在動(dòng)物、植物等中發(fā)現(xiàn)的microRNA表達(dá)均有嚴(yán)格的組織特異性和時(shí)序性。microRNA在細(xì)胞生長(zhǎng)和發(fā)育過(guò)程中起多種作用，包括調(diào)控發(fā)育、分化、凋亡和增殖等。外泌體可攜帶蛋白質(zhì)、脂類、核酸（miRNAs，ncRNAs）等多種生物功能大分子。福建細(xì)胞上清外泌體WB
外泌體能攜帶多種生物活性分子循環(huán)于血液／體液中并介導(dǎo)長(zhǎng)距離的細(xì)胞間通訊，中流來(lái)源外泌體富含的蛋白質(zhì)、核苷酸、脂質(zhì)等分子能夠反映其來(lái)源細(xì)胞的生理及病理狀態(tài)，外泌體特殊的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)能保護(hù)其內(nèi)RNA等分子免于降解，因此，檢測(cè)中流外泌體成為液體活檢一個(gè)明顯優(yōu)勢(shì)。臨床試驗(yàn)研究表明，外泌體在多種疾病的早期診斷、療效和預(yù)后監(jiān)測(cè)等方面都具備較好的應(yīng)用價(jià)值，正逐漸成為臨床診療中新的、理想的生物標(biāo)志物和可能的靶向藥物載體。隨著技術(shù)的進(jìn)步，組學(xué)時(shí)代的到來(lái)，大規(guī)模蛋白質(zhì)組學(xué)已經(jīng)被聯(lián)合應(yīng)用于篩選和揭示多種ai癥細(xì)胞外囊泡的標(biāo)志物。上海細(xì)胞外泌體western blot神經(jīng)細(xì)胞來(lái)源的外泌體含有與神經(jīng)退行性疾病相關(guān)的分子。
唾液中包含來(lái)自于唾液腺上皮體外細(xì)胞的外泌體，Michael等從唾液中提取外泌體，并對(duì)唾液外泌體中的miRNA進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)此類miRNA有望作為成為唾液腺疾病的生物標(biāo)志物。Wu等成功從汗液中提取得到外泌體，并進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)分析，在汗液外泌體中鑒定到1062種蛋白質(zhì)，其中包含多種抗jun肽和免疫因子，表明汗液外泌體參與皮膚免疫。Liu等從患有阿爾茲海默癥患小鼠的腦脊髓液中提取得到外泌體，并與野生型小鼠進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組miR-193b明顯下調(diào)。
外泌體攜帶的與疾病進(jìn)展緊密關(guān)聯(lián)的分子標(biāo)志物可用于疾病進(jìn)展的監(jiān)視、檢測(cè)和診斷, 是一種潛在的非侵入性生物標(biāo)志物。由于外泌體本身可以作為抗原提呈小泡, 且有較長(zhǎng)的循環(huán)半衰期, 可用于免疫學(xué)相關(guān)研究, 同時(shí), 源自ai細(xì)胞的外泌體可以被工程化, 發(fā)揮免疫刺激作用, 可作為中流疫苗應(yīng)用于ai癥的免疫zhiliao。此外, 外泌體穩(wěn)定而廣fan地分布在qi官和組織中, 具有低免疫原性、高耐受性等特點(diǎn), 且良好的膜滲透性可使其通過(guò)血腦屏障, 因此可用作組織和qi官特異藥物輸送系統(tǒng), 兼有高輸送效率和低副作用。因此, 外泌體適合用作藥物載體遞送zhiliao劑(如阿霉素或姜黃素), zhiliao性miRNA、siRNA等核酸和蛋白質(zhì), 運(yùn)送至靶位點(diǎn)后實(shí)現(xiàn)靶向zhiliao。必須慎重分析得到的是否是外泌體。
事實(shí)上，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明：在小鼠急性心肌梗塞術(shù)后，注射來(lái)源于間充質(zhì)干細(xì)胞、心臟祖細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞或心肌源性細(xì)胞的外泌體均可改善心臟功能，減輕心臟纖維化，刺激血管生成。例如，心源性細(xì)胞外泌體能通過(guò)特異性的巨噬細(xì)胞極化為急性心肌梗死提供心臟保護(hù)作用。心臟再灌注后，CDCexo的輸注降低了大鼠和豬心肌梗死模型的梗死面積，而且CDCexo會(huì)減少梗死組織內(nèi)CD68+巨噬細(xì)胞數(shù)量，并改變巨噬細(xì)胞的極化狀態(tài)。自體CD34+干細(xì)胞的移植可以改善缺血組織再灌注后的功能，并降低嚴(yán)重肢體缺血患者的截肢率。其作用機(jī)制在于：CD34+干細(xì)胞分泌的外泌體促進(jìn)小鼠下肢缺血模型血管生成。雖然臨床前研究的證據(jù)表明干細(xì)胞釋放的外泌體可以作為心肌修復(fù)的潛在無(wú)細(xì)胞治理劑，但是，目前將外泌體完全用作心臟修復(fù)治理劑之前還是有很多重點(diǎn)問(wèn)題需要解決。miR-155可分泌至外泌體中介導(dǎo)鄰近胰腺ai細(xì)胞的吉西他濱耐藥，是潛在的胰腺ai化療療效預(yù)測(cè)因子。浙江組織外泌體染色
外泌體能負(fù)載的治理物質(zhì)包括小分子化合物、蛋白質(zhì)、寡核苷酸等，且在體液中寬泛分布且具有定向歸巢能力。福建細(xì)胞上清外泌體WB
外泌體介導(dǎo)中流耐藥性:中流細(xì)胞來(lái)源的外泌體中某些miRNAs和non-codingRNAs(lncRNA)的變化在中流化療抗藥性的發(fā)生中起重要作用。Qu等研究發(fā)現(xiàn)lncRNA可以通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合miR-34/miR-449，促進(jìn)晚期腎細(xì)胞ai細(xì)胞中的跨膜受體酪氨酸激酶anexelekto(AXL)和tyrosine[1]proteinkinaseMet(c-MET)表達(dá)，引發(fā)舒尼替尼耐藥。而外泌體能夠?qū)⑦@一lncRNA運(yùn)輸至舒尼替尼敏感的ai細(xì)胞，從而傳播舒尼替尼的抗性。外泌體中的miR21能夠抑制卵巢ai細(xì)胞凋亡，并通過(guò)結(jié)合肌動(dòng)蛋白絲相關(guān)蛋白凋亡酶激huo因子(apoptoticproteaseactivatingfactor1，APAF1)使得卵巢ai細(xì)胞產(chǎn)生對(duì)紫杉醇的抗藥性。福建細(xì)胞上清外泌體WB
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