血清外泌體融合實驗

來源: 發(fā)布時間:2022-03-17

尋找肝臟疾病的新型分子標志物一直是研究熱點,也是難點。不同肝臟疾病中,細胞分泌的外泌體所攜帶的核酸和蛋白組分之間存在差異。這些不同生理狀態(tài)下外泌體所攜帶的特異性蛋白分子、miRNA等,是潛在的分子診斷和預后標志物。肝細胞患者中,血清外泌體miR-21、-18a、-221、-222和miR-224明顯上升,miR-101、-106b、-122和miR-195明顯下降。而HCC患者肝移植復發(fā)后,血清外泌體miR-718水平明顯下降。除外泌體外,微泡也有可能作為新型標志物,研究發(fā)現(xiàn)HCV患病者中CD4+和CD8+T細胞來源的微泡含量上升;而肝臟干細胞分泌的微泡中多種miRNAs上調(diào)。外泌體其純度與超離心法和PEG沉淀法提取外泌體做比較。血清外泌體融合實驗

臨床上,干細胞外泌體主要治理燒傷、燙傷、皮膚潰瘍、再生健康皮膚。在護膚方面,主要是對外傷受損、衰老進行修復,比較全的調(diào)理皮膚、改善膚質,令肌膚恢復年輕、健康的狀態(tài)。干細胞外泌體可以再生皮膚和強化皮膚屏障,具有比較好的再生效果,且沒有其它副作用。干細胞外泌體或將成為治、特異性皮炎等寬泛炎癥性皮膚疾病的一種有效且安全可靠的治理方法。如今,干細胞外泌體已在幾種不同類型的疾病中顯示出令人鼓舞的治理效果,包括腎損傷、心臟損傷、腦損傷和肝肺損傷等。主要機制可能是外泌體介導了MSC的旁分泌/自分泌機制。遼寧腹膜透析液外泌體提取泌體是細胞內(nèi)源性的小囊泡,由大多數(shù)細胞分泌。

人體內(nèi)多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,包括干細胞、免疫細胞、內(nèi)皮細胞、血小板及平滑肌細胞等。外泌體被包裹在堅硬的雙層膜中。雙層膜保護外泌體的內(nèi)容物,使外泌體能夠在組織中長距離移動。干細胞外泌體因在上皮組織的增殖、遷移、再生、炎癥和瘢痕控制等方面的作用,有望成為“無細胞的細胞治理”工具。干細胞來源的外泌體可通過囊泡,將干細胞的精華部分——mRNA、miRNA、IncRNA及蛋白質等生物活性物質,打包運出干細胞體外。通過“細胞間高速公路”來“快遞”到人體各個組織內(nèi)。

外泌體研究可以指導診治肝損傷、酒精或非酒精性脂肪肝等其他肝臟疾病。藥物誘導肝損傷(DILI)大鼠模型中,尿外泌體中的蛋白含量減少,包括CD26、CD81和其他潛在的標志物蛋白。而另一項研究則發(fā)現(xiàn)DILI大鼠血清中分離到的外泌體含有更高水平的蛋白,如HSP70、HSP90等。MSCs來源的外泌體可以誘導肝細胞增殖相關基因表達,減弱CCL4誘導的肝損傷。而酒精刺激會促進外泌體的分泌,miRNAs水平也會升高,并促進細胞因子的分泌,喚醒單核細胞的分化。盡管已取得上述成果,我們對外泌體的研究尚不夠深入,外泌體在肝臟生理和病理中的重要作用及其臨床應用仍有待繼續(xù)探索。實際上,用PS親和法提取的人白血病細胞釋放的外泌體。

事實上,動物實驗表明:在小鼠急性心肌梗塞術后,注射來源于間充質干細胞、心臟祖細胞、胚胎干細胞或心肌源性細胞的外泌體均可改善心臟功能,減輕心臟纖維化,刺激血管生成。例如,心源性細胞外泌體能通過特異性的巨噬細胞極化為急性心肌梗死提供心臟保護作用。心臟再灌注后,CDCexo的輸注降低了大鼠和豬心肌梗死模型的梗死面積,而且CDCexo會減少梗死組織內(nèi)CD68+巨噬細胞數(shù)量,并改變巨噬細胞的極化狀態(tài)。自體CD34+干細胞的移植可以改善缺血組織再灌注后的功能,并降低嚴重肢體缺血患者的截肢率。其作用機制在于:CD34+干細胞分泌的外泌體促進小鼠下肢缺血模型血管生成。雖然臨床前研究的證據(jù)表明干細胞釋放的外泌體可以作為心肌修復的潛在無細胞治理劑,但是,目前將外泌體完全用作心臟修復治理劑之前還是有很多重點問題需要解決。腫瘤細胞在內(nèi)幾乎所有類型的細胞(免疫細胞、神經(jīng)細胞、干細胞),都可以產(chǎn)生并釋放外泌體。遼寧腹膜透析液外泌體提取

雙層囊膜結構(茶托狀)是外泌體重要標志之一,但普通光學顯微鏡難以觀察到此種亞顯微結構。血清外泌體融合實驗

外泌體(Exosome)是由細胞分泌而來的微小囊泡,直徑約為30-200 nm,形態(tài)也呈現(xiàn)出多樣性。microRNA(miRNA)是一種大小約21—23個堿基的單鏈小分子RNA,是由具有發(fā)夾結構的約70—90個堿基大小的單鏈RNA前體經(jīng)過Dicer酶加工后生成,不同于siRNA(雙鏈)但是和siRNA密切相關。microRNA通過和靶基因mRNA堿基配對引導沉默復合體(RISC)降解mRNA或抑制mRNA的翻譯,從而在轉錄后水平調(diào)控蛋白表達。microRNA在物種進化中相當保守,在動物、植物等中發(fā)現(xiàn)的microRNA表達均有嚴格的組織特異性和時序性。microRNA在細胞生長和發(fā)育過程中起多種作用,包括調(diào)控發(fā)育、分化、凋亡和增殖等。血清外泌體融合實驗