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殺毒滅菌方式主要有三種類(lèi)型:⑴高壓蒸汽滅菌方式,此方法可用于大多數(shù)耐熱培養(yǎng)基。⑵煮沸滅菌法方式:此方法可用于含有不耐高溫物質(zhì)的培養(yǎng)基。⑶過(guò)濾除菌方式:過(guò)濾除菌,采用無(wú)菌技術(shù)定量添加培養(yǎng)基。血液和可以用無(wú)菌技術(shù)抽取并加入冷卻至約五十度的培養(yǎng)基中。當(dāng)培養(yǎng)基中含有不耐熱物質(zhì)時(shí)可以使用此方法。培養(yǎng)基倒入平板:將滅菌溶化的培養(yǎng)基冷卻至五十度后,倒入無(wú)菌干燥的培養(yǎng)皿中。微生物培養(yǎng)基制備的溫度不能太高,否則培養(yǎng)皿內(nèi)蓋容易形成過(guò)多的冷凝水。通訊連接失敗檢查數(shù)據(jù)線(xiàn)接口氧化情況。瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備器售后
培養(yǎng)基配制:配制用水,培養(yǎng)基的大部分是水,所以水的質(zhì)量直接影響培養(yǎng)基的質(zhì)量。按Waymouth標(biāo)準(zhǔn),水的電阻應(yīng)為200萬(wàn)歐姆,一般實(shí)驗(yàn)室里以玻璃蒸餾器制備的雙蒸水或三蒸水可以符合使用條件。培養(yǎng)基:培養(yǎng)基有天然、人工兩種。一般實(shí)驗(yàn)室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基,以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)調(diào)pH至7.2-7.4,若pH值超過(guò)7.6或遠(yuǎn)低于6.8,則大多數(shù)細(xì)胞不能生長(zhǎng)。RPMI-1640不耐高壓滅菌,使用前需經(jīng)滅菌0.22μm孔徑濾膜濾過(guò)處理。血清:培養(yǎng)中常使用小牛血清(或胎牛血清)。血清亦不能高壓滅菌,無(wú)菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補(bǔ)體,置4℃冰箱存放待用。配制時(shí)含量視培養(yǎng)細(xì)胞種類(lèi)、時(shí)間而定,一般用10—15%。由于血清成分復(fù)雜、條件不易控制,可選用無(wú)血清培養(yǎng)基。遼寧培養(yǎng)基滅菌 培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基制備器一鍵選擇培養(yǎng)皿類(lèi)型;整合數(shù)據(jù)庫(kù),預(yù)設(shè)培養(yǎng)皿尺寸選擇程序!
天然培養(yǎng)基中血清主要作用:對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用:有一些細(xì)胞,如內(nèi)皮細(xì)胞、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,則有目的的使用血清來(lái)終止胰蛋白酶的消化作用。因?yàn)橐鹊鞍酌敢呀?jīng)被較廣用于貼壁細(xì)胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時(shí),粘度起到重要作用。血清還含有一些微量元素和離子,他們?cè)诖x中起重要作用,如SeO3、硒等。
培養(yǎng)基制備方法與注意事項(xiàng):1、培養(yǎng)基配方選擇同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別。因此,除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外,一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料,加以比較核對(duì),再依據(jù)自己的使用目的,加以選用,記錄其來(lái)源。2、培養(yǎng)基制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄,包括培養(yǎng)基名稱(chēng),配方及其來(lái)源,和各種成份的牌號(hào),好終pH值、消毒的溫度和時(shí)間制備的日期和制備者等,記錄應(yīng)復(fù)制一份,原記錄保存?zhèn)洳?,?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。3、培養(yǎng)基成份稱(chēng)量培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱(chēng)取并要注意防止錯(cuò)亂,好好一次完成,不要中斷。可將配方置于傍側(cè),每稱(chēng)完一種成分即在配方上做出記號(hào),并將所需稱(chēng)取的藥品一次取齊,置于左側(cè),每種稱(chēng)取完畢后,即移放于右側(cè)。完全稱(chēng)取完畢后,還應(yīng)進(jìn)行一次檢查。快速冷卻技術(shù)避免熱敏感成分降解,保護(hù)活性物質(zhì)。 設(shè)備兼容不同規(guī)格容器,滿(mǎn)足小試到中試生產(chǎn)需求。
培養(yǎng)基各成份的混合和溶化:培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,避免有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細(xì)菌不易生長(zhǎng)。Z好使用不銹鋼鍋加熱溶化,也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時(shí)、可先用溫水加熱并隨時(shí)擾動(dòng),以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,應(yīng)重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化。迄至煮沸。如為瓊脂培養(yǎng)基,應(yīng)先用一部分水將瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過(guò)程中,因蒸發(fā)而丟失的水分,Z后必須加以補(bǔ)足。設(shè)備運(yùn)行噪音低于行業(yè)標(biāo)準(zhǔn),優(yōu)化實(shí)驗(yàn)室環(huán)境。 在環(huán)境監(jiān)測(cè)領(lǐng)域支持微生物檢測(cè)培養(yǎng)基快速制備。吉林自動(dòng)攪拌培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基中的維生素、生長(zhǎng)因子等易受高溫破壞,高效加熱縮短熱暴露時(shí)間,減少降解。瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備器售后
天然培養(yǎng)基中血清主要作用:提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)物、脂類(lèi)物質(zhì)、核酸衍生物等,是細(xì)胞生長(zhǎng)必須的物質(zhì)。提供和各種生長(zhǎng)因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)(氫化可的松、)、類(lèi)固醇(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長(zhǎng)因子如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、血小板生長(zhǎng)因子等。提供結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過(guò)程中起重要作用。提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷。瓊脂滅菌 培養(yǎng)基制備器售后