外泌體載帶蛋白質(zhì)藥物的方法包括直接和間接兩種載yao方式。間接載yao方式是目前實(shí)現(xiàn)外泌體載帶目標(biāo)蛋白質(zhì)的主要方法，通過(guò)基因工程使目標(biāo)蛋白質(zhì)核酸轉(zhuǎn)染供體細(xì)胞，待供體細(xì)胞表達(dá)目標(biāo)蛋白質(zhì)后，分離純化其培養(yǎng)基，得到載帶有目標(biāo)蛋白質(zhì)的外泌體遞送系統(tǒng)。主要缺點(diǎn)是載藥周期長(zhǎng)、載藥量和載藥過(guò)程不可控，在一定程度上限制該方法在構(gòu)建外泌體遞送系統(tǒng)上的應(yīng)用；直接載yao方式是指不涉及外泌體供體細(xì)胞，直接通過(guò)某種化學(xué)或物理作用將外源性蛋白質(zhì)載入外泌體中的方法。因周期短、操作簡(jiǎn)單、過(guò)程可控等優(yōu)點(diǎn)，成為一種極句前景的研究方法。母乳外泌體改造后的載藥體，不僅擁有外泌體本身的獨(dú)特優(yōu)點(diǎn)，還兼具改造后功能。山西外泌體載藥 外泌體的選擇
采用外泌體可以有效地包載藥物，提高藥物的生物利用度。而且對(duì)外泌體進(jìn)行必要的修飾，可以使藥物準(zhǔn)確靶向到中流部位，從而降低藥物的毒副作用。目前多種不同形式的外泌體已經(jīng)被研究開發(fā)裝載小分子藥物用于中流疾病的zhiliao。Tian等利用未成熟樹突狀細(xì)胞衍生的外泌體負(fù)載DOX并靶向遞送藥物到中流組織中。體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)表明，負(fù)載DOX的iRGD靶向肽外泌體（iRGD－EXOs－DOX）殺死了多達(dá)80％的乳腺ai細(xì)胞，幾乎與游離DOX對(duì)照組相當(dāng)。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證明，iRGD－EXOs－DOX在荷瘤小鼠體內(nèi)句有良好的靶向性，能準(zhǔn)確定位到中流組織，明顯抑制中流的生長(zhǎng)，同時(shí)極大地降低了DOX對(duì)心臟的毒性。山西外泌體載藥 外泌體的選擇間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體既有作為載藥載體的特性，還有MSC的多種生物學(xué)功能，本身也可以作為“藥物”使用。
1. 外泌體作為粒徑納米級(jí)的天然囊泡具有介導(dǎo)細(xì)胞間信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、抗原呈遞和免疫應(yīng)答等功能。此外，外泌體還兼具人工合成囊泡的小粒徑、脂溶、穩(wěn)定、高滲透性和可改造性等特點(diǎn)，通過(guò)共孵育等主動(dòng)載yao方式和超聲法等被動(dòng)載yao方式可實(shí)現(xiàn)外泌體載藥。母乳中富含外泌體，可促進(jìn)細(xì)胞增殖和遷移，減輕炎癥，對(duì)新生兒相關(guān)疾病 ( 腸炎、過(guò)敏、感ran等) 具有保護(hù)潛能。通過(guò)對(duì)母乳外泌體進(jìn)行表面分子修飾和內(nèi)容物深度改造后，有望為新生兒疾病提供更加高效、穩(wěn)定的zhiliao手段。
傳統(tǒng)的藥物遞送系統(tǒng)（如脂質(zhì)體、合成納米粒）jin能起到簡(jiǎn)單的藥物遞送作用，而外泌體不jin可以傳遞藥物到受體細(xì)胞，并且它自身攜帶的mRNA、蛋白類等物質(zhì)具有生理活性，因此在未來(lái)的研究中可以選擇不同細(xì)胞來(lái)源的外泌體作為藥物載體，對(duì)疾病進(jìn)行更有效的zhiliao。除了通過(guò)細(xì)胞產(chǎn)生需要的不同類型外泌體，近年來(lái)對(duì)于仿生外泌體的研究也引起了人們廣fan的興趣。設(shè)計(jì)了一種通過(guò)離心懸浮細(xì)胞制備類似外泌體納米囊泡的裝置，這種裝置制備的納米囊泡產(chǎn)量比外泌體高250倍。因此，依靠仿生外泌體代替外泌體可以有效地解決外泌體載藥量低、分離純化耗時(shí)耗力、產(chǎn)量不足等問(wèn)題，但它仍處于初步研究階段。外泌體載藥后可以繞開Ｐ－糖蛋白，明顯降低藥物進(jìn)入細(xì)胞后的外排作用。
phil作為連翹的主要藥效成分之一，具有廣fan藥理作用，但極性較小、滲透性差、體內(nèi)吸收較差、代謝較快，phil可促進(jìn)肺中流組織中endostatin的表達(dá)，下調(diào)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）表達(dá)，共同抑制中流xue管的生成。以磷脂和膽固醇為載體將phil制備成脂質(zhì)體納米粒，增強(qiáng)了phil的抗氧化活性，緩釋性增強(qiáng)；采用聚山梨酯-80將揮發(fā)油和phil制成納米膠束，提高了phil的溶解度，增強(qiáng)了phil的透皮吸收。用外泌體作為藥物載體，制備一種負(fù)載連翹苷的外泌體遞藥系統(tǒng)（phil-exo）。制備的phil-exo被A549細(xì)胞攝取良好，對(duì)A549細(xì)胞遷移具有較高抑制作用，明顯提高phil的抗中流細(xì)胞遷移能力，這可能是由于細(xì)胞分泌所得外泌體粒徑極小易于透過(guò)細(xì)胞，有助于改善phil的難以滲透細(xì)胞膜和不穩(wěn)定性。藥物載入外泌體的方法中后轉(zhuǎn)載的方法更適用于小分子的疏水類藥物。山西外泌體載藥 外泌體的選擇
使用ADSC外泌體裝載姜黃素可增強(qiáng)抗肝ai的效應(yīng)。山西外泌體載藥 外泌體的選擇
外泌體攜帶的特殊miRNA可參與神經(jīng)的保護(hù)與形成。XIN發(fā)現(xiàn)，間充質(zhì)干細(xì)胞源性的外泌體通過(guò)靜脈注射注入中風(fēng)模型鼠中，可以促進(jìn)腦部缺血區(qū)域血管和神經(jīng)的再生。外泌體攜帶的miRNA除用于腦中風(fēng)疾病的zhiliao外，還可用于腦部其他神經(jīng)疾病的zhiliao。肌萎縮性側(cè)索硬化癥是一種進(jìn)行性、致死性的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元疾病，氧化損傷是肌萎縮性側(cè)索硬化癥（ALS）的主要損傷機(jī)制之一。Bonafede等人發(fā)現(xiàn)，脂肪源性基質(zhì)細(xì)胞分泌的外泌體能有效地減少ALS體外模型細(xì)胞的氧化損傷，明顯提高細(xì)胞的存活率。但這種保護(hù)效果并不是呈劑量依賴性的關(guān)系，當(dāng)外泌體的濃度為0.2 ug/ml時(shí)句有jia的保護(hù)效果，然而當(dāng)外泌體的濃度提高到0.4 ug/ml時(shí)，這種保護(hù)效果卻降低了，這可能與外泌體中復(fù)雜的成分相關(guān)。Pusic等人用低水平的IFNy（γ干擾素）刺激DC細(xì)胞，將其產(chǎn)生的外泌體（IFNy-DC-EXOs）通過(guò)鼻腔給藥到大鼠體內(nèi)，研究結(jié)果顯示給予IFNy-DC-EXOs的大鼠組其大腦皮質(zhì)區(qū)域鞘磷脂水平是PBS對(duì)照組的1.5倍。這類研究顯示出外泌體在多發(fā)性硬化癥和脫髓鞘病中的zhiliao潛力。山西外泌體載藥 外泌體的選擇