浙江雙熒光自噬

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2021-09-04

在正常情況或短時(shí)間的饑餓狀態(tài)下,細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)主要通過(guò)泛素化蛋白酶系統(tǒng)降解為氨基酸。但數(shù)小時(shí)以上的饑餓后,自噬被活化并將蛋白質(zhì)降解為氨基酸。關(guān)于這些氨基酸的用途,主要有三種途徑:自噬的另一大功能是清理細(xì)胞內(nèi)受損的細(xì)胞器或錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)。有時(shí)候自噬也會(huì)清理一些多余的細(xì)胞器(如過(guò)氧化物酶體)。自噬在清理垃圾方面的功能使自噬成為許多疾病的潛在調(diào)整靶點(diǎn)。已經(jīng)有研究表明,自噬被阻止會(huì)導(dǎo)致不正常的蛋白質(zhì)和細(xì)胞器在肝臟、神經(jīng)細(xì)胞和肌肉細(xì)胞中累積。例如,在阿爾茨海默癥中,可以觀察到大量的自噬體,這可能與該疾病中累積的淀粉樣蛋白變性有關(guān)。而在一些神經(jīng)退行性變(如帕金森癥、亨廷頓氏舞蹈癥)的動(dòng)物模型中,用TOR激酶阻止劑來(lái)模擬饑餓信號(hào)以增強(qiáng)自噬,可以減少致病的α-突觸核的蛋白積累,并延緩癥狀出現(xiàn)。線粒體自噬通過(guò)自噬降解胞內(nèi)受損或多余的線粒體,是維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)的關(guān)鍵機(jī)制之一。浙江雙熒光自噬

大自噬,也就是通常說(shuō)的自噬,是真核細(xì)胞蛋白降解的途徑之一。自噬可以被描述為細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的成分(細(xì)胞器、蛋白等)被雙層膜的囊泡包裹,形成自噬體,進(jìn)而傳遞到溶酶體進(jìn)行降解的過(guò)程。詳細(xì)來(lái)說(shuō),自噬過(guò)程與內(nèi)涵體途徑密不可分。一方面,自噬體能夠與晚期內(nèi)體融合形成中間囊泡較終形成自噬溶酶體;另一方面,自噬體能夠直接與溶酶體融合形成自噬溶酶體。無(wú)論通過(guò)哪條途徑,自噬溶酶體較終通過(guò)酸性水解酶將細(xì)胞器、蛋白等消化分解。細(xì)胞本底水平的自噬發(fā)生在營(yíng)養(yǎng)充足的條件下,可保護(hù)細(xì)胞免受錯(cuò)誤折疊蛋白或受損細(xì)胞器的影響,從而防止某些疾病的發(fā)生(如神經(jīng)退行性疾病和病癥)。饑餓等也可誘導(dǎo)自噬的發(fā)生,通過(guò)降解大分子物質(zhì)和細(xì)胞器為細(xì)胞活動(dòng)提供營(yíng)養(yǎng)和能量。自噬性溶酶體是一種自體吞噬泡,作用底物是內(nèi)源性的,即細(xì)胞內(nèi)的蛻變、破損的某些細(xì)胞器或局部細(xì)胞質(zhì)。河南細(xì)胞自噬LC3自噬作用對(duì)維持細(xì)胞體內(nèi)平衡和能量平衡至關(guān)重要。

當(dāng)化療、放療后,病變細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生大量的破損細(xì)胞器、損壞的蛋白質(zhì)等有害成分,而此時(shí)提高自噬活性可及時(shí)清理這些有害物質(zhì),并提供應(yīng)急的底物和能量為修復(fù)受損DNA贏得時(shí)間和條件.由于自噬減少了病變細(xì)胞在代謝應(yīng)激時(shí)發(fā)生壞死的機(jī)會(huì),而對(duì)于病變細(xì)胞群體而言,需要一部分細(xì)胞發(fā)生壞死,以引發(fā)適度的炎癥(有利于血管的長(zhǎng)入、吸引免疫細(xì)胞分泌生長(zhǎng)因子等)。研究發(fā)現(xiàn),許多類型的病變?cè)诖x應(yīng)激時(shí)會(huì)「組成性」活化PI3K信號(hào)以阻止自噬(由于凋亡通路已受阻,阻止自噬會(huì)促進(jìn)壞死),但具體機(jī)制尚不清楚。

選擇性自噬是真核生物體內(nèi)清理蛋白、受損細(xì)胞器和外源微生物的基礎(chǔ)生理過(guò)程。而蛋白的翻譯后修飾,特別是泛素化修飾能夠作為選擇性自噬中的底物識(shí)別的重要信號(hào)。崔雋教授課題組發(fā)現(xiàn)選擇性自噬參與調(diào)控非經(jīng)典NF-kB信號(hào)通路的重要過(guò)程。選擇性自噬中的貨物受體p62通過(guò)識(shí)別p52/p100的N端上的K63泛素化鏈進(jìn)而促使p52/p100發(fā)生自噬降解,阻止非經(jīng)典NF-kB信號(hào)通路。有趣的是,已有報(bào)道認(rèn)為p100C端的K48泛素化鏈?zhǔn)堑鞍酌阁w降解信號(hào)。而崔雋教授課題組發(fā)現(xiàn)的K63泛素化鏈修飾并非大家所熟知的蛋白降解信號(hào),但卻能被自噬貨物受體p62識(shí)別并介導(dǎo)蛋白降解,進(jìn)而調(diào)控底物功能,影響生理與疾病進(jìn)程。相同的細(xì)胞在不同的外部因素作用時(shí),自噬的作用可能不同。在整個(gè)自體吞噬過(guò)程中,細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞器都受到破壞,較明顯的是線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)受損。

在研究自噬與凋亡的關(guān)系時(shí),人們發(fā)現(xiàn)細(xì)胞死亡前胞漿中存在大量的自噬體或自噬溶酶體,但這樣的細(xì)胞缺乏凋亡的典型特點(diǎn),如核固縮),核破裂、細(xì)胞皺縮、沒(méi)有凋亡小體的形成等,被稱為自噬樣細(xì)胞死亡,它是一種新的細(xì)胞程序性死亡,為了與凋亡區(qū)別,被命名為TypeIIcelldeath,相應(yīng)的,凋亡為TypeIcelldeath,壞死為TypeIIIcelldeath。盡管這樣,但對(duì)于自噬是否是細(xì)胞死亡的直接原因目前還存在比較大的爭(zhēng)議。到底是Celldeathbyautophagy(自噬引起死亡)還是Celldeathwithautophagy(死亡時(shí)有自噬發(fā)生,但不是直接原因)?對(duì)此,自噬研究領(lǐng)域“大?!奔?jí)專家LevineBeth在一篇nature的Review中表達(dá)了自己的觀點(diǎn)。由于在形態(tài)學(xué)上2者無(wú)明顯區(qū)別,但通過(guò)阻斷自噬,觀察細(xì)胞的結(jié)局可區(qū)分開來(lái):Celldeathbyautophagy細(xì)胞存活,而Celldeathwithautophagy細(xì)胞死亡。自噬既能阻止也能促進(jìn)細(xì)胞凋亡,兩種反應(yīng)在生物體內(nèi)普遍存在。自噬體形成依賴于一系列ATG蛋白在蛋白泛素化過(guò)程中的共價(jià)結(jié)合。福建電鏡檢測(cè)自噬

以往自噬作用的細(xì)胞質(zhì)分子成分已循序的被發(fā)現(xiàn),但是它的基因轉(zhuǎn)錄及調(diào)控并不為人所知。浙江雙熒光自噬

由于自體吞噬較少受到關(guān)注,而且比較難在體外實(shí)驗(yàn)條件下實(shí)現(xiàn),因此,對(duì)自體吞噬的機(jī)制還不是比較了解。研究主要集中在酵母及其它重要的單細(xì)胞真核生物,而對(duì)植物和哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的自體吞噬過(guò)程的了解則更少。盡管對(duì)自體吞噬具體過(guò)程的了解還需要較大加強(qiáng),但是人們已經(jīng)勾勒出自體吞噬過(guò)程的大致輪廓:細(xì)胞質(zhì)中的線粒體等細(xì)胞器首先被稱為“隔離膜”的囊泡所包被,這種“隔離膜”主要來(lái)自于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體;囊泡較終形成雙層膜結(jié)構(gòu),即自吞噬體(autophagosome),也稱之為初始自體吞噬泡(initialautophagicvacuoles,AVi);自吞噬體與胞內(nèi)體融合形成中間自體吞噬泡(intermediateautophagicvacuoles,AVi/d);較終自體吞噬泡的外膜與溶酶體融合形成降解自體吞噬泡(degradingautophagicvacuoles,AVd),由溶酶體內(nèi)的酶降解自體吞噬泡中的內(nèi)容物和內(nèi)膜。浙江雙熒光自噬