江蘇海洋動(dòng)物組織外泌體wb

l 慢病毒介導(dǎo)CD63-GFP表達(dá)：將外泌體的特定蛋白CD63和綠色熒光蛋白GFP的表達(dá)元件構(gòu)建成質(zhì)粒再包裝到慢病毒中，隨后用此慢病毒傳播細(xì)胞，使細(xì)胞分泌的外泌體帶有綠色熒光。外泌體功能研究：將標(biāo)記的外泌體加入受體細(xì)胞培養(yǎng)基中，與受體細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng)，觀察細(xì)胞的功能變化，如細(xì)胞增殖、遷移與侵襲、細(xì)胞凋亡等；或者將外泌體注射入動(dòng)物模型中，觀察動(dòng)物表型變化和檢測動(dòng)物相關(guān)指標(biāo)。外泌體（exosomes）是一種能被機(jī)體內(nèi)大多數(shù)細(xì)胞分泌的微小膜泡，具有脂質(zhì)雙層膜，直徑大約為 30-150 nm。外泌體普遍存在并分布于各種體液中，攜帶和傳遞重要的信號分子，形成了一種全新的細(xì)胞-細(xì)胞間信息傳遞系統(tǒng)，影響細(xì)胞的生理狀態(tài)并與多種疾病的發(fā)生與進(jìn)程密切相關(guān)。示蹤病毒使用CD9作為生物標(biāo)記，通過將CD9與熒光蛋白偶聯(lián)，帶熒光的膜蛋白會(huì)在表達(dá)至外泌體膜上。江蘇海洋動(dòng)物組織外泌體wb

外泌體本身的惰性相當(dāng)高，但它們與細(xì)胞膜融合可將所攜帶的物質(zhì)和信號傳遞到受體細(xì)胞并改變其生物學(xué)功能，因此，外泌體是納米藥物遞送或基因治理的潛在載體。外泌體作為功能性小RNA和蛋白質(zhì)的天然載體也引起了藥物遞送領(lǐng)域的極大興趣，因?yàn)樗梢岳眠@些囊泡治理性遞送各種核糖核酸分子、肽和合成藥物。外泌體作為疾病診斷標(biāo)志物的潛在應(yīng)用依賴于基于外泌體的藥物遞送系統(tǒng)的技術(shù)突破，要將其用于臨床治理，外泌體的大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)還面臨很大的挑戰(zhàn)。首先，對外泌體的具體合成機(jī)制、功能了解并不是非常詳細(xì)。其次，現(xiàn)在缺乏經(jīng)濟(jì)有效的外泌體分離技術(shù)。江蘇海洋動(dòng)物組織外泌體wb對分離提取的外泌體進(jìn)行鑒定的經(jīng)典方案有：NTA分析、電鏡分析、蛋白標(biāo)志物鑒定等。

外泌體是細(xì)胞在特定條件下分泌的小囊泡，是細(xì)胞間傳遞信號，相互溝通和影響的重要工具，它可以直接進(jìn)入受體細(xì)胞影響細(xì)胞功能。外泌體PK細(xì)胞因子：磷脂雙層膜結(jié)構(gòu)，可保護(hù)內(nèi)容物，包含多種細(xì)胞因子可直接進(jìn)入受體細(xì)胞。外泌體PK干細(xì)胞：無免疫排斥，體積小穿透力強(qiáng)，可避免倫理道德爭議。年輕的脂肪組織中提取外泌體，在特定條件下擴(kuò)大培養(yǎng)出具有調(diào)控毛發(fā)根部的囊干細(xì)胞功能的外泌體，包含多種細(xì)胞因子的外泌體直接進(jìn)入毛發(fā)根部的囊細(xì)胞，恢復(fù)毛發(fā)根部的囊干細(xì)胞的正常功能。

肺病細(xì)胞來源外泌體（LCC-exosome）可以通過刺激種瘤血管的形成來促進(jìn)種瘤的生長。據(jù)相關(guān)報(bào)道稱，LCC-exosome中的miR-210可以通過調(diào)節(jié)基質(zhì)細(xì)胞中酪氨酸受體激酶A3的含量，促進(jìn)種瘤血管的生成；而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過開啟脯氨酰羥化酶及壓制緊密結(jié)合蛋白ZO-1來促進(jìn)肺病的生血管作用。此外，有研究發(fā)現(xiàn)，外泌體中的內(nèi)容物可以觸發(fā)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達(dá)增加，促使人正常支氣管上皮細(xì)胞出現(xiàn)EMT，從而使肺支氣管正常上皮細(xì)胞出現(xiàn)增殖，遷移能力?？茖W(xué)家也嘗試?yán)猛饷隗w的壓制發(fā)病機(jī)制功能。外泌體是由細(xì)胞分泌而來的微小囊泡，直徑約為30-200 nm，密度在1.13-1.21g/ml，具有杯狀形態(tài)、雙層膜結(jié)構(gòu)。

一方面，外泌體可以通過調(diào)控細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化如細(xì)胞增殖、遷移和侵襲，促進(jìn)HCC的發(fā)生和發(fā)展。另一方面，惡性瘤細(xì)胞分泌的外泌體可以協(xié)同其他瘤細(xì)胞一起，調(diào)控瘤微環(huán)境，以利于HCC發(fā)展。人HCC細(xì)胞外泌體中含有的一系列miRNAs，會(huì)減弱其他HCC細(xì)胞中TGF-β通路上的蛋白表達(dá)，促進(jìn)HCC細(xì)胞的生長。HCC細(xì)胞外泌體還會(huì)誘導(dǎo)非致瘤性肝細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞遷移和侵襲，具有運(yùn)動(dòng)能力的HCC通過釋放外泌體誘導(dǎo)肝細(xì)胞分泌MMP-2和MMP-9，增強(qiáng)HCC細(xì)胞的侵襲能力。經(jīng)HCC中分離到的CD90+外泌體處理的內(nèi)皮細(xì)胞會(huì)表達(dá)更多的VEGF和VEGFR1，促進(jìn)血管生成；同時(shí)誘導(dǎo)ICAM-1表達(dá)促進(jìn)細(xì)胞轉(zhuǎn)移。還有研究表明外泌體參與HCC缺氧脅迫和藥物耐受的調(diào)控。所有真核細(xì)胞類型包括造血細(xì)胞、上皮細(xì)胞、干細(xì)胞、脂肪細(xì)胞均可在培養(yǎng)條件下分泌外泌體。江蘇海洋動(dòng)物組織外泌體wb

細(xì)胞外囊泡（EVs）表示了細(xì)胞間通訊的一個(gè)重要模式。江蘇海洋動(dòng)物組織外泌體wb

多年來，外泌體被認(rèn)為參與無用的細(xì)胞內(nèi)含物質(zhì)的釋放。但是近年來，外泌體在活內(nèi)作為運(yùn)載脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、RNA等細(xì)胞間信息傳遞的新型媒介而倍受矚目。隨著其功能在生理及病理功能的闡明，外泌體在臨床應(yīng)用的相關(guān)研究中，特別是診斷醫(yī)治、生物標(biāo)記的開發(fā)也迅速發(fā)展起來。現(xiàn)在，外泌體研究幾乎涉及所有的研究領(lǐng)域（免疫、神經(jīng)系統(tǒng)、癥狀、內(nèi)分泌、循環(huán)系統(tǒng)等）。例如，免疫細(xì)胞來源的外泌體含有抗原肽/MHC復(fù)合體和可能控制著免疫細(xì)胞間抗原信息的交換、免疫細(xì)胞活化/非活化等各種免疫應(yīng)答機(jī)制的各種抗原。江蘇海洋動(dòng)物組織外泌體wb