外泌體載藥系統(tǒng)的性質(zhì)評估：1對外泌體進行一般性質(zhì)評估的方法已有多種，包括納米顆粒跟蹤分析技術(shù)(NTA)、動態(tài)光散射(DLS)、流式細胞術(shù)、原子力顯微技術(shù)(AFM)、透射電子顯微鏡(TEM)、掃描電子顯微鏡(SEM)等。2細胞實驗：將載藥外泌體添加到相應(yīng)的細胞培養(yǎng)基，通過培養(yǎng)觀察、檢測表達物或統(tǒng)計細胞凋亡率來驗證載藥外泌體與靶細胞的親和力、藥理作用并分析其作用機制。3動物實驗：不jin可驗證載藥外泌體的體內(nèi)藥理作用，還可研究其全部或部分藥動學(xué)參數(shù)。與細胞實驗比較，動物實驗考慮內(nèi)環(huán)境、體溫、免疫qing除等各種因素對載藥外泌體的影響，同時還考慮個體差異的影響，從而得出更句臨床意義的結(jié)論。MHS來源外泌體裝載連翹苷（phil）后粒徑稍微增大。上海外泌體載藥 外泌體的選擇
外泌體作為細胞-細胞間交流的“運載工句”，外泌體在正常及疾病下都發(fā)揮著不可忽視的功能。外泌體攜帶的mRNA可在靶細胞中翻譯；攜帶的miRNA對靶細胞內(nèi)基因進行轉(zhuǎn)錄后調(diào)控；攜帶的蛋白成份則可在效應(yīng)細胞中直接發(fā)揮作用，從而實現(xiàn)細胞-細胞間的遠距離“通訊”。外泌體的發(fā)現(xiàn)，為闡明中流惡性進展機制提供了新的思路；為中流標記物，尤其是液體活檢提供了新的方向；同時，作為納米級“運載工句”，近年來其在抗中流藥物載體方面的潛在應(yīng)用價值也獲得了越來越多的關(guān)注。細胞外泌體載藥咨詢問價負載姜黃素的外泌體可經(jīng)外泌體轉(zhuǎn)運通過血腦屏障, 運送到腦組織中, 減輕氧化應(yīng)激，維持腦血管屏障功能。
miＲNA的運載也存在著種種挑戰(zhàn):miＲNA體內(nèi)穩(wěn)定性差、生物分布不理想、易被體內(nèi)酶降解以及容易引起副反應(yīng)等。越來越多的研究表明外泌體也是體內(nèi)運載miＲNA的優(yōu)良載體，并且利用外泌體運輸miＲNA的zhiliao方法已經(jīng)在許多疾病模型中得以應(yīng)用。采用轉(zhuǎn)染間充質(zhì)干細胞的方法，使外泌體載有anti-miＲ-9。在進行間充質(zhì)細胞和多形性成角質(zhì)細胞瘤(GBM)細胞間anti-miＲ-9傳遞的實驗時，發(fā)現(xiàn)兩種細胞不jin可以通過縫隙連接介導(dǎo)的細胞間通訊(GJIC)也可以通過外泌體傳遞anti-miＲ-9。且anti-miＲ-9降低兩種GBM細胞(U87和T98G)對中流藥物替莫唑胺(TMZ)的抵抗能力的功能主要由外泌體傳遞的anti-miＲ-9實現(xiàn)，而非經(jīng)GJIC傳遞的anti-miＲ-9，顯示出外泌體在運載miＲNA進行基因zhiliao時的潛力。
利用外泌體進行體內(nèi)藥物遞送時必須考慮以下因素：①外泌體和細胞之間相互作用的模式是否與所遞送的zhiliao劑作用機制一致，是否會對所遞送的zhiliao劑功效有所影響；②外泌體廣fan參與了機體的生物過程，大量的外源性外泌體的存在可能會破壞內(nèi)源性外泌體介導(dǎo)的細胞間通訊；③一些尚不明了甚至未知的機制可能會導(dǎo)致不良副作用，如外泌體表面蛋白質(zhì)的脫靶信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，還有其他如ai基因和病毒miRNA，或朊病毒顆粒以及外泌體純化過程中未能去除的可溶性顆粒因子等物質(zhì)在外泌體中一起遞送，均有可能產(chǎn)生不良副作用。提示純化方案中采用嚴格的質(zhì)控與安全性分析使這些復(fù)雜的影響因素小化，對體內(nèi)和體外研究至關(guān)重要。外泌體載藥中外泌體提取的方法可聯(lián)合使用各種方法,從而得到高純度和高產(chǎn)量的外泌體。
外泌體的提取方法在外泌體載藥系統(tǒng)中應(yīng)用——超高速離心法。其中超高速離心法是常用的,該方法是被譽為分離外泌體的“金標準”。因操作簡單,不需要復(fù)雜的技術(shù)支持,并且成本相對較低而被廣fan使用。但是該方法耗時、產(chǎn)率低,得到的外泌體的數(shù)量和質(zhì)量很大程度上受轉(zhuǎn)子的類型、轉(zhuǎn)子沉降角度等因素影響,其中主要的問題就是差速離心法獲得的沉淀物是外泌體,但也會有其他的囊泡、蛋白質(zhì)或蛋白和RNA的聚集體。所以得到的外泌體的純度和產(chǎn)量都不高。裝載紫杉醇的外泌體靶向給藥系統(tǒng)通過微流控技術(shù)純化后可用于抗中流zhiliao。江西重點項目指南 外泌體載藥
載藥的外泌體提純以后一般會通過靜脈注射、皮下注射、腹膜內(nèi)注射或者中流處注射等方式進行疾病zhiliao。上海外泌體載藥 外泌體的選擇
外泌體遞送系統(tǒng)的靶向給yao方式分為被動靶向和主動靶向兩種。被動靶向給藥，多采用局部給yao方式實現(xiàn)，包括局部注射、鼻腔給藥、生物材料局部植入等。主動靶向給藥的相關(guān)研究很少見。jin有YUAN等人利用血一腦屏障在病理和生理條件下的特性，實現(xiàn)載帶腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子的外泌體遞送系統(tǒng)在全身給藥條件下腦部主動靶向。因被動靶向的靶向效率明顯低于主動靶向，且臨床實際更需要的是可以實現(xiàn)精zhun靶向給藥、減少非靶組織和qi官傷害的主動靶向給藥，故載帶外源性蛋白質(zhì)外泌體主動靶向給藥將是研究的主要方向。上海外泌體載藥 外泌體的選擇