湖南動(dòng)物組織樣本外泌體載藥實(shí)驗(yàn)大概費(fèi)用

來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-07-22

外泌體作為一種潛在的理想型藥物遞送載體,可以利用化學(xué)和基因工程等方法對(duì)其進(jìn)行內(nèi)部及膜表面工程化改造,將化學(xué)藥物、功能短肽、小干擾RNA等多種生物活性物質(zhì)包載到外泌體中,可實(shí)現(xiàn)特定類型的細(xì)胞或組織的靶向藥物遞送。目前,常用的實(shí)現(xiàn)外泌體包載藥物方法有膜融合法、電穿孔法及基因工程法等。膜融合法-利用外泌體句有磷脂雙分子層膜結(jié)構(gòu)這一特性,可使用共孵育、聚碳酸酯膜擠壓等外源性方法使外泌體與其他類型膜結(jié)構(gòu)或藥物融合。電穿孔法-也叫電轉(zhuǎn)染,是一種新型外泌體包載核酸藥物的生物技術(shù)。基因工程法-外泌體的基因修飾是將目的基因轉(zhuǎn)入供體細(xì)胞,使外泌體膜上功能配體過表達(dá)的一種可行策略。相同劑量的PTX,PTX-M1-Exos載藥體系和游離的PTX相比,對(duì)小鼠乳腺ai4T1的抑制率更高。湖南動(dòng)物組織樣本外泌體載藥實(shí)驗(yàn)大概費(fèi)用

外泌體直接載yao方式包括皂苷處理法、孵育法、凍融循環(huán)法、超聲法和擠出法等。皂苷處理法指共培養(yǎng)外泌體、藥物和皂苷溶液,然后通過透析膜、色譜柱純化得到載藥外泌體的方法。孵育法指藥物和外泌體在適宜的條件下共培養(yǎng)。凍融循環(huán)法是經(jīng)過冷凍、融化過程使外泌體包裹藥物。超聲法利用超聲波使藥物進(jìn)入外泌體中,擠出法利用擠出機(jī)實(shí)現(xiàn)外泌體載帶藥物。其中皂苷輔助藥物裝載方法是直接載yao方式中常用的一種載yao方式。上述方法也存在一些缺點(diǎn):孵育法操作簡單,但載藥量低;凍融循環(huán)法、超聲法和擠出法對(duì)儀器的要求高,且可能會(huì)破壞外泌體的質(zhì)膜結(jié)構(gòu)造成藥物泄露,終造成載藥量不理想。福建外泌體載藥 外泌體的選擇裝載連翹苷(phil)的MHS來源外泌體對(duì)A549細(xì)胞遷移能力有較為明顯的抑制作用。

外泌體載藥系統(tǒng)的性質(zhì)評(píng)估:1對(duì)外泌體進(jìn)行一般性質(zhì)評(píng)估的方法已有多種,包括納米顆粒跟蹤分析技術(shù)(NTA)、動(dòng)態(tài)光散射(DLS)、流式細(xì)胞術(shù)、原子力顯微技術(shù)(AFM)、透射電子顯微鏡(TEM)、掃描電子顯微鏡(SEM)等。2細(xì)胞實(shí)驗(yàn):將載藥外泌體添加到相應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)基,通過培養(yǎng)觀察、檢測表達(dá)物或統(tǒng)計(jì)細(xì)胞凋亡率來驗(yàn)證載藥外泌體與靶細(xì)胞的親和力、藥理作用并分析其作用機(jī)制。3動(dòng)物實(shí)驗(yàn):不jin可驗(yàn)證載藥外泌體的體內(nèi)藥理作用,還可研究其全部或部分藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。與細(xì)胞實(shí)驗(yàn)比較,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)考慮內(nèi)環(huán)境、體溫、免疫qing除等各種因素對(duì)載藥外泌體的影響,同時(shí)還考慮個(gè)體差異的影響,從而得出更句臨床意義的結(jié)論。

外泌體遞送系統(tǒng)的靶向給yao方式分為被動(dòng)靶向和主動(dòng)靶向兩種。被動(dòng)靶向給藥,多采用局部給yao方式實(shí)現(xiàn),包括局部注射、鼻腔給藥、生物材料局部植入等。主動(dòng)靶向給藥的相關(guān)研究很少見。jin有YUAN等人利用血一腦屏障在病理和生理?xiàng)l件下的特性,實(shí)現(xiàn)載帶腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子的外泌體遞送系統(tǒng)在全身給藥條件下腦部主動(dòng)靶向。因被動(dòng)靶向的靶向效率明顯低于主動(dòng)靶向,且臨床實(shí)際更需要的是可以實(shí)現(xiàn)精zhun靶向給藥、減少非靶組織和qi官傷害的主動(dòng)靶向給藥,故載帶外源性蛋白質(zhì)外泌體主動(dòng)靶向給藥將是研究的主要方向。利用成纖維細(xì)胞樣干細(xì)胞來源的外泌體裝載靶向KRAS的siRNA,可以抑制胰腺ai的生長。

外泌體載藥系統(tǒng)一直是眾多研究者關(guān)注的焦點(diǎn)。體內(nèi)研究中, 利用鼠淋巴瘤細(xì)胞來源外泌體運(yùn)載姜黃素, 干預(yù)脂多糖 (LPS) 引起的感ran性休克小鼠模型, 結(jié)果顯示負(fù)載姜黃素的外泌體能明顯抑制小鼠肺組織中CD11b+Gr-1+ 髓樣免疫抑制細(xì)胞的募集, 表現(xiàn)出kang炎作用, 單純使用姜黃素則對(duì)CD11b+Gr-1+ 細(xì)胞無明顯效果。而對(duì)比姜黃素不同載體對(duì)LPS 誘發(fā)小鼠感ran性休克模型的zhiliao效果發(fā)現(xiàn), 外泌體作為載體較脂質(zhì)體載體zhiliao的小鼠存活率更高, 這可能與外泌體更易進(jìn)入Gr-1+ 細(xì)胞相關(guān)。裝載了iRGDTRP-PK1多肽的外泌體經(jīng)血液循環(huán)運(yùn)輸時(shí),其靶向作用能使化療藥物發(fā)揮高效抑ai作用。浙江動(dòng)物組織樣本外泌體載藥價(jià)格比較

外泌體載帶miR一26a、miR一200b等可用于抗中流、糖尿病性創(chuàng)傷、腸纖維化的zhiliao。湖南動(dòng)物組織樣本外泌體載藥實(shí)驗(yàn)大概費(fèi)用

外泌體由于在細(xì)胞通訊的過程中可以攜帶基因,引起了基因zhiliao研究者的廣fan關(guān)注。外泌體作為基因載體與傳統(tǒng)的病毒或非病毒載體相比,其優(yōu)勢(shì)在于:(1)從患者體內(nèi)獲取的外泌體,經(jīng)載入基因后,再注入患者體內(nèi)幾乎不會(huì)引起免疫反應(yīng),更加安全;(2)外泌體體積很小,可以逃過網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的捕捉,有效保護(hù)承載的基因;(3)承載基因的外泌體可以通過與目標(biāo)細(xì)胞膜融合的方式,將基因類藥物釋放到細(xì)胞質(zhì)中。而其他非病毒載體一般被受體細(xì)胞內(nèi)吞后才能將基因類藥物輸送至細(xì)胞中的內(nèi)涵體。內(nèi)涵體內(nèi)pH值約為5~7.2,易將基因類藥物酸化、破壞,并且也有部分藥物無法從內(nèi)含體中逃脫出,因而,相比之下,可以進(jìn)行膜融合的外泌體運(yùn)載的基因類藥物的轉(zhuǎn)染效率更高。湖南動(dòng)物組織樣本外泌體載藥實(shí)驗(yàn)大概費(fèi)用