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培養(yǎng)基制備操作步驟:(一)準(zhǔn)確稱量試劑根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。(二)校正pH值將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),標(biāo)記劃線,加熱溶解,補(bǔ)充水分,測(cè)定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1NNaOH和1NHCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。(三)過(guò)濾將玻璃漏斗置鐵架上,再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明。(四)分裝將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準(zhǔn)備滅菌。(五)滅菌培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到徹底滅菌的目的。**兼容外接冷卻**:如支持冷水浴槽或快速轉(zhuǎn)移至冷卻模塊。廣東培養(yǎng)基制備器多少錢
培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備:1.水:除特定要求,實(shí)驗(yàn)室用水的電導(dǎo)率在25℃下應(yīng)不高于25uS/cm(相當(dāng)于電阻率≥0.4MΩcm)。微生物污染應(yīng)不超過(guò)103CFU/mL,較好低于102CFU/mL。應(yīng)根GB/T5750.12或其他有效方法,定期檢驗(yàn)微生物的污染。2.稱量和復(fù)水:稱量所需量的脫水培養(yǎng)基(注意防止吸入粉末,尤其是含有有害物質(zhì)的培養(yǎng)基粉末),先加入少量水,充分混合(注意避免培養(yǎng)基結(jié)塊)后再加水至所需的量。3.溶解和分裝:脫水培養(yǎng)基加水后適當(dāng)加熱,并不攪拌使其快速溶解,必要時(shí),重新溶解。含瓊脂的培養(yǎng)基在加熱溶解前應(yīng)浸泡幾分鐘。云南瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器全自動(dòng)培養(yǎng)基制備儀主要特點(diǎn):具有快速升溫和迅速冷卻功能!
天然培養(yǎng)基中血清主要作用:提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細(xì)胞生長(zhǎng)必須的物質(zhì)。提供和各種生長(zhǎng)因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)(氫化可的松、)、類固醇(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長(zhǎng)因子如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、血小板生長(zhǎng)因子等。提供結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過(guò)程中起重要作用。提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷。
培養(yǎng)基配置原則:控制pH條件,當(dāng)培養(yǎng)基中酸性物質(zhì)積累導(dǎo)致H+濃度增加時(shí),H+與弱堿性鹽結(jié)合形成弱酸性化合物,培養(yǎng)基pH不會(huì)過(guò)度降低;如果培養(yǎng)基中OH-濃度增加,OH-則與弱酸性鹽結(jié)合形成弱堿性化合物,培養(yǎng)基pH也不會(huì)過(guò)度升高。但KH2PO4和K2HPO4緩沖系統(tǒng)只能在一定的pH范圍內(nèi)(6.4-7.2)起調(diào)節(jié)作用。有些微生物,如乳酸菌能大量產(chǎn)酸,上述緩沖系統(tǒng)就難以起到緩沖作用,此時(shí)可在培養(yǎng)基中添加難溶的碳酸鹽(如CaCO3)來(lái)進(jìn)行調(diào)節(jié),CaCO3難溶于水,不會(huì)使培養(yǎng)基pH過(guò)度升高,但它可以不斷中和微生物產(chǎn)生的酸,同時(shí)釋放出CO2,將培養(yǎng)基pH控制在一定范圍內(nèi)。在培養(yǎng)基中還存在一些天然的緩沖系統(tǒng),如氨基酸、肽、蛋白質(zhì)都屬于兩性電解質(zhì),也可起到緩沖劑的作用??s短制備周期,適合高通量實(shí)驗(yàn)室或工業(yè)化生產(chǎn)需求。
培養(yǎng)基的滅菌:培養(yǎng)基的滅菌多采用高壓蒸汽滅菌,各種培養(yǎng)基的滅菌時(shí)間和壓力,按其成分不同而定。普通培養(yǎng)基采用121℃、滅菌15min,但容器和裝量較大時(shí),應(yīng)延長(zhǎng)至20min。含糖培養(yǎng)基115℃、滅菌30min。含糖、血清、雞蛋等培養(yǎng)基可用流動(dòng)蒸汽及血清凝固器80—100℃、30min,連續(xù)3d,間歇滅菌。血清或組織液,采用低熱56—58水浴1h,連續(xù)5—6d滅菌,一些遇高溫即被破壞的物質(zhì)如尿素、腹水等,可用細(xì)菌過(guò)濾器,過(guò)濾除菌。高壓滅菌應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程執(zhí)行,必須逐漸加熱,徹底排除滅菌器內(nèi)的空氣,再逐漸升壓保持預(yù)定的壓力和時(shí)間,達(dá)到全部殺滅微生物。以上的滅菌時(shí)間和溫度要經(jīng)過(guò)驗(yàn)證確認(rèn),如不同類型培養(yǎng)基混合一起滅菌時(shí)宜采用115℃、滅菌30min為好。培養(yǎng)基制備器必須附有該批培養(yǎng)基制備記錄副頁(yè)或明顯標(biāo)簽!湖北全自動(dòng)培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基制備器一鍵選擇培養(yǎng)皿類型;整合數(shù)據(jù)庫(kù),預(yù)設(shè)培養(yǎng)皿尺寸選擇程序!廣東培養(yǎng)基制備器多少錢
培養(yǎng)基制備基本方法:培養(yǎng)基配方的選定,同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別。因此,除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外,一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料,加以比較核對(duì),再依據(jù)自己的使用目的加以選用,記錄其來(lái)源。培養(yǎng)基pH的初步調(diào)整,培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應(yīng)進(jìn)行pH的初步調(diào)正,因培養(yǎng)基在加熱消毒過(guò)程中、pH會(huì)有所變化,例如,牛肉浸液約可降低pH0.2。而腸浸液pH卻會(huì)有明顯的升高。因此,對(duì)這個(gè)步驟,操作者應(yīng)隨時(shí)注意探索經(jīng)驗(yàn)、以期能掌握培養(yǎng)基的很終pH,保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。pH調(diào)正后,還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘,以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。廣東培養(yǎng)基制備器多少錢