北京海洋生物組織外泌體分離

來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-03-20

外泌體(Exosome)介導(dǎo)瘤細(xì)胞的增殖過程。瘤細(xì)胞通過與自身微環(huán)境的信息交流促進(jìn)瘤細(xì)胞的增殖,而外泌體(Exosome)可以充當(dāng)這種信息載體。當(dāng)細(xì)胞中出現(xiàn)基因突變時(shí),外泌體(Exosome)會(huì)通過膜融合把這種突變信息傳遞至其他的正常細(xì)胞,從而導(dǎo)致原病基因的喚醒、抗凋亡基因的表達(dá),使瘤細(xì)胞獲得增殖特性。瘤細(xì)胞來源的外泌體(Exosome)還可以通過直接抑制免疫細(xì)胞,促進(jìn)瘤細(xì)胞逃避免疫監(jiān)視,為瘤細(xì)胞在體內(nèi)生長創(chuàng)造條件。然而,雖然當(dāng)前外泌體生物學(xué)仍然不成熟,但越來越多的興趣和資金投入必將加速外泌體基礎(chǔ)研究進(jìn)展和臨床轉(zhuǎn)化。外泌體的異質(zhì)性可以根據(jù)其大小、含量(載物)、對(duì)受體細(xì)胞的功能影響以及細(xì)胞來源來區(qū)分。北京海洋生物組織外泌體分離

外泌體的生物發(fā)生途徑主要包括三個(gè)關(guān)鍵的檢查點(diǎn):ILV的形成,阻止MVEs的降解以及MVEs和細(xì)胞膜的融合,這三個(gè)檢查點(diǎn)都包含在內(nèi)體相關(guān)的囊泡運(yùn)輸過程中。RABGTPase定位到特定膜結(jié)構(gòu)的表面,通過招募效應(yīng)因子來調(diào)節(jié)相應(yīng)膜結(jié)構(gòu)的囊泡運(yùn)輸,例如,在內(nèi)體溶酶體運(yùn)輸網(wǎng)絡(luò)中,RAB5調(diào)節(jié)早期內(nèi)體的形成及相互融合;內(nèi)體膜上RAB5到RAB7的轉(zhuǎn)換調(diào)節(jié)早期向晚期內(nèi)體的轉(zhuǎn)變;RAB7調(diào)節(jié)晚期內(nèi)體/MVEs與溶酶體的融合來降解ILVs;RAB27調(diào)節(jié)MVEs與細(xì)胞膜的對(duì)接和融合來釋放ILVs形成外泌體。內(nèi)吞的膜蛋白,特別是受體酪氨酸激酶家族的表皮生長因子受體,定位到內(nèi)體和MVEs,通過MVEs和溶酶體融合來進(jìn)入溶酶體降解,此過程受多種RABGTPases和ESCRT復(fù)合體的調(diào)控。安徽植物根組織外泌體wb干細(xì)胞外泌體因在上皮組織的增殖、遷移、再生、炎癥和瘢痕控制等方面的作用。

外泌體的組成較為復(fù)雜,其內(nèi)含有多種生物大分子,如:核酸(雙鏈DNA和各種RNA亞型)、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)。這些分子被外泌體攜帶進(jìn)入血液循環(huán),而后被靶細(xì)胞吸收,從而調(diào)節(jié)靶細(xì)胞基因表達(dá)和細(xì)胞功能。此外,外泌體相關(guān)的miRNA作為短單鏈和非編碼RNA分子,調(diào)節(jié)致病基因或抑病基因的表達(dá),參與細(xì)胞分化、細(xì)胞凋亡及細(xì)胞信號(hào)的傳導(dǎo)。有研究表明,外泌體能影響種瘤微環(huán)境的形成、增強(qiáng)種瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力、介導(dǎo)種瘤免疫壓制及參與種瘤放化療抵抗進(jìn)而促進(jìn)種瘤的發(fā)展。

外泌體(Exosome),是細(xì)胞外囊泡(EV)的一種主要類型,是直徑為30至150nm的納米大小的膜結(jié)構(gòu),大多數(shù)細(xì)胞都會(huì)分泌外泌體。外泌體存在于各種生物體液中,通過其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂質(zhì)和代謝物等來發(fā)揮細(xì)胞間通訊功能,參與免疫應(yīng)答、代謝和心血管疾病、神經(jīng)退行性疾病以及病癥進(jìn)展等多種生理和病理過程。在內(nèi)體轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒於嗄遗輧?nèi)體(MVE)的過程中,內(nèi)體膜向腔內(nèi)出芽形成腔內(nèi)囊泡(ILV),MVE與細(xì)胞膜融合釋放ILV到細(xì)胞外,即形成外泌體。外泌體是一種由活細(xì)胞分泌的,直徑約為40~160nm的具有雙層膜結(jié)構(gòu)的生物活性囊泡。

瘤在生長過程中會(huì)不斷地將外泌體釋放到周圍環(huán)境中去,同時(shí),外泌體能在4℃保存96h,或是在-70℃下保存更長時(shí)間,可以從患者的體液中分離外泌體用于早期臨床診斷。隨著技術(shù)的進(jìn)步,已經(jīng)有生物公司嘗試涉足外泌體領(lǐng)域,外泌體中存在黑色素瘤標(biāo)志物包括MIA、S100B和酪氨酸酶相關(guān)蛋白,且黑色素瘤患者胞外體中MIA和S100B濃度顯著高于健康人群和非黑色素瘤患者,通過檢測MIA和S100B表達(dá)水平對(duì)黑色素瘤的診治具有積極地參照作用。從本質(zhì)上說,液態(tài)活檢是分子診斷在樣本來源上的延伸,進(jìn)一步豐富了檢測手段,而隨著外泌體的不斷揭秘,相信其會(huì)在液態(tài)活檢中發(fā)揮越來越重要的作用。泌體是細(xì)胞內(nèi)源性的小囊泡,由大多數(shù)細(xì)胞分泌。北京海洋生物組織外泌體分離

細(xì)胞外囊泡(EVs)表示了細(xì)胞間通訊的一個(gè)重要模式。北京海洋生物組織外泌體分離

外泌體大小不均可能是由于MVB的限制膜不均勻內(nèi)陷,導(dǎo)致流體和固體的總含量不同;細(xì)胞的微環(huán)境和固有的生物學(xué)特性可能會(huì)影響外顯體的含量及其生物學(xué)標(biāo)記,如乳腺病細(xì)胞及其外泌體的蛋白質(zhì)組可以顯示來源細(xì)胞是上皮樣細(xì)胞還是間充質(zhì)樣細(xì)胞;由于細(xì)胞表面受體表達(dá)的不同,外泌體對(duì)受體細(xì)胞的影響可能不同,可能誘導(dǎo)細(xì)胞存活,也可能誘導(dǎo)凋亡,或誘導(dǎo)免疫調(diào)節(jié)等;異質(zhì)性也可以基于外泌體起源的組織,包括它們是否來自病細(xì)胞,瘤細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體傳遞致瘤miRNAs明顯促進(jìn)瘤細(xì)胞增殖。北京海洋生物組織外泌體分離