浙江樣本外泌體載藥

來源: 發(fā)布時間:2022-06-21

β-欖香烯 (β-ELE) 是從莪術(shù)根莖中提取的一種新型的非細胞毒性抗中流藥物, 句有療效確切、低毒等特性, 能通過凋亡途徑抑制肝ai細胞、乳腺ai細胞等多種中流細胞的增殖與遷移, 并能逆轉(zhuǎn)中流細胞的多藥耐藥性, 增加對化療藥物的敏感性, 但其作用機制尚未完全闡明。目前研究認為第10染色體同源丟失性磷酸酶?張力蛋白基因 (PTEN) 能抑制多種ai癥的發(fā)生, 并能增加耐藥細胞對藥物的敏感性。Zhang等人研究顯示, 利用乳腺ai耐藥細胞株與負載β-ELE的外泌體 (50 μmol·L?1/L, 30 h) 共培養(yǎng), 分析發(fā)現(xiàn)負載β-ELE的外泌體上調(diào)了耐藥細胞中miR-34a及其靶基因PTEN的表達, 并下調(diào)耐藥miR-452和多藥耐藥基因蛋白P-gp的表達, 明顯逆轉(zhuǎn)了乳腺ai的耐藥性。ai細胞的外泌體優(yōu)先與其親本ai細胞融合,具有靶向母體ai癥的特點,可作為有效的載體包載藥物。浙江樣本外泌體載藥

外泌體載藥系統(tǒng)一直是眾多研究者關(guān)注的焦點。外泌體載帶藥物常用的電穿孔方法,通過將外泌體、藥物和電穿孔緩沖液共孵育,然后在一定條件下行電脈沖處理,后用微型擠出機擠出而實現(xiàn)外泌體載藥。該方法成功將大分子卟啉裝載入乳腺ai細胞分泌的外泌體中;有研究表明外泌體成功載帶RNA藥物miR一26a可用于肝aizhiliao。該方法是否可實現(xiàn)外泌體載帶蛋白質(zhì)類藥物有待進一步研究。該方法可能存在破壞蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、影響蛋白質(zhì)的活性和蛋白質(zhì)裝載率低等缺點,從而限制其應(yīng)用。天津動物血液樣本外泌體載藥參考價格外泌體載阿霉素在小鼠體內(nèi)的耐受量高于游離的阿霉素,增加了阿霉素對乳腺ai和卵巢ai的zhiliao指數(shù)。

外泌體作為一種潛在的理想型藥物遞送載體,可以利用化學(xué)和基因工程等方法對其進行內(nèi)部及膜表面工程化改造,將化學(xué)藥物、功能短肽、小干擾RNA等多種生物活性物質(zhì)包載到外泌體中,可實現(xiàn)特定類型的細胞或組織的靶向藥物遞送。目前,常用的實現(xiàn)外泌體包載藥物方法有膜融合法、電穿孔法及基因工程法等。膜融合法-利用外泌體句有磷脂雙分子層膜結(jié)構(gòu)這一特性,可使用共孵育、聚碳酸酯膜擠壓等外源性方法使外泌體與其他類型膜結(jié)構(gòu)或藥物融合。電穿孔法-也叫電轉(zhuǎn)染,是一種新型外泌體包載核酸藥物的生物技術(shù)。基因工程法-外泌體的基因修飾是將目的基因轉(zhuǎn)入供體細胞,使外泌體膜上功能配體過表達的一種可行策略。

天然來源的外泌體含有眾多內(nèi)源性脂質(zhì)、蛋白及核酸類物質(zhì),其自身具有一定的成藥潛力,例如間充質(zhì)干細胞來源的外泌體在組織修復(fù)領(lǐng)域獲得了巨大成功。當外泌體用作遞送載體時,一般還需人為裝載藥物。理想的載yao方法不僅要實現(xiàn)較高的載藥效率,還應(yīng)保留外泌體和藥物的功能和完整性。目前,在不破壞外泌體膜完整性的情況下將藥物有效載入到外泌體中仍是一個巨大挑戰(zhàn)?,F(xiàn)有的載yao方法可分為分泌前載藥法和分泌后載藥法。分泌前載藥法通常將親代細胞與藥物共孵育(一般需要加轉(zhuǎn)染試劑),使藥物進入細胞質(zhì),細胞質(zhì)中的藥物通過主動或被動的方式被分選到外泌體中,然后通過合適的提取方法即可獲得載藥的外泌體。分泌后載yao方法是目前常用的外泌體載藥策略,通常需要先分離提純外泌體,再將藥物載入其中。將藥物載入外泌體的方法主要有兩種:前轉(zhuǎn)載和后轉(zhuǎn)載。

平陽霉素對多種ai細胞有有效的抑制作用。使用乳腺ai來源的外泌體裝載平陽霉素作用于乳腺ai中流干細胞,觀察其對乳腺ai中流干細胞活力和侵襲能力的影響。結(jié)果表示,隨著平陽霉素濃度增加,細胞活力逐漸下降,并且搭載平陽霉素外泌體對細胞活力的抑制作用更佳。相比于直接用平陽霉素處理細胞,用外泌體裝載的平陽霉素對乳腺ai中流干細胞的細胞活力具有更好的抑制效果。因此,載藥外泌體具備有效降低乳腺ai中流干細胞惡性生物學(xué)行為的潛力。外泌體內(nèi)源性載yao方式即先將藥物載入供體細胞中,當藥物分選進入外泌體并釋放外泌體后分離純化而獲。廣東整體實驗外泌體載藥大概費用

可以利用小鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤模型來驗證CD—UPRT載入外泌體后在體內(nèi)的抗中流作用。浙江樣本外泌體載藥

休眠性乳腺ai細胞會促使間充質(zhì)干細胞(MSCs)釋放含有不同miRNA(如miR-222/223)的外泌體,從而促進一部分ai細胞處于靜止期,并賦予抗藥性。有研究發(fā)現(xiàn),間充質(zhì)干細胞外泌體(MSC-Exo)能夠通過遞送miRNA-142-3p抑制劑在體外和體內(nèi)降低乳腺ai的致瘤性。在體外,MSC-Exo可有效遞送miR-142-3p抑制劑,降低miR-142-3p和miR-150水平,增加調(diào)控靶基因APC和P2X7R的轉(zhuǎn)錄。在體內(nèi),MSC-Exo能夠?qū)⒁种菩怨押塑账徇f送到中流組織中以下調(diào)miR-142-3p和miR-150的表達水平。此外,MSC-Exo遞送的miR-100能夠通過調(diào)節(jié)乳腺ai細胞中mTOR/HIF-1α/VEGF信號軸,抑制體外血管生成,從而影響乳腺ai細胞的行為。浙江樣本外泌體載藥