上海翼和公司利用熒光PCR擴(kuò)增小鼠基因組中9個(gè)STR基因位點(diǎn),PCR產(chǎn)物在毛細(xì)管電泳分離之后可通過(guò)熒光檢測(cè)進(jìn)行基因分型。根據(jù)所得的STR分型結(jié)果與細(xì)胞STR數(shù)據(jù)庫(kù)(EXPASY)比對(duì),從而鑒定樣品所屬的小鼠細(xì)胞系。2017年4月,翼和客戶(hù)山東泰山醫(yī)學(xué)院免疫所發(fā)表了EBioMedicine上的一篇論文,該文中編輯要求對(duì)突變小鼠的遺傳背景進(jìn)行鑒定,翼和公司應(yīng)用基于多重PCR與二代測(cè)序的近交系小鼠檢測(cè)方案2.0版本方案,成功的對(duì)基因編輯小鼠進(jìn)行了測(cè)試,并對(duì)小鼠遺傳背景進(jìn)行了STR鑒定,雜志編輯成功接受。為什么要進(jìn)行細(xì)胞系鑒定?北京STR鑒定機(jī)構(gòu)
如果細(xì)胞系沒(méi)有在數(shù)據(jù)庫(kù)中比對(duì)出結(jié)果怎么辦?如果已知數(shù)據(jù)庫(kù)中沒(méi)有找到你的細(xì)胞信息,你可以用自己的細(xì)胞遺傳信息建立自己的遺傳特性,以便后期進(jìn)行自己細(xì)胞庫(kù)的比對(duì)。細(xì)胞系交叉污染或錯(cuò)誤鑒定對(duì)研究是否有影響?答案是肯定的。使用錯(cuò)誤的細(xì)胞系或者是被污染的細(xì)胞系做研究,只會(huì)造成時(shí)間,金錢(qián)和精力的損失,以及造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不一致和不可重復(fù)。因此如果用被污染或錯(cuò)誤的細(xì)胞系做研究,在發(fā)表文章或做進(jìn)一步研究時(shí)極有可能需要用正確的細(xì)胞再重復(fù)實(shí)驗(yàn)。小鼠STR鑒定ATCC細(xì)胞系被鑒定出發(fā)生交叉污染或錯(cuò)誤標(biāo)記,則需要拿更早代數(shù)的細(xì)胞進(jìn)行鑒定。
小師弟:如何根據(jù)細(xì)胞STR鑒定結(jié)果判斷細(xì)胞系是否發(fā)生了交叉污染?如果存在細(xì)胞系之間發(fā)生交叉污染,而且鑒定用的細(xì)胞可能有兩種以上的細(xì)胞系時(shí),那么在進(jìn)行STR位點(diǎn)檢測(cè)的時(shí)候,多個(gè)位點(diǎn)會(huì)出現(xiàn)兩個(gè)以上的峰。峰高值表示該等位基因的信號(hào)強(qiáng)度,理論上峰值與樣本的DNA濃度有直接的關(guān)系。因此,存在交叉污染的混合細(xì)胞系中,其中一個(gè)位點(diǎn)中某些峰會(huì)明顯高于其他的峰,其中大峰是屬于混合細(xì)胞系中那個(gè)主要細(xì)胞系,而小峰則屬于那個(gè)次要細(xì)胞系。
翼和送樣要求有以下幾點(diǎn): 1.細(xì)胞上清:在無(wú)抗生su及其它抑菌或滅菌物質(zhì)條件下培養(yǎng)3天,取1.0ml 細(xì)胞培養(yǎng)上清液移至2ml離心管中,請(qǐng)加冰袋運(yùn)輸。2.細(xì)胞沉淀:在無(wú)抗生su及其它抑菌或滅菌物質(zhì)條件下培養(yǎng)3天,取1.0ml 細(xì)胞培養(yǎng)上清液移至2ml 離心管中。將上清液移入無(wú)菌離心管以15,000-20,000g 速度離心10 分鐘,移除上清液,保留離心沉淀物(若貼壁細(xì)胞,使用細(xì)胞刮刮取細(xì)胞,吸取轉(zhuǎn)移至1.5ml離心管,12000rpm離心沉淀細(xì)胞),請(qǐng)加冰袋運(yùn)輸。存在細(xì)胞系之間發(fā)生交叉污染,在進(jìn)行STR位點(diǎn)檢測(cè)的時(shí)候,多個(gè)位點(diǎn)會(huì)出現(xiàn)兩個(gè)以上的峰。
上海翼和公司為客戶(hù)提供基于qPCR技術(shù)的種系鑒定方案,選擇人、小鼠、大鼠和倉(cāng)鼠基因組中特異基因片段,設(shè)計(jì)引物和熒光探針,快速鑒定種系來(lái)源。該方案靈敏度和特異性高,可以檢測(cè)樣本中不同種系來(lái)源的細(xì)胞污染,當(dāng)污染細(xì)胞占比> 5% 時(shí),可被穩(wěn)定檢出。在PCR反應(yīng)中,除了正向引物和反向引物外,還引入了第三個(gè)寡核苷酸序列,這是一個(gè)重大的進(jìn)展。這個(gè)額外的序列,就是探針(Probe),它彌補(bǔ)了DNA結(jié)合染料的缺點(diǎn)。探針上有熒光修飾基團(tuán),可產(chǎn)生熒光信號(hào)。如何提供細(xì)胞系鑒定樣本?廣州小鼠STR鑒定公司
建干細(xì)胞系并做規(guī)定項(xiàng)目的鑒定,顯然是快速發(fā)表論文的一種方式,是廣大醫(yī)生朋友喜聞樂(lè)見(jiàn)的。北京STR鑒定機(jī)構(gòu)
《Stem Cell Research》是專(zhuān)門(mén)刊登干細(xì)胞生物學(xué)與應(yīng)用的雜志,關(guān)注干細(xì)胞多能性機(jī)制與新建立的干細(xì)胞系,當(dāng)前影響因子接近4.0。該雜志有Research paper, Short communications, Reviews, Technical notes與Lab resource等五大板塊,其中Lab resource目前看起來(lái)是比較容易被收錄的,主要收錄新建立的多能干細(xì)胞系?!禨tem Cell Research》雜志于2019年進(jìn)入上海翼和生物的視野,并剛過(guò)半年,連續(xù)有六篇上海翼和公司協(xié)助干細(xì)胞鑒定的論文登上該雜志。北京STR鑒定機(jī)構(gòu)
上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司主要經(jīng)營(yíng)范圍是醫(yī)藥健康,擁有一支專(zhuān)業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)和良好的市場(chǎng)口碑。公司業(yè)務(wù)涵蓋細(xì)胞組織小鼠質(zhì)控,大健康檢測(cè),生物技術(shù)服務(wù)等,價(jià)格合理,品質(zhì)有保證。公司秉持誠(chéng)信為本的經(jīng)營(yíng)理念,在醫(yī)藥健康深耕多年,以技術(shù)為先導(dǎo),以自主產(chǎn)品為重點(diǎn),發(fā)揮人才優(yōu)勢(shì),打造醫(yī)藥健康良好品牌。在社會(huì)各界的鼎力支持下,持續(xù)創(chuàng)新,不斷鑄造***服務(wù)體驗(yàn),為客戶(hù)成功提供堅(jiān)實(shí)有力的支持。