湖南外泌體lncRNA測(cè)序

外泌體的提取方法：免疫磁珠法，這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整，特異性高、操作簡(jiǎn)單、不需要昂貴的儀器設(shè)備，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會(huì)影響外泌體生物活性，不便進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn)。PS親和法，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結(jié)合，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似，獲得的外泌體形態(tài)完整，純度較高。由于不使用變性劑，不影響外泌體的生物活性，外泌體可用于細(xì)胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射。PS法可提取相當(dāng)高純度的外泌體。色譜法，這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設(shè)備，應(yīng)用不寬泛?；顑?nèi)的外泌體動(dòng)態(tài)（哪個(gè)外泌體遷移至何處）也會(huì)成為今后需要努力研究的重要課題。湖南外泌體lncRNA測(cè)序

外泌體可以調(diào)控星狀細(xì)胞（HSC）活化，并參與HSC細(xì)胞遷移的進(jìn)程?；罨腍SC來(lái)源的外泌體中，CCN2表達(dá)升高，Twist1和miR-214表達(dá)被抑制，這些外泌體還能誘導(dǎo)靜止的HSC細(xì)胞表達(dá)CCN2。此外，Twist1可以誘導(dǎo)miR-214表達(dá)從而抑制CCN2的表達(dá)。CCL4處理的外泌體和外泌體SK1/S1P會(huì)誘導(dǎo)HSC遷移。MSC分泌的外泌體可以有效減緩肝纖維化過(guò)程，這可能成為肝纖維化治理的靶點(diǎn)。研究顯示，CP-MSC來(lái)源的外泌體miR-125b可以抑制Hedgehog信號(hào)通路的活化，抑制纖維化；而HUC-MSC分泌的外泌體可以逆轉(zhuǎn)細(xì)胞形態(tài)和TGF-β1誘導(dǎo)的EMT進(jìn)程，減弱肝纖維化。河南血漿外泌體粒徑檢測(cè)在胚胎種植方面，胚胎來(lái)源的外泌體攜帶調(diào)節(jié)子宮內(nèi)膜局部免疫系統(tǒng)的物質(zhì)，在胚胎種植中發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。

外泌體(exosomes)是一類由細(xì)胞分泌到胞外的囊泡。與其他兩種胞外囊泡(微囊泡和凋亡小體)相比，外泌體在產(chǎn)生方式、尺寸、密度和內(nèi)容物等方面存在明顯差異。不同于微囊泡“出芽”的形成方式，外泌體主要通過(guò)胞吐過(guò)程釋放至細(xì)胞外:首先細(xì)胞膜向內(nèi)凹陷形成早期核內(nèi)體(earlyendosomes)，早期核內(nèi)體進(jìn)一步內(nèi)陷形成多泡體(multivesicularbodies，MVBs)，其中一部分多泡體與溶酶體(lysosome)融合，進(jìn)而降解;另一部分與細(xì)胞膜融合，將其內(nèi)部所包含的囊泡釋放至胞外，即為外泌體。外泌體具有獨(dú)特的物理化學(xué)性質(zhì)，其直徑為30～200nm，密度為1.13～1.19g/mL，組成包括細(xì)胞來(lái)源相關(guān)的脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、RNA、DNA等物質(zhì)，在其表面連接有大量的糖鏈，如甘露糖、聚乳糖胺和α2，6-唾液酸等。

circZKSCAN1在肝ai細(xì)胞中低表達(dá)且抑制肝ai細(xì)胞的增殖，ciRS-7則被認(rèn)為是非小細(xì)胞肺ai、結(jié)腸ai和胃ai等中流的預(yù)后指標(biāo)，其高表達(dá)與較高的臨床分期和較差的總體生存期相關(guān)。目前已發(fā)現(xiàn)組織、血液和外泌體中的circRNA分子表達(dá)失調(diào)，而多種circRNA的聯(lián)合檢測(cè)會(huì)提高外泌體標(biāo)志物的敏感性和特異性，甚至可達(dá)到90％左右。外泌體可作為納米載體來(lái)介導(dǎo)細(xì)胞間的信息傳遞，發(fā)揮信息傳遞作用的方式主要有：在細(xì)胞間轉(zhuǎn)移受體，通過(guò)配體受體介導(dǎo)的方式作用于受體細(xì)胞，向受體細(xì)胞轉(zhuǎn)移功能蛋白，通過(guò)膜融合方式向受體細(xì)胞傳遞mRNA、miRNAs或轉(zhuǎn)錄因子等信息。這些方式為中流靶向zhiliao開(kāi)辟了新的途徑。目前，提取外泌體的方法主要有超速離心法、PEG沉淀法。

有研究表明外泌體通過(guò)喚醒瘤相關(guān)信號(hào)通路、誘導(dǎo)免疫耐受、重塑細(xì)胞外基質(zhì)、增強(qiáng)瘤細(xì)胞侵襲性和調(diào)控瘤微環(huán)境促進(jìn)瘤的發(fā)生和發(fā)展，外泌體在瘤的診斷上有諸多優(yōu)勢(shì)：外泌體可保護(hù)其中的核酸類物質(zhì)，防止其迅速降解；外泌體的形成與親源細(xì)胞的狀態(tài)密切相關(guān)；針對(duì)外泌體內(nèi)容物的檢測(cè)比傳統(tǒng)的瘤標(biāo)志物更具有特異性；外泌體寬泛存在于多種體液樣本中，以其為基礎(chǔ)的瘤診斷可在病情發(fā)展過(guò)程中及時(shí)監(jiān)測(cè)分子標(biāo)志物的變化，這種檢測(cè)更易監(jiān)控且樣本更易收集。從癥狀患者樹(shù)突狀細(xì)胞釋放的外泌體中，含有各種癥狀細(xì)胞來(lái)源的蛋白質(zhì)。遼寧血漿外泌體染色PKH67/PKH26

流式細(xì)胞分選法純度高，能特異性分選某種細(xì)胞來(lái)源的外泌體，不適于大體積樣本的分選。湖南外泌體lncRNA測(cè)序

外泌體的miRNA或蛋白質(zhì)等遺傳分子與肝臟病理息息相關(guān)，在肝臟疾病診斷中可作為潛在的治理靶點(diǎn)或分子標(biāo)志物。對(duì)外泌體的研究，將有利于闡述肝臟及其疾病的發(fā)生和發(fā)展機(jī)制，為尋求臨床可用的biomarkers和開(kāi)發(fā)新的治理方法提供支持。外泌體可以通過(guò)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白和miRNAs進(jìn)行細(xì)胞間交流，從而作用于周?chē)募?xì)胞并改變肝臟的微環(huán)境。細(xì)胞內(nèi)多泡體（MVBs）與細(xì)胞膜融合，釋放內(nèi)部的外泌體到細(xì)胞外，被其他細(xì)胞攝取，通過(guò)細(xì)胞膜融合或內(nèi)吞作用釋放攜帶的內(nèi)含物，在受體細(xì)胞中調(diào)控生理活動(dòng)。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間交流可以改變瘤的生長(zhǎng)、細(xì)胞遷移、抗病毒等生理過(guò)程。湖南外泌體lncRNA測(cè)序

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