北京植物組織外泌體粒徑檢測(cè)

外泌體中存在著某些特定的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和多糖, 基于抗原–抗體特異性識(shí)別和結(jié)合作用原理, 可將外泌體從其他組分中分離出來(lái)。四次跨膜蛋白家族、脂膜、膜聯(lián)蛋白、上皮細(xì)胞黏附分子或肝素等都可以作為抗原, 而捕獲外泌體的抗體可以附著在平板、磁珠、二氧化硅、樹(shù)脂、膜親和過(guò)濾器、纖維素濾膜、聚酰氨基胺樹(shù)狀聚合物表面和微流控器件上。常用方法有酶聯(lián)免疫吸附法和磁珠法等。酶聯(lián)免疫吸附法使用聚苯乙烯微孔板作為抗體附著介質(zhì), 其結(jié)果用吸光度值表示, 該方法可以快速分析已知表面生物標(biāo)志物的表達(dá), 也可以瞬時(shí)讀出外泌體的產(chǎn)量和特異性。磁珠法多使用共價(jià)包覆鏈霉親和素的磁珠, 與樣品一起孵育后可通過(guò)磁泳將被結(jié)合的外泌體從樣品組分中分離出來(lái)。鑒于微米級(jí)磁珠可賦予更大的接觸面積, 該方法不jin具有高度特異性, 還具有比超速離心更高的外泌體產(chǎn)率。干細(xì)胞外泌體因在上皮組織的增殖、遷移、再生、炎癥和瘢痕控制等方面的作用。北京植物組織外泌體粒徑檢測(cè)

在Rameshwar等的研究中，采用轉(zhuǎn)染間充質(zhì)干細(xì)胞的方法，使外泌體載有anti-miR-9。在進(jìn)行間充質(zhì)細(xì)胞和多形性成角質(zhì)細(xì)胞瘤(GBM)細(xì)胞間anti-miR-9傳遞的實(shí)驗(yàn)時(shí)，發(fā)現(xiàn)兩種細(xì)胞不僅可以通過(guò)縫隙連接介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊(GJIC)也可以通過(guò)外泌體傳遞anti-miR-9。且anti-miR-9降低兩種GBM細(xì)胞(U87和T98G)對(duì)中流藥物替莫唑胺(TMZ)的抵抗能力的功能主要由外泌體傳遞的anti-miR-9實(shí)現(xiàn)，而非經(jīng)GJIC傳遞的anti-miR-9，顯示出外泌體在運(yùn)載miRNA進(jìn)行基因zhiliao時(shí)的潛力。利用外泌體進(jìn)行GBM的zhiliao不只停留在體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)上，也已經(jīng)有相關(guān)的體內(nèi)zhiliao報(bào)道。黑龍江海洋生物組織外泌體蛋白標(biāo)志物檢測(cè)黑色素瘤細(xì)胞來(lái)源的外泌體中miR-9促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和血管生成。

瘤在生長(zhǎng)過(guò)程中會(huì)不斷地將外泌體釋放到周圍環(huán)境中去，同時(shí)，外泌體能在4℃保存96h，或是在-70℃下保存更長(zhǎng)時(shí)間，可以從患者的體液中分離外泌體用于早期臨床診斷。隨著技術(shù)的進(jìn)步，已經(jīng)有生物公司嘗試涉足外泌體領(lǐng)域，外泌體中存在黑色素瘤標(biāo)志物包括MIA、S100B和酪氨酸酶相關(guān)蛋白，且黑色素瘤患者胞外體中MIA和S100B濃度顯著高于健康人群和非黑色素瘤患者，通過(guò)檢測(cè)MIA和S100B表達(dá)水平對(duì)黑色素瘤的診治具有積極地參照作用。從本質(zhì)上說(shuō)，液態(tài)活檢是分子診斷在樣本來(lái)源上的延伸，進(jìn)一步豐富了檢測(cè)手段，而隨著外泌體的不斷揭秘，相信其會(huì)在液態(tài)活檢中發(fā)揮越來(lái)越重要的作用。

外泌體的檢測(cè),在其他消化道系統(tǒng)瘤的診療中,存在著巨大的潛在價(jià)值.如:食管鱗狀細(xì)胞病的研究中發(fā)現(xiàn),miRNA-21在外泌體中的高表達(dá),表達(dá)水平可100%反應(yīng)瘤水平,外泌體miRNA-21的高表達(dá)往往預(yù)示著寬泛浸潤(rùn)與復(fù)發(fā)[36].十二指腸病的研究中,發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移性十二指腸病細(xì)胞分泌的外泌體富含PABP1蛋白,細(xì)胞不能耐受PABP在胞內(nèi)的大量囤積,通過(guò)外泌體PABP1蛋白排出胞外是轉(zhuǎn)移性十二指腸病細(xì)胞所具有的特性,外泌體PABP1是轉(zhuǎn)移性十二指腸病的分子標(biāo)志物,此發(fā)現(xiàn)不只在轉(zhuǎn)移性十二指腸病的診斷上提供了價(jià)值,也為轉(zhuǎn)移性十二指腸病的治理提供了新的思路。外泌體大小不均的原因可能是由于MVB的限制膜不均勻內(nèi)陷，導(dǎo)致流體和固體的總含量不同。

外泌體含有的信號(hào)分子能反映分泌細(xì)胞的生理狀態(tài)和功能狀態(tài),甚至還會(huì)包含細(xì)胞病態(tài)相關(guān)的分子信息,從而提供了豐富的潛在的生物標(biāo)志物分子源。瘤細(xì)胞分泌的外泌體通過(guò)對(duì)大分子物質(zhì)的轉(zhuǎn)移和傳遞調(diào)節(jié)臨近或遠(yuǎn)處瘤生長(zhǎng)的微環(huán)境,對(duì)促瘤生成及瘤增生、轉(zhuǎn)移發(fā)揮著不同的調(diào)節(jié)作用。瘤細(xì)胞分泌的外泌體還可以通過(guò)誘導(dǎo)耐藥和免疫抑制來(lái)促進(jìn)瘤的發(fā)展。外泌體能在4℃保存96h,或是在-70℃下保存更長(zhǎng)時(shí)間,這些特點(diǎn)使得外泌體可應(yīng)用于瘤的早期診斷和預(yù)后判斷。靶向瘤的外泌體的標(biāo)志物可能為瘤疾病的診斷和治理提供新的指標(biāo)和途徑,對(duì)高危人群早期診斷和早期治理以降低或減緩瘤病例的發(fā)生上發(fā)揮著重要的作用。外泌體觀察到它們可以在體內(nèi)刺激免疫應(yīng)答。北京植物根組織外泌體蛋白標(biāo)志物檢測(cè)

高濃度集聚誘導(dǎo)細(xì)胞死亡的TNF-α，可使類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎惡化。北京植物組織外泌體粒徑檢測(cè)

外泌體(exosome)是多種活細(xì)胞經(jīng)過(guò)“內(nèi)吞–融合–外排”等一系列過(guò)程主動(dòng)向胞外分泌的直徑為30~150 nm的雙層膜結(jié)構(gòu)細(xì)胞外囊泡(extracellular vesicles, EVs), 廣fan存在于血液、尿液和唾液等生物體液中, 并通常作為細(xì)胞間胞質(zhì)蛋白、核酸和脂質(zhì)的轉(zhuǎn)移載體發(fā)揮運(yùn)輸調(diào)控作用, 被認(rèn)為是細(xì)胞間通訊的核xin部分。外泌體于1983年在HARDING等和PAN等研究羊網(wǎng)織紅細(xì)胞分化的過(guò)程中被發(fā)現(xiàn), 并于1996年由RAPOSO等證實(shí)能夠作為一種細(xì)胞間通訊結(jié)構(gòu)在免疫系統(tǒng)中發(fā)揮作用后得到了廣fan關(guān)注。近年來(lái), 隨著外泌體在中流、心血管和感ran性疾病等多種疾病形成中的生物學(xué)作用和功能被逐漸揭示, 尤其是2015年MELO等發(fā)現(xiàn), 外泌體Glypican-1蛋白可有效區(qū)分慢性胰腺炎與胰腺ai以來(lái), 外泌體作為疾病診斷、預(yù)后預(yù)測(cè)標(biāo)志物以及藥物靶向zhiliao載體的轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)應(yīng)用也得到了迅速的推進(jìn)。北京植物組織外泌體粒徑檢測(cè)