外泌體的提取方法在外泌體載藥系統(tǒng)中應(yīng)用——聚合物沉淀法。用于分離病毒和其他的生物大分子，已有50多年歷史,近幾年,將其作為一種新的方法來(lái)分離外泌體。目前,市場(chǎng)已經(jīng)有應(yīng)用聚乙二醇(polyeth yleneglycol,PEG)溶液提取外泌體的試劑盒,常見(jiàn)的是SystemBiosciences公司的ExoQuick?和ExoQuick-TC?kits,該試劑盒操作簡(jiǎn)單不需要特殊的儀器,但是價(jià)格昂貴。提取外泌體的試劑盒主要成分是PEG8000(30%~50%),將試劑盒與體液或細(xì)胞培養(yǎng)液4℃孵育過(guò)夜,之后再低速離心。即可進(jìn)行外泌體的提取，此方法實(shí)行起來(lái)較為簡(jiǎn)單。外泌體具有對(duì)自身中流的靶向能力，作為載體傳遞藥物可以增加中流部位的藥物濃度。吉林動(dòng)物細(xì)胞樣本外泌體載藥實(shí)驗(yàn)服務(wù)
外泌體攜帶的特殊miRNA可參與神經(jīng)的保護(hù)與形成。XIN發(fā)現(xiàn)，間充質(zhì)干細(xì)胞源性的外泌體通過(guò)靜脈注射注入中風(fēng)模型鼠中，可以促進(jìn)腦部缺血區(qū)域血管和神經(jīng)的再生。外泌體攜帶的miRNA除用于腦中風(fēng)疾病的zhiliao外，還可用于腦部其他神經(jīng)疾病的zhiliao。肌萎縮性側(cè)索硬化癥是一種進(jìn)行性、致死性的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元疾病，氧化損傷是肌萎縮性側(cè)索硬化癥（ALS）的主要損傷機(jī)制之一。Bonafede等人發(fā)現(xiàn)，脂肪源性基質(zhì)細(xì)胞分泌的外泌體能有效地減少ALS體外模型細(xì)胞的氧化損傷，明顯提高細(xì)胞的存活率。但這種保護(hù)效果并不是呈劑量依賴性的關(guān)系，當(dāng)外泌體的濃度為0.2 ug/ml時(shí)句有jia的保護(hù)效果，然而當(dāng)外泌體的濃度提高到0.4 ug/ml時(shí)，這種保護(hù)效果卻降低了，這可能與外泌體中復(fù)雜的成分相關(guān)。Pusic等人用低水平的IFNy（γ干擾素）刺激DC細(xì)胞，將其產(chǎn)生的外泌體（IFNy-DC-EXOs）通過(guò)鼻腔給藥到大鼠體內(nèi)，研究結(jié)果顯示給予IFNy-DC-EXOs的大鼠組其大腦皮質(zhì)區(qū)域鞘磷脂水平是PBS對(duì)照組的1.5倍。這類研究顯示出外泌體在多發(fā)性硬化癥和脫髓鞘病中的zhiliao潛力。湖南動(dòng)物細(xì)胞樣本外泌體載藥實(shí)驗(yàn)價(jià)格比較利用成纖維細(xì)胞樣干細(xì)胞來(lái)源的外泌體裝載靶向KRAS的siRNA，可以抑制胰腺ai的生長(zhǎng)。
有實(shí)驗(yàn)將an-timiR-9載入到間充質(zhì)干細(xì)胞中，使其分泌的外泌體包載有an-timiR-9。通過(guò)體外細(xì)胞傳遞實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，間充質(zhì)干細(xì)胞可以通過(guò)外泌體遞送an-timiR-9到耐藥性多形性膠質(zhì)細(xì)胞瘤（GBM）中，致使耐藥性細(xì)胞株中的MDRI基因下調(diào)，P－糖蛋白表達(dá)量減少，從而增加耐藥性細(xì)胞株對(duì)替莫唑胺的化學(xué)敏感性，有效地抑制耐藥性多形性膠質(zhì)細(xì)胞瘤的增殖。研究人員采用外泌體對(duì)GBM進(jìn)行zhiliao不只停留在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)上，相關(guān)的體內(nèi)研究也已有報(bào)道。研究者將高表達(dá)miR-146b間充質(zhì)干細(xì)胞源性的外泌體用于zhiliaoGBM的移植瘤模型中，結(jié)果表明載有miR-146b的外泌體能有效地抑制中流的生長(zhǎng)。
在醫(yī)學(xué)載藥領(lǐng)域，多肽、蛋白質(zhì)、DNA等生物大分子zhiliao藥物的穩(wěn)定性差和吸收率低是普遍存在的問(wèn)題，因此納米囊泡載藥體系應(yīng)運(yùn)而生。目前人工合成的納米囊泡中，針對(duì)高分子聚合物囊泡與低分子脂質(zhì)體的研究很常見(jiàn)。然而，這些人工納米載藥體進(jìn)入人體后，易引發(fā)自身免疫反應(yīng)，從而被人體免疫系統(tǒng)qing除; 同時(shí)其靶向性差，因而載藥效率不高且具有一定的毒副作用。近年來(lái)，外泌體作為天然生物囊泡的成員之一，因具有介導(dǎo)細(xì)胞間信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、 抗原呈遞和免疫應(yīng)答等功能，兼具人工合成囊泡的小粒徑、脂溶、穩(wěn)定、高滲透性和可改造性等特點(diǎn)，越來(lái)越多地被應(yīng)用于藥物靶向遞送，有望成為藥物遞送系統(tǒng)發(fā)展過(guò)程中的一項(xiàng)重要突破。電穿孔是常見(jiàn)的外泌體載藥手段,其原理是通過(guò)瞬時(shí)電流在外泌體膜上產(chǎn)生孔洞以允許藥物滲入其中。
去甲斑蝥素（NTCD）是中藥斑蝥所含活性成分斑蝥素的小分子去甲基化衍生物。研究表明，NTCD能在一定程度上提高ai細(xì)胞線粒體的呼吸控制率（PCR）及溶酶體酶的活性，干擾ai細(xì)胞分裂，抑制其ＤＮＡ合成，對(duì)原發(fā)性肝ai、胃ai、食管ai、白血病、結(jié)腸ai及乳腺ai等有明顯的zhiliao作用。目前NTCD在臨床上主要有口服和靜脈滴注２種給藥途徑，但由于NTCD被機(jī)體吸收后廣fan分布于各組織qi官，不jin對(duì)泌尿qi官有較強(qiáng)的毒性，而且對(duì)胃、腸道也會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的不良反應(yīng)。外泌體是由細(xì)胞活化或受到一定刺激時(shí)分泌到細(xì)胞外的粒徑為40-100nm的囊泡。利用外泌體包載NTCD，能使NTCD即使處在惡劣的胞外環(huán)境中，也能受到保護(hù)而不被稀釋和降解，進(jìn)一步延長(zhǎng)其在生物體內(nèi)的留存時(shí)長(zhǎng)，并能逃過(guò)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的捕獲和qing除，使中流細(xì)胞內(nèi)的藥物濃度增加，提高生物利用度。外泌體可以通過(guò)細(xì)胞內(nèi)吞的方式將紫杉醇釋放到受體細(xì)胞中，提高藥物對(duì)供體中流細(xì)胞的毒性。動(dòng)物血液樣本外泌體載藥參考價(jià)格
外泌體有良好的生物相容性、高生物滲透性、低免疫原性、低毒性，可作為藥物載體。吉林動(dòng)物細(xì)胞樣本外泌體載藥實(shí)驗(yàn)服務(wù)
采用外泌體作為藥物載體，制備一種裝載連翹酯苷A(FTA)的外泌體遞藥系統(tǒng)。細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明，A549細(xì)胞可以攝取FTA-Exos，并且能維持長(zhǎng)時(shí)間的穩(wěn)定，延長(zhǎng)了半衰期，明顯的提高了連翹酯苷A的生物利用度，為研究連翹酯苷A體外抗中流轉(zhuǎn)移作用打下基礎(chǔ)。經(jīng)典劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，F(xiàn)TA-Exos組對(duì)于A549細(xì)胞的遷移抑制率高達(dá)90%以上，明顯高于連翹酯苷A組遷移抑制率，證實(shí)含藥外泌體具有更好的體外抑制A549細(xì)胞遷移效果。成功建立了FTA-Exos藥物遞送系統(tǒng)，制備的FTA-Exos性質(zhì)穩(wěn)定優(yōu)越，明顯提高連翹酯苷A的生物利用度，并具有更好的抑制A549細(xì)胞遷移作用。吉林動(dòng)物細(xì)胞樣本外泌體載藥實(shí)驗(yàn)服務(wù)