外泌體的提取方法,先用含無外泌體血清的培養(yǎng)基對人脂肪來源間充質(zhì)干細胞進行饑餓培養(yǎng),這樣可使干細胞處于正常生長狀態(tài),不會被克制生長增殖,其所分泌的外泌體所包含的有效物質(zhì)也更貼近其自然狀態(tài)下的外泌體,然后將含有外泌體的培養(yǎng)上清液進行低速差速離心(即先一離心處理、再第二離心處理)以去除細胞及其碎片,用100kd超濾管對低速差速離心后的離心液進行超濾濃縮得到外泌體濃度更高的超濾液,將超濾液經(jīng)過第三離心處理去除雜質(zhì)后直接用0.22μm過濾器過濾除菌,過濾掉粒徑為220nm以上的物質(zhì),進一步得到含顆粒粒徑小于220nm的濃縮液,因超濾濃縮處理和第三離心處理使得液體量濃縮,這樣過濾除菌效率得到較大提高,較后...
外泌體相關(guān)miRNA與肺病的診斷:miRNAs是一類含有20~25個核苷酸的非編碼小RNA,能夠通過下調(diào)或壓制靶mRNAs來調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄水平上的基因表達,目前非編碼RNA被普遍發(fā)現(xiàn)存在于NSCLC患者外泌體中,參與一些病癥的形成和演化過程。單個miRNA可能通過壓制性復(fù)合物與多個mRNA結(jié)合,從而阻滯整個生物通路。因此,外泌體的miRNA具有成為NSCLC標志物的優(yōu)勢。Chen等在152例肺病患者的研究中初次報道了循環(huán)游離miRNA的表達,與75例健康者相比,發(fā)現(xiàn)了兩種高表達的miRNA(miR-25和miR-223)。Rabinonowits等對27例肺病患者和9例健康人的血漿外泌體中12個mi...
外泌體提取:1、過濾。超濾膜也可用于分離外泌體。根據(jù)外泌體的大小,從蛋白質(zhì)和其他大分子中分離外泌體。較常見的過濾膜具有0.8μm、0.45μm或0.22μm的孔徑,可用于收集大于800nm、400nm或200nm的外泌體,也有設(shè)計成微柱多孔硅纖毛結(jié)構(gòu)以分離40-100nm外泌體:不過,該方法由于過濾膜的粘附,可能會損失外泌體,并且過濾時的壓力和剪切力,可能會使外泌體變形受損。2、基于聚合物的沉淀技術(shù)?;诰酆衔锏某恋砑夹g(shù)通常包括將樣本與含聚合物的沉淀溶液混合,在4℃溫育并低速離心。用于聚合物沉淀的較常見聚合物之一是聚乙二醇(PEG)。用這種聚合物沉淀具有許多優(yōu)點,包括對分離的外泌體影響小、pH...
外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法,這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多,但是純度不足,電鏡鑒定時發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊,由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標準,也有一些研究認為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過濾離心,這種操作簡單、省時,不影響外泌體的生物活性,但同樣存在純度不足的問題。三是密度梯度離心法,用此種方法分離到的外泌體純度高,但是前期準備工作繁雜,耗時,量少。、靜置10~15分鐘,留取沉淀物備用。溫州外泌體提取試劑進貨價外泌體(exosome),特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。其主要來源于細胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜...
外泌體項目獲批學(xué)科方向:從統(tǒng)計來看,與前年相似外泌體立項集中的領(lǐng)域還是一些病癥學(xué),近年來外泌體發(fā)表的文章也絕大部分與其在一些病癥的形成,耐藥性,檢測等方面有關(guān)。例如2019年發(fā)表在MolecularCancer(IF=10.679)上的文章表明外泌體FMR1-AS1通過TLR7/NFκB/c-My信號通路在女性食管ai中促進維持ai癥干細胞樣細胞的動態(tài)平衡。發(fā)表在JournalofExperimental&ClinicalCancerResearch(IF=5.646)上的一篇文章發(fā)現(xiàn)外泌體轉(zhuǎn)運p-STAT3可促進結(jié)直腸ai細胞獲得性5-FU耐藥性。發(fā)表在Cancers(IF=6.162)上的...
外泌體的提取、分離方法:超高速離心法。常用的是超高速離心法,該方法是被譽為分離外泌體的“金標準”。該方法利用離心力從細胞培養(yǎng)液或生物流體獲得外泌體,經(jīng)過400×g、2000×g、10000×g的低速離心,除去細胞及大的細胞分泌物;較后超高速100000×g離心得到外泌體[12]。超高速離心因操作簡單,不需要復(fù)雜的技術(shù)支持,并且成本相對較低而被普遍使用。但是該方法耗時、產(chǎn)率低,得到的外泌體的數(shù)量和質(zhì)量很大程度上受轉(zhuǎn)子的類型、轉(zhuǎn)子沉降角度等因素影響,其中較主要的問題就是差速離心法獲得的沉淀物是外泌體,但也會有其他的囊泡、蛋白質(zhì)或蛋白和RNA的聚集體。外泌體提?。撼叽缗抛枭V可以精確分離大小分子。蕪...
外泌體的提取方法,先用含無外泌體血清的培養(yǎng)基對人脂肪來源間充質(zhì)干細胞進行饑餓培養(yǎng),這樣可使干細胞處于正常生長狀態(tài),不會被克制生長增殖,其所分泌的外泌體所包含的有效物質(zhì)也更貼近其自然狀態(tài)下的外泌體,然后將含有外泌體的培養(yǎng)上清液進行低速差速離心(即先一離心處理、再第二離心處理)以去除細胞及其碎片,用100kd超濾管對低速差速離心后的離心液進行超濾濃縮得到外泌體濃度更高的超濾液,將超濾液經(jīng)過第三離心處理去除雜質(zhì)后直接用0.22μm過濾器過濾除菌,過濾掉粒徑為220nm以上的物質(zhì),進一步得到含顆粒粒徑小于220nm的濃縮液,因超濾濃縮處理和第三離心處理使得液體量濃縮,這樣過濾除菌效率得到較大提高,較后...
外泌體與肺病預(yù)后:外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認為是NSCLC的預(yù)后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標志物時發(fā)現(xiàn),外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升。此外,還有研究表明,低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復(fù)發(fā)率。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時發(fā)現(xiàn),NY-ESO-1是其中對低生存率有顯著影響的標志物。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA,其中l(wèi)et-7f、miR-30e-3p和miR-20b表...
外泌體(exosome),特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。其主要來源于細胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中?,F(xiàn)已證實可以分泌外泌體的細胞有:肥大細胞、淋巴細胞、樹突狀細胞、瘤細胞、間充質(zhì)干細胞等。外泌體在免疫中抗原呈遞、瘤的生長與遷移、組織損傷的修復(fù)等生理病理上起著重要的作用。同時,不同細胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,可作為疾病診斷的生物標志物。細胞外囊泡是蛋白質(zhì)、mRNA、miRNA和脂質(zhì)運輸來完成細胞間通訊通路的重要媒介,根據(jù)它們的大小和發(fā)生分為三類,包括外泌體、微泡和凋亡小體。其中,外泌體是直徑大約為40-100nm的包裝囊泡...
外泌體研究的主要應(yīng)用:外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型,其可參與到機體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化、一些病癥侵襲等方方面面。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細胞與基底細胞的遺傳信息的交換,從而導(dǎo)致大量新生血管的生成,促進了一些病癥的生長與侵襲。一些病癥。一些病癥轉(zhuǎn)移。來自白血病干細胞的外泌體促進急性骨髓性白血?。ˋML)細胞的增殖、遷移和壓制細胞凋亡。治病靶標。利用外泌體遞送小干擾RNA來沉默KRASG12D,從而特異性高效靶向至胰腺病細胞,以明顯降低RAS活化、病細胞增殖和轉(zhuǎn)移過程。免疫。β細胞將含有蛋白質(zhì)和miRNA的外泌體釋放到細胞外,并可轉(zhuǎn)移到其他代謝部位或免...
外泌體研究的主要應(yīng)用:外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型,其可參與到機體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化、一些病癥侵襲等方方面面。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細胞與基底細胞的遺傳信息的交換,從而導(dǎo)致大量新生血管的生成,促進了一些病癥的生長與侵襲。一些病癥。一些病癥轉(zhuǎn)移。來自白血病干細胞的外泌體促進急性骨髓性白血?。ˋML)細胞的增殖、遷移和壓制細胞凋亡。治病靶標。利用外泌體遞送小干擾RNA來沉默KRASG12D,從而特異性高效靶向至胰腺病細胞,以明顯降低RAS活化、病細胞增殖和轉(zhuǎn)移過程。免疫。β細胞將含有蛋白質(zhì)和miRNA的外泌體釋放到細胞外,并可轉(zhuǎn)移到其他代謝部位或免...
具膜囊泡,當(dāng)我們使用常規(guī)方法分離這些結(jié)構(gòu)時不推薦使用其他的名稱來稱呼它們。外泌體(exosome)適用于通過特殊手段拿到的由胞內(nèi)體來源的釋放到細胞外的膜泡結(jié)構(gòu)。建議對細胞外囊泡進行細分時使用物理上的界定如小細胞外囊泡(sEV)和中/大細胞外囊泡(m/lEV),或者高密度囊泡(highdensity)和低密度囊泡(lowdensity)等,同時也建議使用表面蛋白來界定如CD63+CD81+細胞外囊泡等。當(dāng)使用exosomes等稱呼時應(yīng)當(dāng)進行嚴謹?shù)膶嶒炞C明使用的“exosomes樣品”是由胞內(nèi)體途徑產(chǎn)生的。小和同學(xué):都是細胞外囊泡,外泌體和微囊泡有啥區(qū)別?小光老師:外泌體和微囊泡的區(qū)別在于其生成的...
外泌體的提取方法:1、磁珠免疫法。外泌體表面有其特異性標記物(如CD63、CD9蛋白),用包被抗標記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合,即可將外泌體吸附并分離出來。磁珠法具有特異性高、操作簡便、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點,但是效率低,外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響,不利于下游實驗,難以普遍普及。2、多聚物沉淀法。聚乙二醇(PEG)為常用的多聚物,可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀,早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒,現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體,其原理可能與競爭性結(jié)合游離水分子有關(guān)。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題:比如純度和回收率低,雜蛋白較多(假陽性),顆粒大小不均一,產(chǎn)生難以去除的聚合物,機...
外泌體的提取分離:1、超速離心法(差速離心)。超離法是常用的外泌體純化手段,采用低速離心、高速離心交替進行(如圖所示),可分離到大小相近的囊泡顆粒。超離法因操作簡單,獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎,但過程比較費時,且回收率不穩(wěn)定(可能與轉(zhuǎn)子類型有關(guān)),純度也受到質(zhì)疑;此外,重復(fù)離心操作還有可能對囊泡造成損害,從而降低其質(zhì)量。2、密度梯度離心。在超速離心力作用下,使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層,是一種區(qū)帶分離法。通過密度梯度離心,樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集。此法獲得的外泌體純度較高,但步驟繁瑣,耗時。外泌體提取:基于聚合物的沉淀技術(shù)。太原外泌體提取試劑哪家...
外泌體的生物學(xué)功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒,而傳統(tǒng)超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。李記生物自主開發(fā)的外泌體快速提取試劑盒,組分經(jīng)過優(yōu)化處理,適用于細胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、尿液及其他體液(腦脊液、腹水、羊水、乳汁以及唾液等)中的外泌體提取,并搭配純化過濾裝置,可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒。注意事項:1.對于待測樣品粘度過大時,可將樣本用4℃預(yù)冷的1×PBS緩沖液進行等體積稀釋處理。2.當(dāng)血清、血漿、唾液等樣品收獲的外泌體濃度較高,收獲的外泌體顆粒無法通過EPF柱純化時,可用4℃預(yù)冷的1×PBS進行稀釋后再通過EPF柱離心。3.針對外泌體標志蛋白(CD63,CD9,CD...
外泌體,是一種能被大多數(shù)細胞分泌的微小膜泡,具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),直徑大約40-100nm。盡管外泌體較初在1983年就被發(fā)現(xiàn),但人們一直認為它只是一種細胞的廢棄物。然而較近幾年,人們發(fā)現(xiàn)這種微小膜泡中含有細胞特異的蛋白、脂質(zhì)和核酸,能作為信號分子傳遞給其他細胞從而改變其他細胞的功能。這些發(fā)現(xiàn)點燃了人們對細胞分泌膜泡的興趣。較近的研究發(fā)現(xiàn)外泌體在很多生理病理上起著重要的作用,如免疫中抗原呈遞、一些病癥的生長與遷移、組織損傷的修復(fù)等。不同細胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,可作為疾病診斷的生物標志物。外泌體(Exosome)發(fā)現(xiàn)于1986年,是一種直徑約30~100nm的雙層膜囊泡狀結(jié)構(gòu)小體...
外泌體與神經(jīng)退行性疾?。和饷隗w可能促進或限制大腦中未折疊和異常折疊的蛋白質(zhì)的聚集。AD病人腦脊液外泌體中均可檢測到Tau和Aβ蛋白。類似的現(xiàn)象也在PD和ALS疾病中發(fā)現(xiàn)。PD病人腦脊液外泌體可檢測到α-synuclein,ALS病人外泌體中也可以檢測到SOD1或TDP-43。外泌體與疾病診斷(應(yīng)用潛能):外泌體生成機制表明,通過分析外泌體的組分,可以幫助識別其來源的細胞類型。這一特性已被應(yīng)用于開發(fā)心血管疾病,神經(jīng)系統(tǒng)疾病和一些病癥的分子診斷方法,也在肝腎肺相關(guān)疾病中進行研發(fā)測試。將沉淀物用PBS緩沖液進行懸浮,使外泌體懸浮于液體上層外泌體提?。河眠@種聚合物沉淀具有許多優(yōu)點,包括對分離的外泌體影...
外泌體相關(guān)miRNA與肺病的診斷:miRNAs是一類含有20~25個核苷酸的非編碼小RNA,能夠通過下調(diào)或壓制靶mRNAs來調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄水平上的基因表達,目前非編碼RNA被普遍發(fā)現(xiàn)存在于NSCLC患者外泌體中,參與一些病癥的形成和演化過程。單個miRNA可能通過壓制性復(fù)合物與多個mRNA結(jié)合,從而阻滯整個生物通路。因此,外泌體的miRNA具有成為NSCLC標志物的優(yōu)勢。Chen等在152例肺病患者的研究中初次報道了循環(huán)游離miRNA的表達,與75例健康者相比,發(fā)現(xiàn)了兩種高表達的miRNA(miR-25和miR-223)。Rabinonowits等對27例肺病患者和9例健康人的血漿外泌體中12個mi...
作為一種分子通斷開關(guān)的KRAS發(fā)生突變時會處于“開啟”狀態(tài)。在80%~95%的胰腺導(dǎo)管腺病(PDAC)當(dāng)中,這個基因發(fā)生突變,這也是這種一些疾病中較為常見的突變。這些研究人員證實iExosome能夠運送特異性地靶向KRAS的siRNA和shRNA分子,并且比他們的合成對應(yīng)物脂質(zhì)體(liposome)更加高效。脂質(zhì)體不具有外泌體表現(xiàn)出的天然復(fù)雜性和優(yōu)勢。德州大學(xué)MD安德森一些疾病中心一些疾病生物學(xué)助理教授ValerieLeBleu博士說,“我們的研究提示著與脂質(zhì)體相比,外泌體表現(xiàn)出運送siRNA分子和壓制侵襲性胰腺瘤生長的優(yōu)異能力。我們也證實外泌體表面上的CD47存在允許它們躲避來自循環(huán)單核細胞...
功能:當(dāng)外泌體在1980年初次被發(fā)現(xiàn)后,其被認為是細胞排泄廢物的一種方式,如今隨著大量對其生物來源、其物質(zhì)構(gòu)成及運輸、細胞間信號的傳導(dǎo)以及在體液中的分布的研究發(fā)現(xiàn)外泌體具有多種多樣的功能。外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型,其可參與到機體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化、一些病癥侵襲等方方面面。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細胞與基底細胞的遺傳信息的交換,從而導(dǎo)致大量新生血管的生成,促進了一些病癥的生長與侵襲。也可以作為治病手段,未來有可能作為藥物的天然載體用于臨床治病。杭州正規(guī)外泌體提取試劑哪家便宜外泌體與肺病預(yù)后:外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認為是NSCLC的預(yù)后因子...
外泌體(exosomes,Exos)是細胞分泌的一種膜囊泡,因其可以將供體細胞的信息通過其攜帶的蛋白質(zhì)、mRNA、miRNA等傳遞到受體細胞,實現(xiàn)細胞之間的信息交流及物質(zhì)交換,并且可以作為藥物載體轉(zhuǎn)運藥物而引起科學(xué)家的普遍關(guān)注(Fig1)。外泌體作為內(nèi)源性的天然藥物載體有著獨特的優(yōu)勢,表面由脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成,使其可以穿透許多生物膜,提高藥物的運輸效率和靶向性,可以穩(wěn)定存在于血液中,納米級尺寸明顯增強藥物在瘤部位的滲透滯留效應(yīng)(permeabilityandretentioneffect,EPR)。目前,許多抗藥物、基因藥物及藥物均被成功載入外泌體。但是由于沒有較好的外泌體分離純化和載藥的方法,...
外泌體的生物學(xué)功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒,而傳統(tǒng)超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。李記生物自主開發(fā)的外泌體快速提取試劑盒,組分經(jīng)過優(yōu)化處理,適用于細胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、尿液及其他體液(腦脊液、腹水、羊水、乳汁以及唾液等)中的外泌體提取,并搭配純化過濾裝置,可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒。注意事項:1.對于待測樣品粘度過大時,可將樣本用4℃預(yù)冷的1×PBS緩沖液進行等體積稀釋處理。2.當(dāng)血清、血漿、唾液等樣品收獲的外泌體濃度較高,收獲的外泌體顆粒無法通過EPF柱純化時,可用4℃預(yù)冷的1×PBS進行稀釋后再通過EPF柱離心。3.針對外泌體標志蛋白(CD63,CD9,CD...
外泌體:該研究主要是做了牡蠣基因組測序,并揭示其應(yīng)激適應(yīng)和殼結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性。其中涉及,所鑒定的259種殼蛋白中的84%不是經(jīng)典分泌蛋白;它們可能是細胞的一部分或被外泌體沉積而來。259個殼蛋白中的61個與外泌體數(shù)據(jù)庫中的蛋白質(zhì)匹配,支持了外泌體的存在。在礦化前緣處觀察到含有方解石晶體的細胞和外泌體樣囊泡,盡管它們在殼形成中的重要性是有爭議的。這項研究為它們在殼內(nèi)的存在及其可能參與殼形成提供了分子證據(jù)。Hedgehog(Hh)蛋白的保守家族作為短距離和長距離分泌的形態(tài)發(fā)生素,在胚胎發(fā)育過程中控制組織構(gòu)型和分化。成熟的Hh攜帶疏水性棕櫚酸和對其細胞外擴散至關(guān)重要的膽固醇修飾。外泌體提?。夯诰酆衔锏?..
外泌體在肺病進程中的作用:肺病細胞來源外泌體(LCC-exosome)可以通過刺激一些病癥血管的形成來促進一些病癥的生長。據(jù)相關(guān)報道稱,LCC-exosome中的miR-210可以通過調(diào)節(jié)基質(zhì)細胞中酪氨酸受體激酶A3的含量,促進一些病癥血管的生成;而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過啟動脯氨酰羥化酶及壓制緊密結(jié)合蛋白ZO-1來促進肺病的生血管作用。此外,有研究發(fā)現(xiàn),外泌體中的內(nèi)容物可以觸發(fā)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達增加,促使人正常支氣管上皮細胞出現(xiàn)EMT,從而使肺支氣管正常上皮細胞出現(xiàn)增殖,遷移能力。色譜法。這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小...
外泌體的提取、分離方法:開發(fā)高效、快速、穩(wěn)定,并且保持外泌體結(jié)構(gòu)和生物功能完整性的方法,是目前外泌體應(yīng)用于臨床的基礎(chǔ)和前提。從細胞上清和體液中提取分離外泌體的方法很多,但是外泌體的純度和產(chǎn)量卻和分離方法息息相關(guān)。通常分離步驟少、產(chǎn)率高,但是純度會受到影響。鑒于每種分離方法都有其優(yōu)缺點,實驗可以根據(jù)樣本來源、下游實驗?zāi)康牡?,選擇合適的外泌體分離方法。2015年,國際囊泡組織(InternationSocietyforExtracelluarVesicles,ISEV)指出,簡單依靠一種分離方法得到的外泌體的純度和產(chǎn)量都難滿足實驗的需求。因此,推薦聯(lián)合使用各種方法,從而得到高純度和高產(chǎn)量的外泌體。...
Exosome,中文名外泌體,是一種能被大多數(shù)細胞分泌的微小膜泡,具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),直徑大約40-100nm。盡管外泌體較初在1983年就被發(fā)現(xiàn),但人們一直認為它只是一種細胞的廢棄物。然而較近幾年,人們發(fā)現(xiàn)這種微小膜泡中含有細胞特異的蛋白、脂質(zhì)和核酸,能作為信號分子傳遞給其他細胞從而改變其他細胞的功能。這些發(fā)現(xiàn)點燃了人們對細胞分泌膜泡的興趣。較近的研究發(fā)現(xiàn)外泌體在很多生理病理上起著重要的作用,如免疫中抗原呈遞、一些病癥的生長與遷移、組織損傷的修復(fù)等。不同細胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,可作為疾病診斷的生物標志物。外泌體具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),能很好的保護其包被的物質(zhì),且能靶向特定細胞或...
外泌體是細胞間進行物質(zhì)運輸和信息交流的重要工具,可以通過調(diào)節(jié)免疫功能促進一些病癥的增殖,血管新生和一些病癥轉(zhuǎn)移。與細菌傳染,幫助細菌逃避免疫關(guān)系很大,并與心血管疾病,老年癡呆等疾病具有密切關(guān)系。外泌體可通過流式、WB(檢測指標有CD9,CD63,CD81)、電鏡觀察、NTA粒徑追蹤等手段檢測,普遍應(yīng)用于藥物載體、疾病診斷marker、精細醫(yī)療、一些病癥治病等方面研究。由于外泌體直徑小,樣本含量低,提取十分困難。已有的外泌體分離方式有密度梯度離心、超濾離心法、免疫磁珠抗體捕獲、商用試劑盒等。但到目前為止,仍沒有一種提取方法能同時保證外泌體的含量、純度以及生物活性。外泌體提取:基于聚合物的沉淀技術(shù)...
外泌體的生物學(xué)功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒,而傳統(tǒng)超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。李記生物自主開發(fā)的外泌體快速提取試劑盒,組分經(jīng)過優(yōu)化處理,適用于細胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、尿液及其他體液(腦脊液、腹水、羊水、乳汁以及唾液等)中的外泌體提取,并搭配純化過濾裝置,可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒。注意事項:1.對于待測樣品粘度過大時,可將樣本用4℃預(yù)冷的1×PBS緩沖液進行等體積稀釋處理。2.當(dāng)血清、血漿、唾液等樣品收獲的外泌體濃度較高,收獲的外泌體顆粒無法通過EPF柱純化時,可用4℃預(yù)冷的1×PBS進行稀釋后再通過EPF柱離心。使用PBS對膜進行洗脫即得到外泌體濃縮液。石家...
外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型,其可參與到機體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化、一些病癥侵襲等方方面面。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細胞與基底細胞的遺傳信息的交換,從而導(dǎo)致大量新生血管的生成,促進了一些病癥的生長與侵襲。功能:當(dāng)外泌體在1980年初次被發(fā)現(xiàn)后,其被認為是細胞排泄廢物的一種方式,如今隨著大量對其生物來源、其物質(zhì)構(gòu)成及運輸、細胞間信號的傳導(dǎo)以及在體液中的分布的研究發(fā)現(xiàn)外泌體具有多種多樣的功能。逐漸取代超速離心法并推廣開來。有些試劑盒操作簡便,不用超速離心。金華正規(guī)外泌體提取試劑哪里買外泌體:該研究主要是做了牡蠣基因組測序,并揭示其應(yīng)激適應(yīng)和殼結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性...
外泌體(Exosomes)是細胞分泌到胞外的一種囊泡(ExtracellularVesicles,EVs),其大小為30-150nm,具有雙層膜結(jié)構(gòu)和茶托狀形態(tài),含有豐富的內(nèi)含物(包括核酸、蛋白和脂質(zhì)等),參與細胞間的分子傳遞。外泌體普遍存在于細胞培養(yǎng)上清以及各種體液中,包括血液、唾液、尿液、乳汁等,同時也存在于組織樣本中,如腦組織、肌肉組織、脂肪組織等。腦組織分離方法簡述:將腦組織剪成薄片,放入離心管中加上消化液進行消化,經(jīng)水浴、反復(fù)輕輕上下顛倒,再用移液間斷緩慢吹吸至消化結(jié)束。隨后加入培養(yǎng)基于消化液中,混勻,置于冰上。再進行一系列的差速超速離心過程,包括除雜、濾膜過濾、超離等。較后用PBS...