外泌體的形成始于細(xì)胞內(nèi)陷，成熟于多囊泡胞內(nèi)體，終于膜融合。細(xì)胞通過(guò)內(nèi)吞作用產(chǎn)生小囊泡，小囊泡融合形成早期胞內(nèi)體（earlyendosome），在多個(gè)蛋白的協(xié)同調(diào)控下，早期胞內(nèi)體出芽形成含有多個(gè)腔內(nèi)小囊泡的多泡體（multivesicularbodies，MVB），這個(gè)過(guò)程中這些腔內(nèi)小囊泡（intraluminalvesicles，ILVs）會(huì)裝載各種核酸和蛋白質(zhì)等分子，泡內(nèi)體較后在GTPase家族中RAB酶的調(diào)節(jié)下與細(xì)胞膜融合。隨后，這些小囊泡會(huì)被釋放到細(xì)胞外，稱(chēng)為外泌體。外泌體是通過(guò)細(xì)胞內(nèi)吞細(xì)胞膜融合主動(dòng)排除的物質(zhì)，大小均勻，而微泡是由細(xì)胞直接出芽脫落生成，大小不均一?？刹扇⊥ㄟ^(guò)透射電鏡確定外泌體大小。山東海洋動(dòng)物組織外泌體wb
事實(shí)上，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明：在小鼠急性心肌梗塞術(shù)后，注射來(lái)源于間充質(zhì)干細(xì)胞、心臟祖細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞或心肌源性細(xì)胞的外泌體均可改善心臟功能，減輕心臟纖維化，刺激血管生成。例如，心源性細(xì)胞外泌體能通過(guò)特異性的巨噬細(xì)胞極化為急性心肌梗死提供心臟保護(hù)作用。心臟再灌注后，CDCexo的輸注降低了大鼠和豬心肌梗死模型的梗死面積，而且CDCexo會(huì)減少梗死組織內(nèi)CD68+巨噬細(xì)胞數(shù)量，并改變巨噬細(xì)胞的極化狀態(tài)。自體CD34+干細(xì)胞的移植可以改善缺血組織再灌注后的功能，并降低嚴(yán)重肢體缺血患者的截肢率。其作用機(jī)制在于：CD34+干細(xì)胞分泌的外泌體促進(jìn)小鼠下肢缺血模型血管生成。雖然臨床前研究的證據(jù)表明干細(xì)胞釋放的外泌體可以作為心肌修復(fù)的潛在無(wú)細(xì)胞治理劑，但是，目前將外泌體完全用作心臟修復(fù)治理劑之前還是有很多重點(diǎn)問(wèn)題需要解決。上海植物莖組織外泌體透射電鏡檢測(cè)外泌體的異質(zhì)性可以根據(jù)其大小、含量(載物)、對(duì)受體細(xì)胞的功能影響以及細(xì)胞來(lái)源來(lái)區(qū)分。
外泌體由于包含的內(nèi)容物具有明顯的組織特異性，為其能成為瘤早期診斷的生物標(biāo)志物提供了重要保障。但目前對(duì)于外泌體miRNA、LnkRNA等的檢測(cè)方法還不成熟，限制了外泌體用于疾病診斷中的應(yīng)用?；谕饷隗w的診斷產(chǎn)品獲得FDA批準(zhǔn)上市，很大程度的增加了研發(fā)企業(yè)的信心。外泌體的異質(zhì)性又決定了外泌體藥物遞送系統(tǒng)不能提供一個(gè)普適的遞藥策略，必須根據(jù)所傳遞治理物質(zhì)的類(lèi)型、目標(biāo)組織的特點(diǎn)等進(jìn)行針對(duì)性的進(jìn)行策略調(diào)整。良好的生物兼容性、穩(wěn)定性和內(nèi)在靶向性等使外泌體在藥物遞送方向大有潛力。
外泌體(Exosome)是由細(xì)胞分泌而來(lái)的微小囊泡，直徑約為30-200 nm，形態(tài)也呈現(xiàn)出多樣性。microRNA(miRNA)是一種大小約21—23個(gè)堿基的單鏈小分子RNA，是由具有發(fā)夾結(jié)構(gòu)的約70—90個(gè)堿基大小的單鏈RNA前體經(jīng)過(guò)Dicer酶加工后生成，不同于siRNA（雙鏈）但是和siRNA密切相關(guān)。microRNA通過(guò)和靶基因mRNA堿基配對(duì)引導(dǎo)沉默復(fù)合體（RISC）降解mRNA或抑制mRNA的翻譯，從而在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控蛋白表達(dá)。microRNA在物種進(jìn)化中相當(dāng)保守，在動(dòng)物、植物等中發(fā)現(xiàn)的microRNA表達(dá)均有嚴(yán)格的組織特異性和時(shí)序性。microRNA在細(xì)胞生長(zhǎng)和發(fā)育過(guò)程中起多種作用，包括調(diào)控發(fā)育、分化、凋亡和增殖等。在細(xì)胞外基質(zhì)中，外泌體膜蛋白可被蛋白酶剪切，碎片作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合，喚醒細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路。
外泌體及活性蛋白能直接穿透皮膚間隙，快速直達(dá)基底層起效；富含100+多種胞外基質(zhì)蛋白、胞外基質(zhì)酶以及細(xì)胞黏附分子；能夠有效促進(jìn)皮膚成纖維細(xì)胞（HDFs）中I型膠原蛋白、成纖維蛋白，促進(jìn)皮膚有效快速再生（Rejuvenation）；能夠有效促進(jìn)皮膚成纖維細(xì)胞（HDFs）彈性蛋白生成，保持皮膚飽滿(mǎn)和彈性；有效降低皮膚成纖維細(xì)胞（HDFs）中膠原蛋白酶(MMP-1)的生成從而防止皮膚間質(zhì)中IIIIII型膠原蛋白被降解；富含活性物質(zhì)能夠促進(jìn)皮膚有些血管的修復(fù)與重建再生。以前無(wú)法用超速離心法提取的微囊泡，也通過(guò)運(yùn)用PS親和法實(shí)現(xiàn)高純度提取。北京動(dòng)物組織外泌體分離
必須慎重分析得到的是否是外泌體。山東海洋動(dòng)物組織外泌體wb
瘤在生長(zhǎng)過(guò)程中會(huì)不斷地將外泌體釋放到周?chē)h(huán)境中去，同時(shí)，外泌體能在4℃保存96h，或是在-70℃下保存更長(zhǎng)時(shí)間，可以從患者的體液中分離外泌體用于早期臨床診斷。隨著技術(shù)的進(jìn)步，已經(jīng)有生物公司嘗試涉足外泌體領(lǐng)域，外泌體中存在黑色素瘤標(biāo)志物包括MIA、S100B和酪氨酸酶相關(guān)蛋白，且黑色素瘤患者胞外體中MIA和S100B濃度顯著高于健康人群和非黑色素瘤患者，通過(guò)檢測(cè)MIA和S100B表達(dá)水平對(duì)黑色素瘤的診治具有積極地參照作用。從本質(zhì)上說(shuō)，液態(tài)活檢是分子診斷在樣本來(lái)源上的延伸，進(jìn)一步豐富了檢測(cè)手段，而隨著外泌體的不斷揭秘，相信其會(huì)在液態(tài)活檢中發(fā)揮越來(lái)越重要的作用。山東海洋動(dòng)物組織外泌體wb