江蘇動物血液樣本外泌體載藥實驗大概費用

來源: 發(fā)布時間:2022-06-22

與人工合成囊泡相比,外泌體雖然具有一定的靶向性,但由于其高度的復(fù)雜性和成分的多樣性,作為載藥體的應(yīng)用仍缺乏普遍靶向性,可能產(chǎn)生脫靶效應(yīng),誘發(fā)不良反應(yīng);而且可溶性低,循環(huán)半衰期短,因此針對外泌體表面標(biāo)志物的改造以獲得靶向性一直是研究熱點;此外,也有大量研究針對內(nèi)容物進行改造,近年來主要以外源性的抗中流藥物、核酸分子、轉(zhuǎn)錄因子和酶類,內(nèi)源性母乳多糖、低聚糖、多肽等為“貨物”,將它們載入外泌體后運送到標(biāo)靶位置。對母乳外泌體進行載藥改造,既保留了外泌體本身的特性,同時充分利用了功能性內(nèi)外源物質(zhì),又可進一步優(yōu)化外泌體的靶向性與穩(wěn)定性,有望為zhiliao新生兒相關(guān)疾病提供新的思路和方法。裝載了連翹酯苷A(FTA)的A549來源的外泌體無論是4℃還是37℃在1周內(nèi)可以穩(wěn)定存在。江蘇動物血液樣本外泌體載藥實驗大概費用

PTX是一種天然的抗中流藥物, 已在臨床上廣fan應(yīng)用, 但因其句有劑量依賴性毒性、水溶性差和靜脈注射zhiliao效果較差等問題限制了PTX使用。在異種中流移植的裸小鼠肺ai模型中, 使用牛奶來源的外泌體作為PTX的藥物載體, 經(jīng)口服給藥結(jié)果顯示, 負(fù)載PTX的外泌體句有良好的耐酸性和穩(wěn)定性, 能明顯抑制中流的生長, 并且較靜脈給藥明顯降低了藥物本身毒性與免疫反應(yīng)。有實驗利用超聲引導(dǎo)巨噬細(xì)胞來源外泌體裝載PTX, 發(fā)現(xiàn)外泌體載藥組較傳統(tǒng)給yao方式對P-gp陽性耐藥細(xì)胞的細(xì)胞毒性增加了50倍以上, 對Lewis肺ai自發(fā)轉(zhuǎn)移模型句有很強的殺傷作用, 說明以外泌體為載體的PTX句有改善化療藥物耐藥性, 增強抗ai效果的潛能。江蘇動物血液樣本外泌體載藥實驗大概費用外泌體載yao方法-共孵育方法適用于親脂類藥物。

Xin等人研究了裝載miR-17-92團簇的間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體(MSC-Exo)對中風(fēng)大鼠神經(jīng)學(xué)功能的恢復(fù)作用。與脂質(zhì)體處理組相比,MSC-Exo處理組的神經(jīng)功能得到明顯改善;與MSC-Exo對照組相比,富含miR-17-92團簇的MSC-Exo處理對缺血邊界區(qū)中神經(jīng)功能的改善和少突膠質(zhì)細(xì)胞的發(fā)生,神經(jīng)元樹突可塑性的增強具有更優(yōu)的作用。研究表明,MSC-Exo本身具有改善中風(fēng)大鼠神經(jīng)損傷的作用,而包載miR-17-92團簇之后該功能得到增強。另有研究發(fā)現(xiàn),在中風(fēng)大鼠模型中,載有豐富miR-133b的MSC-Exo除具有上述作用外,還能促進星形膠質(zhì)細(xì)胞釋放外泌體。在氧和葡萄糖剝奪條件下,富含miR-133b的MSC-Exo預(yù)處理星形膠質(zhì)細(xì)胞能夠產(chǎn)生外泌體,并且該外泌體有助于腦中風(fēng)的神經(jīng)修復(fù)。

miRNA的運載也存在著種種挑戰(zhàn):miRNA體內(nèi)穩(wěn)定性差、生物分布不理想、易被體內(nèi)酶降解以及容易引起副反應(yīng)等。越來越多的研究表明外泌體也是體內(nèi)運載miRNA的優(yōu)良載體,并且利用外泌體運輸miRNA的zhiliao方法已經(jīng)在許多疾病模型中得以應(yīng)用。采用轉(zhuǎn)染間充質(zhì)干細(xì)胞的方法,使外泌體載有anti-miR-9。在進行間充質(zhì)細(xì)胞和多形性成角質(zhì)細(xì)胞瘤(GBM)細(xì)胞間anti-miR-9傳遞的實驗時,發(fā)現(xiàn)兩種細(xì)胞不jin可以通過縫隙連接介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊(GJIC)也可以通過外泌體傳遞anti-miR-9。且anti-miR-9降低兩種GBM細(xì)胞(U87和T98G)對中流藥物替莫唑胺(TMZ)的抵抗能力的功能主要由外泌體傳遞的anti-miR-9實現(xiàn),而非經(jīng)GJIC傳遞的anti-miR-9,顯示出外泌體在運載miRNA進行基因zhiliao時的潛力。外泌體具有對自身中流的靶向能力,作為載體傳遞藥物可以增加中流部位的藥物濃度。

外泌體的提取方法在外泌體載藥系統(tǒng)中應(yīng)用——超高速離心法。其中超高速離心法是常用的,該方法是被譽為分離外泌體的“金標(biāo)準(zhǔn)”。因操作簡單,不需要復(fù)雜的技術(shù)支持,并且成本相對較低而被廣fan使用。但是該方法耗時、產(chǎn)率低,得到的外泌體的數(shù)量和質(zhì)量很大程度上受轉(zhuǎn)子的類型、轉(zhuǎn)子沉降角度等因素影響,其中主要的問題就是差速離心法獲得的沉淀物是外泌體,但也會有其他的囊泡、蛋白質(zhì)或蛋白和RNA的聚集體。所以得到的外泌體的純度和產(chǎn)量都不高。將姜黃素裝載到cRGD外泌體上,外泌體的施用對病變區(qū)域的炎癥反應(yīng)和細(xì)胞凋亡具有強烈的抑制作用。山西外泌體載藥rna的綜述

HEK293FT來源外泌體與脂質(zhì)體融合為雜交外泌體,可裝載并傳遞靶向RunX2的CRISPR/Cas9系統(tǒng)至間充質(zhì)干細(xì)胞中。江蘇動物血液樣本外泌體載藥實驗大概費用

外泌體的提取方法在外泌體載藥系統(tǒng)中應(yīng)用——聚合物沉淀法。用于分離病毒和其他的生物大分子,已有50多年歷史,近幾年,將其作為一種新的方法來分離外泌體。目前,市場已經(jīng)有應(yīng)用聚乙二醇(polyeth yleneglycol,PEG)溶液提取外泌體的試劑盒,常見的是SystemBiosciences公司的ExoQuick?和ExoQuick-TC?kits,該試劑盒操作簡單不需要特殊的儀器,但是價格昂貴。提取外泌體的試劑盒主要成分是PEG8000(30%~50%),將試劑盒與體液或細(xì)胞培養(yǎng)液4℃孵育過夜,之后再低速離心。即可進行外泌體的提取,此方法實行起來較為簡單。江蘇動物血液樣本外泌體載藥實驗大概費用