如何知道細(xì)胞系是否發(fā)生交叉污染了?如果存在細(xì)胞系之間發(fā)生交叉污染,而且鑒定用的細(xì)胞可能有兩種以上的細(xì)胞系時(shí),那么在進(jìn)行STR位點(diǎn)檢測的時(shí)候,多個(gè)位點(diǎn)會出現(xiàn)兩個(gè)以上的峰。峰高值表示該等位基因的信號強(qiáng)度,理論上峰值與樣本的DNA濃度有直接的關(guān)系。因此,存在交叉污染的混合細(xì)胞系中,其中一個(gè)位點(diǎn)中某些峰會明顯高于其他的峰,其中大峰是屬于混合細(xì)胞系中那個(gè)主要細(xì)胞系,而小峰則屬于那個(gè)次要細(xì)胞系。STR鑒定目前已被ICLAC、ATCC等機(jī)構(gòu)作為金標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用于細(xì)胞鑒定,越來越多的雜志要求在投稿時(shí)提供細(xì)胞STR分型數(shù)據(jù)。細(xì)胞系鑒定目前主要基于國際身份認(rèn)證委員會的標(biāo)準(zhǔn)。江蘇小鼠細(xì)胞STR鑒定哪里好
全球因?yàn)榧?xì)胞系用錯浪費(fèi)了多少錢?據(jù)不完全統(tǒng)計(jì),只就HEp-2與Int-407這兩株細(xì)胞(它們實(shí)際上是Hela),直接浪費(fèi)的投入是7億美金,間接浪費(fèi)了7億美金。因?yàn)橛缅e細(xì)胞,產(chǎn)生了多少垃圾文章?據(jù)不完全統(tǒng)計(jì),只就HEp-2與Int-407這兩株細(xì)胞(它們實(shí)際上是Hela),前者發(fā)表了近6000篇SCI(17萬次引用),后者發(fā)表了近1400篇SCI。都是垃圾文章。用錯細(xì)胞時(shí)間極為長的持續(xù)了多少時(shí)間?瑞典有一個(gè)科學(xué)家,在三十年的時(shí)間里都以為自己的細(xì)胞是正確的,直到做了細(xì)胞鑒定之后發(fā)現(xiàn)是錯誤的。越早發(fā)現(xiàn)錯誤越好,鑒定之后是正確的話,自己也放心。鄭州細(xì)胞STR鑒定位點(diǎn)細(xì)胞系被鑒定出發(fā)生交叉污染或錯誤標(biāo)記,則需要拿更早代數(shù)的細(xì)胞進(jìn)行鑒定。
國內(nèi)實(shí)驗(yàn)動物遺傳質(zhì)量檢測現(xiàn)狀?反觀國內(nèi),遺傳質(zhì)量檢測的研究多處于較低水平,其中以STR為遺傳標(biāo)記有10多篇、以RAPD標(biāo)記或DNA指紋圖譜有9篇,固相雜交的有2篇,以SNP標(biāo)記只有2篇,表明我國各小鼠飼養(yǎng)單位對于DNA遺傳質(zhì)量檢測方法的掌握較為薄弱,無論在技術(shù)上還是人才儲備上均落后于世界其他國家。因此,在國內(nèi)要推廣使用實(shí)驗(yàn)小鼠DNA遺傳質(zhì)量檢測,一套行之有效的SNP遺傳監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)亟待建立與規(guī)范。第1,國內(nèi)實(shí)驗(yàn)動物公司的近交系與Jackson Lab數(shù)據(jù)不符。無論是從翼和公司檢測結(jié)果,還是合作對方發(fā)表論文顯示,國內(nèi)實(shí)驗(yàn)動物存在與Jackson Lab標(biāo)準(zhǔn)近交系小鼠基因型不符合的現(xiàn)象。
上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司作為一家專門從事分子遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù)的公司,提供專業(yè)的細(xì)胞鑒定服務(wù),為了進(jìn)一步提高鑒定的分辨率,我們除了包含ATCC檢測的8個(gè)STR和1個(gè)性別決定位點(diǎn)Amelogenin外,另新增了12個(gè)高度多態(tài)性位點(diǎn)。ATCC在2010年的Nature Review上說,我們應(yīng)該紀(jì)念一位偉大的科學(xué)家,叫Nelso-Rees。他以染色體核型分析來鑒定細(xì)胞,并為此承包了美國國家研究院的細(xì)胞庫。當(dāng)他多年來一直提醒科學(xué)家用錯細(xì)胞的時(shí)候,結(jié)果被NIH開了。為什么呢,科學(xué)家一直在發(fā)表論文,承認(rèn)錯誤科學(xué)生涯就完了(學(xué)術(shù)界的人很可憐,只有兩個(gè)結(jié)局:Publish or Perish)。依據(jù)該標(biāo)準(zhǔn),可以通過多重?zé)晒釶CR技術(shù),對人源8個(gè)STR位點(diǎn)以及1個(gè)性別決定位點(diǎn)進(jìn)行檢測。
小師弟:如何根據(jù)STR數(shù)據(jù)判斷細(xì)胞系的身份?收到細(xì)胞系鑒定結(jié)果以及STR信息,可以與參考數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對。如果細(xì)胞樣本的每個(gè)STR位點(diǎn)和參考細(xì)胞STR位點(diǎn)都能重合匹配,即說明該細(xì)胞系正確,反之則說明你的細(xì)胞系可能被錯誤標(biāo)記,交叉污染或發(fā)生遺傳不穩(wěn)定。一般說來,匹配度≥80%即可認(rèn)為該細(xì)胞系正確,匹配度<80%則說明該細(xì)胞系的來源需要被懷疑。如果細(xì)胞系被鑒定出發(fā)生交叉污染或錯誤標(biāo)記,則需要拿更早代數(shù)的細(xì)胞進(jìn)行鑒定,從而找到問題的起源或者直接從可靠的機(jī)構(gòu)購買一株新的細(xì)胞系。常見的細(xì)胞系除了發(fā)現(xiàn)種屬內(nèi)的交叉污染/錯誤鑒定,還有部分細(xì)胞系被發(fā)現(xiàn)連種屬都被錯誤鑒定了!蘇州小鼠細(xì)胞STR鑒定機(jī)構(gòu)
細(xì)胞STR鑒定助力論文發(fā)表Cancer Research。江蘇小鼠細(xì)胞STR鑒定哪里好
上海翼和公司為客戶提供基于qPCR技術(shù)的種系鑒定方案,選擇人、小鼠、大鼠和倉鼠基因組中特異基因片段,設(shè)計(jì)引物和熒光探針,快速鑒定種系來源。該方案靈敏度和特異性高,可以檢測樣本中不同種系來源的細(xì)胞污染,當(dāng)污染細(xì)胞占比> 5% 時(shí),可被穩(wěn)定檢出。在PCR反應(yīng)中,除了正向引物和反向引物外,還引入了第三個(gè)寡核苷酸序列,這是一個(gè)重大的進(jìn)展。這個(gè)額外的序列,就是探針(Probe),它彌補(bǔ)了DNA結(jié)合染料的缺點(diǎn)。探針上有熒光修飾基團(tuán),可產(chǎn)生熒光信號。江蘇小鼠細(xì)胞STR鑒定哪里好
上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司專注技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)品研發(fā),發(fā)展規(guī)模團(tuán)隊(duì)不斷壯大。一批專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì),是實(shí)現(xiàn)企業(yè)戰(zhàn)略目標(biāo)的基礎(chǔ),是企業(yè)持續(xù)發(fā)展的動力。誠實(shí)、守信是對企業(yè)的經(jīng)營要求,也是我們做人的基本準(zhǔn)則。公司致力于打造高品質(zhì)的細(xì)胞組織小鼠質(zhì)控,大健康檢測,生物技術(shù)服務(wù)。公司憑著雄厚的技術(shù)力量、飽滿的工作態(tài)度、扎實(shí)的工作作風(fēng)、良好的職業(yè)道德,樹立了良好的細(xì)胞組織小鼠質(zhì)控,大健康檢測,生物技術(shù)服務(wù)形象,贏得了社會各界的信任和認(rèn)可。