什么時(shí)候需細(xì)胞系鑒定?(1)當(dāng)建立或獲得一個(gè)新的細(xì)胞系時(shí)(2)一個(gè)涉及到細(xì)胞試驗(yàn)項(xiàng)目開(kāi)始/結(jié)束時(shí)(3)在細(xì)胞凍存之前,或細(xì)胞已連續(xù)培養(yǎng)2~3個(gè)月時(shí)(4)發(fā)表文章或申請(qǐng)課題經(jīng)費(fèi)前(5)細(xì)胞系表現(xiàn)不穩(wěn)定或結(jié)果與預(yù)期差別較大時(shí)(6)當(dāng)實(shí)驗(yàn)室使用超過(guò)一種細(xì)胞系時(shí),所有細(xì)胞系比較好先鑒定以排除交叉污染的可能。如何提供鑒定樣本?每種細(xì)胞需單獨(dú)收集在1.5ml離心管中,細(xì)胞數(shù)目不少于 106個(gè)。細(xì)胞需要離心沉淀,并且以PBS清洗盡可能去除上清培養(yǎng)基,沉淀沉淀進(jìn)行冰凍保存與寄送。為什么要進(jìn)行細(xì)胞系鑒定?鄭州小鼠細(xì)胞STR鑒定
為什么要做支原體污染檢測(cè)?在細(xì)胞研究領(lǐng)域,支原體是臭名昭著的污染源,許多實(shí)驗(yàn)室都深受其害。支原體傳染能在不知不覺(jué)中干擾研究結(jié)果,浪費(fèi)大量的資金投入。研究表明,95%以上污染細(xì)胞的支原體屬于以下四種類型:口腔支原體(M.orale)、精氨酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無(wú)膽甾原體(A.laidlawii,此種支原體為牛源性)。這是四種比較常見(jiàn)的污染細(xì)胞的支原體菌群,但實(shí)際中能夠污染細(xì)胞的支原體的種類是很多的。國(guó)外的調(diào)查證明,有二十多種支原體可以污染細(xì)胞,并且有的細(xì)胞可以同時(shí)被兩種以上的支原體污染。小鼠細(xì)胞STR鑒定標(biāo)準(zhǔn)討論細(xì)胞系鑒定的必要性與重要性,并且越來(lái)越多的的期刊要求文章發(fā)表前、需提供細(xì)胞鑒定數(shù)據(jù)。
翼和采用DSMZ tools進(jìn)行細(xì)胞系比對(duì),其中包含來(lái)自于ATCC, DSMZ, JCRB 和 RIKEN數(shù)據(jù)庫(kù)的2455個(gè)細(xì)胞系STR數(shù)據(jù)。如果待檢測(cè)細(xì)胞未收錄于以上細(xì)胞庫(kù)或這是自行建立的新細(xì)胞系將無(wú)法進(jìn)行比對(duì),用戶需根據(jù)細(xì)胞分型結(jié)果自行與其他數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì)。翼和提供的專業(yè)STR鑒定結(jié)題報(bào)告包括:細(xì)胞身份驗(yàn)證報(bào)告、STR等位基因表、電泳圖、結(jié)果的解釋與數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)結(jié)果。就這一服務(wù)本身而言,是非常專業(yè)的!上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司是一家專門從事分子遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù)的公司。
什么細(xì)胞極為容易污染別的細(xì)胞?翼和為大家介紹,Hela細(xì)胞。因?yàn)樗L(zhǎng)得快、長(zhǎng)得好嘛。當(dāng)你發(fā)現(xiàn)自己的一個(gè)培養(yǎng)瓶里的細(xì)胞突然長(zhǎng)得很好,而以后都用它傳代做實(shí)驗(yàn)的話,十之八九是搞錯(cuò)了。 有哪些細(xì)胞曾被Hela污染?lnt-407、HEp-2、WISH等一百余種。如何進(jìn)行細(xì)胞系鑒定?細(xì)胞系鑒定目前主要基于國(guó)際身份認(rèn)證委員會(huì)的標(biāo)準(zhǔn)。依據(jù)該標(biāo)準(zhǔn),可以通過(guò)多重?zé)晒釶CR技術(shù),對(duì)人源8個(gè)STR位點(diǎn)以及1個(gè)性別決定位點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè)。下表為這些位點(diǎn)的具體的遺傳信息。本文購(gòu)自ATCC等機(jī)構(gòu)的細(xì)胞(如SW480,HCT116, FET細(xì)胞系等),均全部由上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司鑒定。
在一切由細(xì)胞身份開(kāi)始說(shuō)起一文中,小E已經(jīng)為大家羅列出目前已經(jīng)確定被Hela細(xì)胞污染的細(xì)胞系名稱。做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的伙伴們可以翻閱一下,以防自己的細(xì)胞也在其中!還不僅只如此,這些常見(jiàn)的細(xì)胞系除了發(fā)現(xiàn)種屬內(nèi)的交叉污染/錯(cuò)誤鑒定,還有部分細(xì)胞系被發(fā)現(xiàn)連種屬都被錯(cuò)誤鑒定了!被鑒定的278株細(xì)胞系中,有20株(20/278=7.2%)細(xì)胞系PCR擴(kuò)增失敗,證明其并非人源細(xì)胞。作者繼續(xù)追蹤實(shí)驗(yàn),通過(guò)種屬鑒定來(lái)確認(rèn)其真實(shí)來(lái)源,結(jié)果其中2株細(xì)胞系被證實(shí)分別來(lái)源于大鼠。什么時(shí)候需細(xì)胞系鑒定?江蘇細(xì)胞STR鑒定標(biāo)準(zhǔn)
翼和生物人源細(xì)胞鑒定包含哪些結(jié)果?鄭州小鼠細(xì)胞STR鑒定
STR基因位點(diǎn)由長(zhǎng)度為3~7個(gè)堿基對(duì)的短串連重復(fù)序列組成,這些重復(fù)序列普遍存在于人類基因組中,可作為高度多態(tài)性標(biāo)記,被稱為細(xì)胞的DNA指紋,其可通過(guò)PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))來(lái)檢測(cè)。STR基因座位上的等位基因可通過(guò)擴(kuò)增區(qū)域內(nèi)重復(fù)序列的拷貝數(shù)的不同來(lái)區(qū)分,在毛細(xì)管電泳分離之后可通過(guò)熒光檢測(cè)來(lái)識(shí)別。隨后通過(guò)一定的計(jì)算方法,即可根據(jù)所得的STR分型結(jié)果與專業(yè)的細(xì)胞STR數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)從而推算出樣品所屬的細(xì)胞系或可能的交叉污染的細(xì)胞系名稱。鄭州小鼠細(xì)胞STR鑒定
上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司主要經(jīng)營(yíng)范圍是醫(yī)藥健康,擁有一支專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)和良好的市場(chǎng)口碑。公司業(yè)務(wù)涵蓋細(xì)胞組織小鼠質(zhì)控,大健康檢測(cè),生物技術(shù)服務(wù)等,價(jià)格合理,品質(zhì)有保證。公司秉持誠(chéng)信為本的經(jīng)營(yíng)理念,在醫(yī)藥健康深耕多年,以技術(shù)為先導(dǎo),以自主產(chǎn)品為重點(diǎn),發(fā)揮人才優(yōu)勢(shì),打造醫(yī)藥健康良好品牌。在社會(huì)各界的鼎力支持下,持續(xù)創(chuàng)新,不斷鑄造高品質(zhì)服務(wù)體驗(yàn),為客戶成功提供堅(jiān)實(shí)有力的支持。