遼寧組織外泌體WB

來源: 發(fā)布時間:2022-04-30

外泌體的提取方法:免疫磁珠法,這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整,特異性高、操作簡單、不需要昂貴的儀器設備,但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性,不便進行下一步的實驗。PS親和法,該方法將PS(磷脂酰絲氨酸)與磁珠結合,利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似,獲得的外泌體形態(tài)完整,純度較高。由于不使用變性劑,不影響外泌體的生物活性,外泌體可用于細胞共培養(yǎng)和體內注射。PS法可提取相當高純度的外泌體。色譜法,這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一,但是需要特殊的設備,應用不寬泛。干細胞外泌體可直接促進血管生成,改善大腦缺氧后的損傷。遼寧組織外泌體WB

細胞分泌外泌體的過程一般分為三個階段: (1) 質膜內陷, 形成早期內吞小泡; (2) 內吞小泡向內萌發(fā)成熟, 形成多囊泡體; (3) 多囊泡體與質膜融合, 并釋放出囊泡內容物, 形成外泌體。外泌體具有獨特的理化性質, 其密度為1.13~1.19 g/mL, 由平均厚度小于5 nm的雙層脂膜所包裹, 具有典型杯狀形態(tài), 呈現(xiàn)為扁平球形。外泌體表面富含多糖鏈, 其質膜主要由溶血磷脂酸、磷脂酰絲氨酸、膽固醇、神經酰胺和鞘磷脂構成, 另有與細胞來源相關的部分特殊脂類。外泌體可攜帶蛋白質、核酸和脂質等生物活性大分子, 其中主要為蛋白質, 且大部分蛋白為所有來源外泌體所共有, 只有小部分與其來源有關, 為其分泌細胞的特有蛋白, 能夠反映分泌細胞的類型和生理病理狀態(tài)。除此之外, 外泌體可攜帶大量mRNA和miRNA等核酸, 并將其運輸到靶細胞, 發(fā)揮相應的生物學功能。黑龍江腹水外泌體染色PKH67/PKH26多種細胞分泌外泌體,如MSCs、上皮細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞、肥大細胞、神經元細胞、中流細胞等。

干細胞外泌體可直接促進血管生成,改善大腦缺氧后的損傷。因此,干細胞外泌體可用于中風的治理,改善神經預后,增加血管與神經生成。干細胞外泌體對多種類型的免疫細胞均具有免疫調節(jié)作用,包括樹突狀細胞、T細胞、B細胞和巨噬細胞。靜脈輸注干細胞外泌體可抑制CD4+T和CD8+T細胞的活化和浸潤,從而延長GVHD小鼠模型的存活時間,并減少多個組織的病理損傷。干細胞在人類健康領域所發(fā)揮出來的潛能,令人驚嘆。而干細胞外泌體,作為干細胞與其它組織細胞相互交流信息的載體,儼然會成為生物醫(yī)學研究的新風口之一。

外泌體(Exosome),是細胞外囊泡(EV)的一種主要類型,是直徑為30至150nm的納米大小的膜結構,大多數細胞都會分泌外泌體。外泌體存在于各種生物體液中,通過其攜帶的蛋白質、核酸、脂質和代謝物等來發(fā)揮細胞間通訊功能,參與免疫應答、代謝和心血管疾病、神經退行性疾病以及病癥進展等多種生理和病理過程。在內體轉變?yōu)槌墒於嗄遗輧润w(MVE)的過程中,內體膜向腔內出芽形成腔內囊泡(ILV),MVE與細胞膜融合釋放ILV到細胞外,即形成外泌體。神經細胞來源的外泌體含有與神經退行性疾病相關的分子。

胃病作為一種常見的惡性瘤,在亞洲具有較高的發(fā)病率.胃病的臨床診斷方法與結腸病相同,主要依靠內窺鏡,早期胃病的癥狀并不明顯,且臨床常用的瘤標志物對胃病患者特異性與敏感性均較差,因此,胃病往往發(fā)現(xiàn)于晚期,并伴有不同程度的轉移。研究者發(fā)現(xiàn)胃病細胞高表達CD97并可經外泌體分泌的方式調節(jié)瘤細胞的MAPK信號通路,促進瘤細胞的增殖與侵襲。外泌體中CD97的檢測成或許能成為一種有潛在價值的胃病診療工具。胃病細胞能選擇性地將let-7包裝到外泌體中,并釋放至周圍環(huán)境中,促進胃病的惡性進展。胃病細胞外泌體可作用于抗瘤的T細胞,抑制AKT的活性。外泌體與免疫細胞之間的相互作用揭示了瘤抑制免疫功能的潛在機制。在另一項被認為有潛在胃病診斷價值的lnRNA的研究中,通過對胃病患者、胃上皮異型增生與健康人的比較發(fā)現(xiàn),LINC00152在胃病患者的血液中可被檢測到高表達,且手術前后有明顯變化。血清LINC00152主要存在于外泌體中,在外泌體的保護下,可以穩(wěn)定保存,血清外泌體LINC00152具有胃病標志物的潛能。外泌體無法分析外泌體具有的生理功能,也是兩種提取方法的問題所在。浙江CD63外泌體慢病毒

所有真核細胞類型包括造血細胞、上皮細胞、干細胞、脂肪細胞均可在培養(yǎng)條件下分泌外泌體。遼寧組織外泌體WB

幾乎所有的細胞都可以在自發(fā)或在一定刺激條件下產生外泌體,不同的細胞產生的外泌體具有不同的功能,這些外泌體參與了一系列生理和病理過程,如ai癥發(fā)生與發(fā)展、抗原呈遞、免疫調節(jié)、組織愈合等。來自血細胞(包括血小板、白細胞和紅細胞)的外泌體具有參與凝血、提供促血管生成因子、誘導血管生成等生理功能;妊娠期外泌體能夠影響局部血管生成、調節(jié)分化、激huo免疫、促進胚胎發(fā)育;肝臟細胞產生的外泌體有利于維護肝臟內穩(wěn)態(tài)。由此可見,正常細胞產生的外泌體對維持機體的正常生命活動起重要作用。遼寧組織外泌體WB