利用外泌體進行體內(nèi)藥物遞送時必須考慮以下因素:①外泌體和細胞之間相互作用的模式是否與所遞送的zhiliao劑作用機制一致,是否會對所遞送的zhiliao劑功效有所影響;②外泌體廣fan參與了機體的生物過程,大量的外源性外泌體的存在可能會破壞內(nèi)源性外泌體介導(dǎo)的細胞間通訊;③一些尚不明了甚至未知的機制可能會導(dǎo)致不良副作用,如外泌體表面蛋白質(zhì)的脫靶信號轉(zhuǎn)導(dǎo),還有其他如ai基因和病毒miRNA,或朊病毒顆粒以及外泌體純化過程中未能去除的可溶性顆粒因子等物質(zhì)在外泌體中一起遞送,均有可能產(chǎn)生不良副作用。提示純化方案中采用嚴格的質(zhì)控與安全性分析使這些復(fù)雜的影響因素小化,對體內(nèi)和體外研究至關(guān)重要。裝載了連翹酯苷A(FTA)的A549來源的外泌體可以被A549細胞攝取。整體項目外泌體載藥
休眠性乳腺ai細胞會促使間充質(zhì)干細胞(MSCs)釋放含有不同miRNA(如miR-222/223)的外泌體,從而促進一部分ai細胞處于靜止期,并賦予抗藥性。有研究發(fā)現(xiàn),間充質(zhì)干細胞外泌體(MSC-Exo)能夠通過遞送miRNA-142-3p抑制劑在體外和體內(nèi)降低乳腺ai的致瘤性。在體外,MSC-Exo可有效遞送miR-142-3p抑制劑,降低miR-142-3p和miR-150水平,增加調(diào)控靶基因APC和P2X7R的轉(zhuǎn)錄。在體內(nèi),MSC-Exo能夠?qū)⒁种菩怨押塑账徇f送到中流組織中以下調(diào)miR-142-3p和miR-150的表達水平。此外,MSC-Exo遞送的miR-100能夠通過調(diào)節(jié)乳腺ai細胞中mTOR/HIF-1α/VEGF信號軸,抑制體外血管生成,從而影響乳腺ai細胞的行為。遼寧動物細胞樣本外泌體載藥大概費用裝載連翹苷(phil)的MHS來源外泌體對A549細胞遷移能力有較為明顯的抑制作用。
有研究發(fā)現(xiàn),在外泌體載藥系統(tǒng)中,對外泌體的產(chǎn)生環(huán)境進行干擾(如,缺氧)能夠改變外泌體的分泌組分。Zhu等人研究了缺氧處理的間充質(zhì)干細胞(MSCs)來源外泌體(ExoH)在心肌修復(fù)方面是否優(yōu)于其在常氧條件下產(chǎn)生的外泌體(ExoN)。在小鼠心肌梗死實驗中,ExoH處理的小鼠具有更高的生存率、更小的疤和更好的心臟功能恢復(fù)。進一步研究發(fā)現(xiàn),相比于ExoN,ExoH具有更高表達水平的miR-210以及對外泌體分泌至關(guān)重要的中性鞘磷脂酶2(nSMase2)的表達。類似地,Zhu等人發(fā)現(xiàn)缺氧條件下MSC-Exo遞送的miR125b-5p能夠通過改善心肌細胞凋亡來促進缺血性心臟修復(fù)。此外,他們還將ExoH與缺血心肌靶向肽綴合,構(gòu)建了一種新型的藥物遞送載體,增強了缺血性疾病的藥物遞送特異性。
mRNA也可以作為“貨物”被外泌體運輸。利用多泡體(含外泌體)負載mRNA/蛋白進行中流zhiliao的研究。研究者們利用脂質(zhì)體2000或病毒載體對HEK-293細胞進行轉(zhuǎn)染,使其分泌的多泡體含有mRNA/蛋白(CD-UPRTEGFP,其中CD:胞嘧啶脫氨酶;UPRT:尿嘧啶磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶;EGFP:增強型綠色熒光蛋白)。將此多泡體注射至小鼠的神經(jīng)鞘瘤處,并輔助注射5氟尿嘧啶(5-FC),神經(jīng)鞘瘤的增長被明顯抑制。這主要是由于CD和UPRT可以將5-FC轉(zhuǎn)化為5氟尿嘧啶脫氧核苷酸(5-FdUMP),而后者又是胸甘酸合成酶的抑制劑,可以抑制脫氧胸甘酸的合成,從而起到抑制DNA的合成以及促進中流細胞凋亡的效果。Saydam等的研究表明多泡體/外泌體不jin可以有效輸送mRNA/蛋白質(zhì),并且句有與其他抗ai藥物聯(lián)合zhiliao中流的潛力。載藥外泌體對中流細胞株的抑制作用有劑量依賴性。
雷公藤紅素 是雷公藤中含有的一種醌甲基三萜類化合物, 句有kang炎、免疫抑制和抗中流等多種作用。但其水溶性差、生物利用度低和口服易產(chǎn)生不良反應(yīng)等問題影響了臨床廣fan應(yīng)用。利用牛奶來源外泌體作為雷公藤紅素載體能有效抑制非小細胞肺ai的增殖, 并呈時間和濃度依賴性。研究發(fā)現(xiàn), 載藥外泌體抑制了中流壞死因子α所誘導(dǎo)的NF-κB的活化, 并能通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑激huo細胞凋亡, 從而抑制非小細胞肺ai的增殖與轉(zhuǎn)移。同時, 通過在體實驗顯示, 口服載有雷公藤紅素的外泌體對C57小鼠肝、腎功能沒有明顯影響。表明利用牛奶來源外泌體作為雷公藤紅素的載體, 能明顯降低藥物的不良反應(yīng), 提高藥物療效。藥物載入外泌體的方法中后轉(zhuǎn)載的方法更適用于小分子的疏水類藥物。天津外泌體載藥實驗價格比較
可以利用小鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤模型來驗證CD—UPRT載入外泌體后在體內(nèi)的抗中流作用。整體項目外泌體載藥
電穿孔法時外泌體載藥的方法的一種,因參數(shù)容易控制,多種藥物載入外泌體都可以使用該方法。Wang等人研究了胞外囊泡作為小RNA的靶向遞送系統(tǒng),利用電穿孔法將siRNA/microRNA載入核酸適配體AS1411(AS1411是一種靶向中流細胞高表達核仁素的核酸適配體)修飾的囊泡中,然后通過外泌體將siRNA/microRNA靶向遞送到乳腺ai組織。由于AS1411和核仁素的的結(jié)合達到瘤靶向(核仁素在乳腺ai細胞表面高表達),這種靶向let-7miRNA的囊泡可在體外傳遞到人乳腺aiMDA-MB-231細胞。靜脈注射載有Cy5熒光標記的miRNAlet-7的AS1411囊泡,可以選擇性靶向荷瘤小鼠中的中流部位,并抑制中流的生長,而且修飾的囊泡耐受性良好,沒有顯示明顯的非特異性副作用或免疫應(yīng)答反應(yīng)。整體項目外泌體載藥