在當(dāng)代準(zhǔn)確醫(yī)療的大趨勢(shì)下，外泌體的發(fā)現(xiàn)和研究為肺病的早期診斷和醫(yī)治提供了嶄新的方向。外泌體在液體活檢中的巨大潛力可以為肺病患者的早期發(fā)現(xiàn)和早期診療提供可靠依據(jù)。根據(jù)種瘤來(lái)源的外泌體在肺病的發(fā)發(fā)展和侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程中的作用及相關(guān)機(jī)制的研究，臨床醫(yī)療人員可以針對(duì)不同的患者制定合適的醫(yī)治方案，以達(dá)到改善肺病患者生存率，延長(zhǎng)肺病患者生存時(shí)間的目的。但是，針對(duì)外泌體的研究還存在諸多的問(wèn)題有待廣大研究者解決，如：外泌體的純化及標(biāo)記方法、如何尋找外泌體的靶基因、外泌體的作用機(jī)制及信號(hào)通路等。總而言之，外泌體的研究有著廣闊的前景，基于外泌體與肺病的研究，有望研發(fā)出能夠應(yīng)用于肺病臨床診斷和醫(yī)治的有效措施，造福更多的患者。外泌體復(fù)雜的內(nèi)容物被認(rèn)為是疾病診斷的無(wú)創(chuàng)或微創(chuàng)生物標(biāo)志物。山東腹水外泌體粒徑檢測(cè)
目前，提取外泌體的方法主要有超速離心法、PEG沉淀法，但這些方法混有非常多的雜質(zhì)，必須慎重分析得到的是否是外泌體。超速離心法存在操作繁雜、回收量不穩(wěn)定，不能用于定量分析、必須使用昂貴的超速離心機(jī)、無(wú)法進(jìn)行多樣品分析等問(wèn)題。因此外泌體研究相對(duì)困難，需要盡快開(kāi)發(fā)操作簡(jiǎn)單、可提取高純度外泌體的技術(shù)。因此，日本和光著眼于巨噬細(xì)胞的外泌體受體Tim4蛋白，制備Tim4細(xì)胞外域與磁珠結(jié)合的“Tim4磁珠”。Tim4通過(guò)磷酯酰絲氨酸（PS）法特異性結(jié)合Tim4蛋白和磁珠，再經(jīng)過(guò)含有EDTA的洗脫緩沖液進(jìn)行分離，提取高純度的完整外泌體。福建組織外泌體western blot外泌體是內(nèi)源性和質(zhì)膜起源的不同類(lèi)型的膜囊泡。
外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡，參與細(xì)胞間通訊，對(duì)外泌體的研究興趣日益增長(zhǎng)，無(wú)論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開(kāi)發(fā)。外泌體富含膽固醇和鞘磷脂。2007年， Valadi等發(fā)現(xiàn)鼠的肥大細(xì)胞分泌 的 exosome可以被人的肥大細(xì)胞捕獲，并且其攜帶的mRNA成分可以進(jìn)入細(xì)胞漿中可以被翻譯成蛋白質(zhì)，不只是是mRNA，exosomes所轉(zhuǎn)移的microRNA同樣具有生物活性，在進(jìn)入靶細(xì)胞后可以靶向調(diào)節(jié)細(xì)胞中mRNA的水平。這一發(fā)現(xiàn)使得研究人員對(duì)exosome的研究熱情激增，截止目前已經(jīng)通過(guò)286項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)了41860種蛋白質(zhì)、2838種microRNA、3408種mRNA。
所有培養(yǎng)的細(xì)胞類(lèi)型均可分泌外泌體，且外泌體天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。 有關(guān)他們分泌和攝取及其組成、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制剛剛開(kāi)始研究。一類(lèi)外泌體中常見(jiàn)的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白，是鳥(niǎo)苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細(xì)胞的融合，有文獻(xiàn)報(bào)道稱RAB4, RAB5和 RAB11主要出現(xiàn)在早期以及回收的核內(nèi)體中，RAB7 和 RAB9主要出現(xiàn)在晚期的核內(nèi)體。現(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白。外泌體的復(fù)雜性，為疾病檢測(cè)和監(jiān)測(cè)提供了一個(gè)多指標(biāo)的診斷窗口。
在20世紀(jì)80年代，外泌體被描述為從網(wǎng)織紅細(xì)胞分泌的內(nèi)體來(lái)源的囊泡。人們對(duì)這些細(xì)胞外囊泡的興趣逐漸增加，因?yàn)樗鼈兯坪鯀⑴c了很多細(xì)胞過(guò)程。外泌體攜帶蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和RNAs，介導(dǎo)體內(nèi)不同細(xì)胞類(lèi)型之間的細(xì)胞間通訊，從而影響正常和病理狀態(tài)。只有近，科學(xué)家才認(rèn)識(shí)到將外泌體與其他類(lèi)型的細(xì)胞外囊泡分開(kāi)的困難，這排除了特定功能對(duì)不同類(lèi)型分泌的囊泡的明確歸因。為了闡明這個(gè)復(fù)雜但正在發(fā)展的科學(xué)領(lǐng)域，該綜述著重于外泌體和其他分泌的細(xì)胞外囊泡的定義。討論了它們的生物發(fā)生，分泌及其后續(xù)的命運(yùn)，因?yàn)樗鼈兊墓δ芤蕾囉谶@些重要過(guò)程。PS親和法提取的外泌體，其蛋白特異性檢測(cè)可高出10~100倍以上。江西血清外泌體染色
外泌體被認(rèn)為是疾病的生物標(biāo)志物和預(yù)后因子，具有重要的臨床診斷和治理意義。山東腹水外泌體粒徑檢測(cè)
目前外科手術(shù)仍是肺病醫(yī)治的有效方法，但術(shù)后復(fù)發(fā)率很高，而傳統(tǒng)放化療對(duì)肺病的醫(yī)治效果又極其有限。因此，肺病醫(yī)治的新模式受到廣大研究者的關(guān)注，已有大量研究證明外泌體在肺病醫(yī)治中有廣闊的應(yīng)用前景。外泌體作為細(xì)胞間通訊的一種形式，在肺病的進(jìn)程中具有重要作用，因此，控制外泌體的分泌可能成為醫(yī)治肺病的潛在靶點(diǎn)。據(jù)相關(guān)報(bào)道稱，EPI64可以通過(guò)開(kāi)啟特異的和Rab27A來(lái)控制A549肺病細(xì)胞的外泌體分泌，提示EPI64可以作為醫(yī)治的潛在靶點(diǎn)。此外，CD9、CD63、HSP90和HSP70在外泌體中富集，從而上調(diào)主要組織相容性復(fù)合物Ⅱ類(lèi)分子表達(dá)水平，顯著促進(jìn)CD4+T細(xì)胞的增殖，通過(guò)免疫途徑壓制種瘤。山東腹水外泌體粒徑檢測(cè)