中流細(xì)胞通常過表達正常細(xì)胞中不存在的表面特異性受體，這些受體可能是其外泌體靶向中流細(xì)胞的基礎(chǔ)。利用中流細(xì)胞外泌體對其表面特異性受體的識別，有望將zhiliao藥物靶向傳遞到病變細(xì)胞，與普通細(xì)胞分泌的外泌體相比，可達到更高的靶向效率。臨床上常見的肺ai病理學(xué)類型是非小細(xì)胞肺ai，其中A549細(xì)胞呈鱗狀，含有高度不飽和脂肪酸，能夠有效維持細(xì)胞膜完整性，可較好地模擬中流生長，因此被廣fan用于體外研究。以A549中流細(xì)胞外泌體為載體，采用電穿孔法包載多烯紫杉醇，構(gòu)建一種句有肺ai主動靶向性的遞藥系統(tǒng)，并采用響應(yīng)面法優(yōu)化了其載藥工藝。電穿孔是常見的外泌體載藥手段,其原理是通過瞬時電流在外泌體膜上產(chǎn)生孔洞以允許藥物滲入其中。上海動物組織樣本外泌體載藥咨詢問價
外泌體遞送系統(tǒng)的靶向給yao方式分為被動靶向和主動靶向兩種。被動靶向給藥，多采用局部給yao方式實現(xiàn)，包括局部注射、鼻腔給藥、生物材料局部植入等。主動靶向給藥的相關(guān)研究很少見。jin有YUAN等人利用血一腦屏障在病理和生理條件下的特性，實現(xiàn)載帶腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子的外泌體遞送系統(tǒng)在全身給藥條件下腦部主動靶向。因被動靶向的靶向效率明顯低于主動靶向，且臨床實際更需要的是可以實現(xiàn)精zhun靶向給藥、減少非靶組織和qi官傷害的主動靶向給藥，故載帶外源性蛋白質(zhì)外泌體主動靶向給藥將是研究的主要方向。中國香港胎牛血清外泌體載藥口服遞送裝載紫杉醇(PAC)的外泌體作用于人肺ai荷瘤小鼠,其中流的生長明顯受到抑制。
外泌體的提取方法在外泌體載藥系統(tǒng)中應(yīng)用——梯度密度離心法。外泌體的密度在1.1~1.19kg·L-1之間,因此,可以采用密度梯度離心法來分離外泌體。該方法是將超速離心結(jié)合蔗糖密度梯度或蔗糖墊結(jié)合,原理是先除去非囊泡物質(zhì),再通過梯度密度濃縮提取外泌體,該方法可以得到相對較為純凈的外泌體。傳統(tǒng)的梯度密度方法通常需要離心16h,但是2012年,研究者使用了62~90h才分離出某些確切囊泡,因此,該方法可能不足以沉淀所有的外泌體。如果離心時間不充足,污染物質(zhì)可能和外泌體保持在相同的密度層,特別是這個密度范圍又比較寬。
外泌體載藥系統(tǒng)一直是眾多研究者關(guān)注的焦點。外泌體載帶藥物常用的電穿孔方法，通過將外泌體、藥物和電穿孔緩沖液共孵育，然后在一定條件下行電脈沖處理，后用微型擠出機擠出而實現(xiàn)外泌體載藥。該方法成功將大分子卟啉裝載入乳腺ai細(xì)胞分泌的外泌體中；有研究表明外泌體成功載帶RNA藥物miR一26a可用于肝aizhiliao。該方法是否可實現(xiàn)外泌體載帶蛋白質(zhì)類藥物有待進一步研究。該方法可能存在破壞蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、影響蛋白質(zhì)的活性和蛋白質(zhì)裝載率低等缺點，從而限制其應(yīng)用。裝載了連翹酯苷A(FTA)的A549來源的外泌體可以被A549細(xì)胞攝取。
外泌體的脂質(zhì)雙分子膜可以保護其在血液循環(huán)中不被降解,但是這種膜結(jié)構(gòu)以及其內(nèi)含各種豐富的物質(zhì),使得外泌體載藥變得困難。外泌體只有保證膜結(jié)構(gòu)的完整性,才能不引起免疫反應(yīng),不被MPS吞噬。目前,將藥物載入外泌體的方法主要有兩種:(1)前轉(zhuǎn)載,在分離外泌體之前,將藥物與母代細(xì)胞共培養(yǎng)和對母代細(xì)胞進行轉(zhuǎn)染,可以讓母代細(xì)胞分泌含有藥物的外泌體; 主要是用轉(zhuǎn)染劑將“貨物”轉(zhuǎn)染進入親代細(xì)胞(或者將“貨物與親代細(xì)胞孵育”),然后收集培養(yǎng)基,獲得載有“貨物”的外泌體的過程。該方法的主要問題是合適有效的轉(zhuǎn)染試劑很少,且轉(zhuǎn)染試劑無法完全去除,導(dǎo)致轉(zhuǎn)染效率低,無法排除轉(zhuǎn)染試劑對實驗的影響。(2)后轉(zhuǎn)載,分離出外泌體之后,將藥物載入外泌體。外泌體載帶miR一26a、miR一200b等可用于抗中流、糖尿病性創(chuàng)傷、腸纖維化的zhiliao。上海動物組織樣本外泌體載藥咨詢問價
外泌體作為內(nèi)源性的天然納米材料,在藥物的遞送中有著獨特的優(yōu)勢。上海動物組織樣本外泌體載藥咨詢問價
在醫(yī)學(xué)載藥領(lǐng)域，多肽、蛋白質(zhì)、DNA等生物大分子zhiliao藥物的穩(wěn)定性差和吸收率低是普遍存在的問題，因此納米囊泡載藥體系應(yīng)運而生。目前人工合成的納米囊泡中，針對高分子聚合物囊泡與低分子脂質(zhì)體的研究很常見。然而，這些人工納米載藥體進入人體后，易引發(fā)自身免疫反應(yīng)，從而被人體免疫系統(tǒng)qing除; 同時其靶向性差，因而載藥效率不高且具有一定的毒副作用。近年來，外泌體作為天然生物囊泡的成員之一，因具有介導(dǎo)細(xì)胞間信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、 抗原呈遞和免疫應(yīng)答等功能，兼具人工合成囊泡的小粒徑、脂溶、穩(wěn)定、高滲透性和可改造性等特點，越來越多地被應(yīng)用于藥物靶向遞送，有望成為藥物遞送系統(tǒng)發(fā)展過程中的一項重要突破。上海動物組織樣本外泌體載藥咨詢問價