相信大家都聽過或已經(jīng)接觸過一些常用的分型方法,如片段長度多態(tài)性(限制性內(nèi)切酶)法,直接測序法,Taqman熒光探針法,LDR連接酶檢測反應(yīng)法,競爭性等位基因特異性PCR法(KASP),二代測序法等,小E就針對以上幾種常用分型方法為大家做一個介紹和總結(jié)。上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限上海翼和專家團隊富有開創(chuàng)精神,朝氣蓬勃,在肖君華博士的帶領(lǐng)下,秉承“專業(yè)、協(xié)作、進取”的企業(yè)精神,為科研用戶提供性價比高、高質(zhì)量可靠的遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù)和產(chǎn)品。對于候選SNP的遴選,有很多種考慮,總的趨勢和出發(fā)點是能夠涵蓋的SNP越多越好。江蘇微衛(wèi)星標記strSNP分型
我們利用多重PCR+二代測序技術(shù)為各專業(yè)用戶提供大規(guī)模的SNP分型,目標區(qū)段的重測序,目標區(qū)段甲基化測序。我們服務(wù)過的高質(zhì)量客戶包括:復(fù)旦大學(xué)金力院士團隊、上海交通大學(xué)賀林院士團隊和中科院韓斌院士團隊。上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司總公司(地址):上海市松江區(qū)龍騰路1015弄中星創(chuàng)意園2號502上海翼和專家團隊富有開創(chuàng)精神,朝氣蓬勃,在肖君華博士的帶領(lǐng)下,秉承“專業(yè)、協(xié)作、進取”的企業(yè)精神,為科研用戶提供性價比高、高質(zhì)量可靠的遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù)和產(chǎn)品。河南STR基因SNP分型公司SNP數(shù)量多,分布很普遍。
片段長度多態(tài)性(限制性內(nèi)切酶)法——RFLP(RestrictionFragmentLengthPolymorphism)法的基本原理是通過PCR擴增目的片段DNA,擴增產(chǎn)物再用特異性內(nèi)切酶酶切成不同大小的片段,直接通過凝膠電泳分辨基因型。不同等位基因的限制性酶切位點分布不同,產(chǎn)生不同長度的DN*段條帶。上海翼和專家團隊富有開創(chuàng)精神,朝氣蓬勃,在肖君華博士的帶領(lǐng)下,秉承“專業(yè)、協(xié)作、進取”的企業(yè)精神,為科研用戶提供性價比高、高質(zhì)量可靠的遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù)和產(chǎn)品。微信公眾號:上海翼和生物
LDR連接酶檢測法優(yōu)點是適用于任何多態(tài)性位點,基于雜交反應(yīng)和連接反應(yīng),分型結(jié)果準確,可進行多重反應(yīng),性價比較高,且實驗靈活。但是相比TaqMan和直接測序法的單一位點檢測而言,LDR法可以實現(xiàn)多位點的同時檢測,提高檢測通量,因此前期需要一定時間構(gòu)建多重分型方案。因此該方法非常適合相同分型方案,連續(xù)樣本的分型需求,提高實驗通量的同時降低分型單價。上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司總部在上海,2011年無錫成立分公司無錫翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司SNP基因分型技術(shù)原理是PCR擴增含有SNP的基因組片段。
2.SNaPshot法該技術(shù)由美國應(yīng)用生物公司(ABI)開發(fā),是基于熒光標記單堿基延伸原理的分型技術(shù),也稱小測序,主要針對中等通量的SNP分型項目。在一個含有測序酶、四種熒光標記ddNTP、緊臨多態(tài)位點5’-端的不同長度延伸引物和PCR產(chǎn)物模板的反應(yīng)體系中,引物延伸一個堿基即終止,經(jīng)ABI測序儀檢測后,根據(jù)峰的移動位置確定該延伸產(chǎn)物對應(yīng)的SNP位點,根據(jù)峰的顏色可得知摻入的堿基種類,從而確定該樣本的基因型。對于PCR產(chǎn)物模板可通過多重PCR反應(yīng)體系來獲得。通常用于10-30個SNP位點分析。通常所說的SNP都是二等位多態(tài)性的。無錫STRSNP分型哪里好
而現(xiàn)在,要想在SCI雜志上面發(fā)表SNP的文章,尤其是影響因子大于5的雜志,就沒有那么容易了。江蘇微衛(wèi)星標記strSNP分型
理論上講,SNP既可能是二等位多態(tài)性,也可能是3個或4個等位多態(tài)性,但實際上,后兩者非常少見,幾乎可以忽略。因此,通常所說的SNP都是二等位多態(tài)性的。這種變異可能是轉(zhuǎn)換(CT,在其互補鏈上則為GA),也可能是顛換(CA,GT,CG,AT)。轉(zhuǎn)換的發(fā)生率總是明顯高于其它幾種變異,具有轉(zhuǎn)換型變異的SNP約占2/3,其它幾種變異的發(fā)生幾率相似。Wang等的研究也證明了這一點。轉(zhuǎn)換的幾率之所以高,可能是因為CpG二核苷酸上的胞嘧啶殘基是人類基因組中,易發(fā)生突變的位點,其中大多數(shù)是甲基化的,可自發(fā)地脫去氨基而形成胸腺嘧啶。在基因組DNA中,任何堿基均有可能發(fā)生變異,因此SNP既有可能在基因序列內(nèi),也有可能在基因以外的非編碼序列上。總的來說,位于編碼區(qū)內(nèi)的SNP(codingSNP,cSNP)比較少,因為在外顯子內(nèi),其變異率及周圍序列的1/5.但它在遺傳性疾病研究中卻具有重要意義,因此cSNP的研究更受關(guān)注。江蘇微衛(wèi)星標記strSNP分型
上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司主營品牌有Biowing,發(fā)展規(guī)模團隊不斷壯大,該公司服務(wù)型的公司。翼和生物是一家私營有限責(zé)任公司企業(yè),一直“以人為本,服務(wù)于社會”的經(jīng)營理念;“誠守信譽,持續(xù)發(fā)展”的質(zhì)量方針。公司業(yè)務(wù)涵蓋細胞組織小鼠質(zhì)控,大健康檢測,生物技術(shù)服務(wù),價格合理,品質(zhì)有保證,深受廣大客戶的歡迎。翼和生物以創(chuàng)造高品質(zhì)產(chǎn)品及服務(wù)的理念,打造高指標的服務(wù),引導(dǎo)行業(yè)的發(fā)展。