外泌體載帶蛋白質(zhì)藥物的方法包括直接和間接兩種載yao方式。間接載yao方式是目前實(shí)現(xiàn)外泌體載帶目標(biāo)蛋白質(zhì)的主要方法，通過(guò)基因工程使目標(biāo)蛋白質(zhì)核酸轉(zhuǎn)染供體細(xì)胞，待供體細(xì)胞表達(dá)目標(biāo)蛋白質(zhì)后，分離純化其培養(yǎng)基，得到載帶有目標(biāo)蛋白質(zhì)的外泌體遞送系統(tǒng)。主要缺點(diǎn)是載藥周期長(zhǎng)、載藥量和載藥過(guò)程不可控，在一定程度上限制該方法在構(gòu)建外泌體遞送系統(tǒng)上的應(yīng)用；直接載yao方式是指不涉及外泌體供體細(xì)胞，直接通過(guò)某種化學(xué)或物理作用將外源性蛋白質(zhì)載入外泌體中的方法。因周期短、操作簡(jiǎn)單、過(guò)程可控等優(yōu)點(diǎn)，成為一種極句前景的研究方法。外泌體可以包載疏水性的姜黃素，提高其溶解度、穩(wěn)定性和體內(nèi)生物利用度。河北外泌體載藥實(shí)驗(yàn)價(jià)格比較
中流細(xì)胞通常過(guò)表達(dá)正常細(xì)胞中不存在的表面特異性受體，這些受體可能是其外泌體靶向中流細(xì)胞的基礎(chǔ)。利用中流細(xì)胞外泌體對(duì)其表面特異性受體的識(shí)別，有望將zhiliao藥物靶向傳遞到病變細(xì)胞，與普通細(xì)胞分泌的外泌體相比，可達(dá)到更高的靶向效率。臨床上常見(jiàn)的肺ai病理學(xué)類(lèi)型是非小細(xì)胞肺ai，其中A549細(xì)胞呈鱗狀，含有高度不飽和脂肪酸，能夠有效維持細(xì)胞膜完整性，可較好地模擬中流生長(zhǎng)，因此被廣fan用于體外研究。以A549中流細(xì)胞外泌體為載體，采用電穿孔法包載多烯紫杉醇，構(gòu)建一種句有肺ai主動(dòng)靶向性的遞藥系統(tǒng)，并采用響應(yīng)面法優(yōu)化了其載藥工藝。安徽動(dòng)物細(xì)胞樣本外泌體載藥實(shí)驗(yàn)咨詢(xún)問(wèn)價(jià)外泌體具有對(duì)自身中流的靶向能力，作為載體傳遞藥物可以增加中流部位的藥物濃度。
為考察裝載藥物的外泌體DATS-Exo在體內(nèi)抑制中流轉(zhuǎn)移的情況,將肺轉(zhuǎn)移小鼠黑色素瘤中流細(xì)胞通過(guò)尾靜脈注射入C57BL/6小鼠體內(nèi),建立實(shí)驗(yàn)性肺轉(zhuǎn)移小鼠模型并通過(guò)腹腔注射給予DATS-Exo及DATS。結(jié)果顯示,造模后,H&E染色發(fā)現(xiàn)模型組小鼠與正常組相比,肺部發(fā)生了嚴(yán)重的轉(zhuǎn)移,體現(xiàn)在模型組小鼠肺部出現(xiàn)了較多的中流結(jié)節(jié)數(shù)目和較大的中流體積。不論是DATS組還是含藥外泌體DATS-Exo組均表現(xiàn)出一定的抑制中流轉(zhuǎn)移的效果,而與DATS組相比,裝載了DATS藥物的外泌體載藥系統(tǒng)能更好地抑制中流的肺轉(zhuǎn)移,減少中流結(jié)節(jié)數(shù)目,降低異常的肺重量,具有更優(yōu)的抗中流轉(zhuǎn)移作用。
普通的外泌體在體內(nèi)易被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)快速qing除，難以保證載藥系統(tǒng)在到達(dá)靶部位發(fā)揮其作用前的完整性。已有相關(guān)研究證實(shí)，使用聚乙二醇衍生物對(duì)外泌體膜進(jìn)行修飾，可以屏蔽網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的識(shí)別和攝取，延長(zhǎng)其循環(huán)時(shí)間。Kooijmans等人將EGa1納米抗體連接到修飾聚乙二醇的膠束表面，利用合成膠束在不同溫度（4℃、40℃、80℃）下與外泌體孵育，使其插入到外泌體表面。研究結(jié)果表明，當(dāng)孵育溫度為40℃時(shí)能較好保持外泌體膜的完整性，而且對(duì)EG-FR受體過(guò)度表達(dá)的A431細(xì)胞有較高的結(jié)合率。將同時(shí)修飾EGa1抗體和聚乙二醇的外泌體靜脈注入荷瘤小鼠體內(nèi)，結(jié)果顯示，在注射60min后，血漿中仍可檢測(cè)到外泌體的存在。過(guò)氧化氫酶載入外泌體后在炎癥大腦中的生物分布情況可以利用C57BL／6雌性小鼠來(lái)研究驗(yàn)證。
外泌體由于在細(xì)胞通訊的過(guò)程中可以攜帶基因，引起了基因zhiliao研究者的廣fan關(guān)注。外泌體作為基因載體與傳統(tǒng)的病毒或非病毒載體相比，其優(yōu)勢(shì)在于:(1)從患者體內(nèi)獲取的外泌體，經(jīng)載入基因后，再注入患者體內(nèi)幾乎不會(huì)引起免疫反應(yīng)，更加安全;(2)外泌體體積很小，可以逃過(guò)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的捕捉，有效保護(hù)承載的基因;(3)承載基因的外泌體可以通過(guò)與目標(biāo)細(xì)胞膜融合的方式，將基因類(lèi)藥物釋放到細(xì)胞質(zhì)中。而其他非病毒載體一般被受體細(xì)胞內(nèi)吞后才能將基因類(lèi)藥物輸送至細(xì)胞中的內(nèi)涵體。內(nèi)涵體內(nèi)pH值約為5～7.2，易將基因類(lèi)藥物酸化、破壞，并且也有部分藥物無(wú)法從內(nèi)含體中逃脫出，因而，相比之下，可以進(jìn)行膜融合的外泌體運(yùn)載的基因類(lèi)藥物的轉(zhuǎn)染效率更高。母乳外泌體改造后的載藥體，不僅擁有外泌體本身的獨(dú)特優(yōu)點(diǎn)，還兼具改造后功能。安徽動(dòng)物細(xì)胞樣本外泌體載藥實(shí)驗(yàn)咨詢(xún)問(wèn)價(jià)
將紫杉醇載入到外泌體中可以使紫杉醇對(duì)MDCKMDR1細(xì)胞的毒性提高50倍。河北外泌體載藥實(shí)驗(yàn)價(jià)格比較
外泌體載yao方法已在多種研究中得到應(yīng)用，但各自有一定的局限性：共孵育依賴(lài)藥物跨膜運(yùn)輸而包載；超聲法和電穿孔法較為常用，但都破壞了外泌體的膜結(jié)構(gòu)而使藥物進(jìn)入外泌體，與參數(shù)有較大關(guān)系；擠壓法依賴(lài)儀器的機(jī)械力，但機(jī)械力是否對(duì)外泌體產(chǎn)生影響未知；反復(fù)凍融法載藥能力較差；對(duì)外泌體修飾可以達(dá)到提高細(xì)胞攝取或者靶向而改善藥物的療效；藥物混合物中加入皂苷會(huì)有體內(nèi)溶血的潛在風(fēng)險(xiǎn)。目前研究者應(yīng)用較多的方法是共孵育結(jié)合超聲、超聲、電穿孔、修飾外泌體。河北外泌體載藥實(shí)驗(yàn)價(jià)格比較