外泌體作為藥物遞送載體較以往的合成系統(tǒng)具有多方面的優(yōu)勢,比如:人工遞送載體具有更低的免疫原性,其含有的磷脂雙分子層可與靶細胞細胞膜融合,從而避廉價核巨噬細胞系統(tǒng)的吞噬作用。Srivastava等開發(fā)了一種基于外泌體-金奈米粒子(Exo-GNP)的藥物遞送系統(tǒng)—“nanosomes”用于肺病的醫(yī)治,研究表明該系統(tǒng)與單用多柔比星醫(yī)治相比,前者的多柔比星釋放量增加、攝取率提高、化療毒性降低且化療效果增強。此外,還有研究發(fā)現(xiàn),使用外泌體運載紫杉醇(PTX)可顯著提高病細胞對PTX的吸收,將PTX加載至外泌體中顯著增加了藥物細胞毒性,Exo-PTX能顯著壓制肺病的發(fā)展。有望在外泌體和微囊泡生理功能的分析研究上起重大貢獻。安徽血清外泌體鑒定
外泌體的形成始于細胞內(nèi)陷,成熟于多囊泡胞內(nèi)體,終于膜融合。細胞通過內(nèi)吞作用產(chǎn)生小囊泡,小囊泡融合形成早期胞內(nèi)體(earlyendosome),在多個蛋白的協(xié)同調(diào)控下,早期胞內(nèi)體出芽形成含有多個腔內(nèi)小囊泡的多泡體(multivesicularbodies,MVB),這個過程中這些腔內(nèi)小囊泡(intraluminalvesicles,ILVs)會裝載各種核酸和蛋白質(zhì)等分子,泡內(nèi)體較后在GTPase家族中RAB酶的調(diào)節(jié)下與細胞膜融合。隨后,這些小囊泡會被釋放到細胞外,稱為外泌體。外泌體是通過細胞內(nèi)吞細胞膜融合主動排除的物質(zhì),大小均勻,而微泡是由細胞直接出芽脫落生成,大小不均一。廣州胸水外泌體外泌體膜蛋白可以與靶細胞膜蛋白結(jié)合,進而喚醒靶細胞細胞內(nèi)的信號通路。
外泌體的檢測,在其他消化道系統(tǒng)瘤的診療中,存在著巨大的潛在價值.如:食管鱗狀細胞病的研究中發(fā)現(xiàn),miRNA-21在外泌體中的高表達,表達水平可100%反應(yīng)瘤水平,外泌體miRNA-21的高表達往往預(yù)示著寬泛浸潤與復(fù)發(fā)[36].十二指腸病的研究中,發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移性十二指腸病細胞分泌的外泌體富含PABP1蛋白,細胞不能耐受PABP在胞內(nèi)的大量囤積,通過外泌體PABP1蛋白排出胞外是轉(zhuǎn)移性十二指腸病細胞所具有的特性,外泌體PABP1是轉(zhuǎn)移性十二指腸病的分子標志物,此發(fā)現(xiàn)不只在轉(zhuǎn)移性十二指腸病的診斷上提供了價值,也為轉(zhuǎn)移性十二指腸病的治理提供了新的思路。
目前,提取外泌體的方法主要有超速離心法、PEG沉淀法,但這些方法混有非常多的雜質(zhì),必須慎重分析得到的是否是外泌體。超速離心法存在操作繁雜、回收量不穩(wěn)定,不能用于定量分析、必須使用昂貴的超速離心機、無法進行多樣品分析等問題。因此外泌體研究相對困難,需要盡快開發(fā)操作簡單、可提取高純度外泌體的技術(shù)。因此,日本和光著眼于巨噬細胞的外泌體受體Tim4蛋白,制備Tim4細胞外域與磁珠結(jié)合的“Tim4磁珠”。Tim4通過磷酯酰絲氨酸(PS)法特異性結(jié)合Tim4蛋白和磁珠,再經(jīng)過含有EDTA的洗脫緩沖液進行分離,提取高純度的完整外泌體。外泌體作為膜和細胞溶質(zhì)蛋白、脂質(zhì)和RNA細胞之間傳遞的載體。
瘤釋放的外泌體可以通過削弱免疫效應(yīng)細胞的反應(yīng)和激發(fā)免疫抑制細胞的擴增,來營造一個免疫抑制的環(huán)境。瘤釋放的外泌體可以替代瘤細胞接受免疫系統(tǒng)的攻擊,從而幫助瘤細胞逃過免疫系統(tǒng)的識別。瘤釋放的外泌體可以引發(fā)炎癥,利用基質(zhì)浸潤細胞的反應(yīng)營造出利于瘤生長的微環(huán)境。研究表明,在過去短短的5年里,對外泌體的研究已經(jīng)取得了比較好的的進展。如今,收集并分析瘤釋放的外泌體已經(jīng)成為液體活檢的一個重要研發(fā)方向。靶向瘤釋放外泌體的治理策略將對改善病癥患者的命運發(fā)揮出舉足輕重的影響。外泌體被認為是疾病的生物標志物和預(yù)后因子,具有重要的臨床診斷和治理意義。腹水外泌體lncRNA芯片
外泌體能負載的治理物質(zhì)包括小分子化合物、蛋白質(zhì)、寡核苷酸等,且在體液中寬泛分布且具有定向歸巢能力。安徽血清外泌體鑒定
外泌體大小不均可能是由于MVB的限制膜不均勻內(nèi)陷,導(dǎo)致流體和固體的總含量不同;細胞的微環(huán)境和固有的生物學(xué)特性可能會影響外顯體的含量及其生物學(xué)標記,如乳腺病細胞及其外泌體的蛋白質(zhì)組可以顯示來源細胞是上皮樣細胞還是間充質(zhì)樣細胞;由于細胞表面受體表達的不同,外泌體對受體細胞的影響可能不同,可能誘導(dǎo)細胞存活,也可能誘導(dǎo)凋亡,或誘導(dǎo)免疫調(diào)節(jié)等;異質(zhì)性也可以基于外泌體起源的組織,包括它們是否來自病細胞,瘤細胞產(chǎn)生的外泌體傳遞致瘤miRNAs明顯促進瘤細胞增殖。安徽血清外泌體鑒定