天然來源的外泌體含有眾多內(nèi)源性脂質(zhì)、蛋白及核酸類物質(zhì),其自身句有一定的成藥潛力,例如間充質(zhì)干細(xì)胞來源的外泌體在組織修復(fù)領(lǐng)域獲得了巨大成功。當(dāng)外泌體用作遞送載體時,一般還需人為裝載藥物。理想的載yao方法不jin要實現(xiàn)較高的載藥效率,還應(yīng)保留外泌體和藥物的功能和完整性。目前,在不破壞外泌體膜完整性的情況下將藥物有效載入到外泌體中仍是一個巨大挑戰(zhàn)?，F(xiàn)有的載yao方法可分為分泌前載藥法和分泌后載藥法。分泌前載藥法通常將親代細(xì)胞與藥物共孵育(一般需要加轉(zhuǎn)染試劑),使藥物進(jìn)入細(xì)胞質(zhì),細(xì)胞質(zhì)中的藥物通過主動或被動的方式被分選到外泌體中,然后通過合適的提取方法即可獲得載藥的外泌體。分泌后載yao方法是目前常用的外泌體載藥策略,通常需要先分離提純外泌體,再將藥物載入其中。連翹酯苷A制備成外泌體載藥系統(tǒng)可明顯提高其體外抗中流細(xì)胞轉(zhuǎn)移的能力。浙江細(xì)胞樣本外泌體載藥實驗服務(wù)
外泌體載藥系統(tǒng)一直是眾多研究者關(guān)注的焦點。SUN等人在早期的動物實驗中對脂多糖（LPS）誘導(dǎo)的膿毒性休克小鼠模型進(jìn)行腹腔注射含姜黃素的外泌體。結(jié)果表明，外泌體可用作kang炎藥物的體內(nèi)載體。自此，揭開了外泌體介導(dǎo)藥物傳遞系統(tǒng)研究的新篇章。他們改用鼻腔內(nèi)注射，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，載有姜黃素或信號傳導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激huo因子3抑制劑的外泌體可用于zhiliaoLPS誘導(dǎo)的腦炎癥、實驗性自身免疫性腦炎和GL26腦中流模型。隨后又有研究者發(fā)現(xiàn)，向野生型小鼠靜脈注射攜帶小干擾核糖核酸序列的外泌體，能明顯抑制阿爾茨海默病zhiliao靶點β-淀粉樣前體蛋白裂解酶1的表達(dá)。福建組織樣本外泌體載藥實驗價格比較裝載了連翹酯苷A(FTA)的A549來源的外泌體可以被A549細(xì)胞攝取。
大分子蛋白類藥物可以通過以下方法進(jìn)行外泌體載藥。Haney等人采用常溫下共孵育、加入皂素后孵育、反復(fù)凍融、超聲、擠出等多種不同的方法將過氧化氫酶包載到外泌體中。結(jié)果顯示，外泌體通過超聲和擠出兩種方式句有較高的載藥量，分別為26.1％和22.2％，通過被動擴(kuò)散方式的載藥量jin為4.9％，但當(dāng)加入句有透皮促進(jìn)作用的皂素后，外泌體的載藥量會明顯提高至18.5％。值得注意的是，外泌體的載藥量不jin與載yao方式有關(guān)，也取決于藥物的性質(zhì)、外泌體脂質(zhì)的組成，而且不同的載yao方式也會影響細(xì)胞對外泌體的攝取。
在藥物遞送系統(tǒng)中，理想的載體應(yīng)該是安全、有效,并且有很好的生物利用度。同時,載體的穩(wěn)定性,低的細(xì)胞毒性和免疫原性,以及能否成功地將藥物運送到特定的組織或細(xì)胞也是至關(guān)重要的。外泌體作為藥物遞送系統(tǒng)具有一系列的優(yōu)點:(1)從患者的組織或血液收集(如骨髓、單核細(xì)胞或巨噬細(xì)胞)的外泌體,載藥后可以逃避單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)(MPS)的qing除,從而減少藥物的qing除率。(2)外泌體具有潛在的靶向性,可以增加藥物輸送到靶組織的能力[10]。(3)外泌體膜的特定脂質(zhì)體和蛋白質(zhì),使得外泌體可以直接與靶細(xì)胞膜融合,從而明顯提高藥物進(jìn)入細(xì)胞的可能性。(4)外泌體載體可以避開內(nèi)吞途徑的內(nèi)化,而且外泌體的安全性在許多臨床試驗已經(jīng)得到證實。外泌體裝載PTX，磷脂雙分子層可直接靶向融合細(xì)胞，增加PTX的細(xì)胞內(nèi)化量，提高藥物zhiliao效果。
小分子siRNA、miRNA常作為基因zhiliao的核酸藥物，但其穩(wěn)定性差，極易被體內(nèi)的酶降解，限制了它在臨床中的運用。而外泌體的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)可以保護(hù)基因類藥物，避免其降解。其次，外泌體能通過膜融合的方式直接將包載的基因類藥物釋放到受體細(xì)胞中，實現(xiàn)更高的投遞效率。許多研究證明外泌體能成功遞送小分子siRNA、miRNA。通過體外實驗證明，來源于血漿的外泌體可以有效地傳遞siRNA到單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞，使MAKP1基因沉默。利用類似的方法遞送RAD51- siRNA和RAD52－siRNA到HELA細(xì)胞和纖維素肉瘤細(xì)胞中從而誘導(dǎo)兩個基因的沉默，研究證明RAD51基因的沉默可以造成中流細(xì)胞大量的凋亡，因而通過外泌體負(fù)載siRNA用于中流疾病方面的zhiliao句有廣闊的前景。將姜黃素裝載到cRGD外泌體上，外泌體的施用對病變區(qū)域的炎癥反應(yīng)和細(xì)胞凋亡具有強(qiáng)烈的抑制作用。天津外泌體載藥參考價格
負(fù)載姜黃素的外泌體能促進(jìn)抗精神類藥物作用下的細(xì)胞膽固醇外流, 減少因藥物不良反應(yīng)造成的細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積。浙江細(xì)胞樣本外泌體載藥實驗服務(wù)
外泌體載yao方法已在多種研究中得到應(yīng)用，但各自有一定的局限性：共孵育依賴藥物跨膜運輸而包載；超聲法和電穿孔法較為常用，但都破壞了外泌體的膜結(jié)構(gòu)而使藥物進(jìn)入外泌體，與參數(shù)有較大關(guān)系；擠壓法依賴儀器的機(jī)械力，但機(jī)械力是否對外泌體產(chǎn)生影響未知；反復(fù)凍融法載藥能力較差；對外泌體修飾可以達(dá)到提高細(xì)胞攝取或者靶向而改善藥物的療效；藥物混合物中加入皂苷會有體內(nèi)溶血的潛在風(fēng)險。目前研究者應(yīng)用較多的方法是共孵育結(jié)合超聲、超聲、電穿孔、修飾外泌體。浙江細(xì)胞樣本外泌體載藥實驗服務(wù)