上海翼和生物根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)規(guī)模,提供兩種檢測(cè)平臺(tái),分別為:適合中低通量檢測(cè)的PCR-LDR分型服務(wù)和適合高通量的基于二代Hi-SNP分型服務(wù)。PCR-LDRSNP分型服務(wù):PCR-LDR技術(shù)是PCR技術(shù)和LDR(LigaseDetectionReaction,連接酶檢測(cè)反應(yīng))想結(jié)合的檢測(cè)技術(shù)。LDR是利用高溫連接酶實(shí)現(xiàn)對(duì)基因多態(tài)性位點(diǎn)的識(shí)別。高溫連接酶一旦檢測(cè)到DNA與互補(bǔ)的兩條寡聚核苷酸接頭對(duì)應(yīng)處存在著基因點(diǎn)突變類型的堿基錯(cuò)配,則連接反應(yīng)就不能進(jìn)行,反之則可以進(jìn)行連接反應(yīng)。Hi-SNP結(jié)合多重PCR技術(shù)和高通量測(cè)序技術(shù),對(duì)需要檢測(cè)的位點(diǎn)設(shè)計(jì)特異性引物,在單管內(nèi)進(jìn)行多重PCR擴(kuò)增,不同的樣本以不同的Barcode引物區(qū)分?;旌蠘颖竞?,在illumina等主流測(cè)序平臺(tái)上,對(duì)擴(kuò)增子進(jìn)行高通量測(cè)序。測(cè)序結(jié)果使用生物信息學(xué)方法,區(qū)分不同的樣本,,終獲得每個(gè)位點(diǎn)的SNP信息。高通量測(cè)序能一次對(duì)幾百萬條DNA分子進(jìn)行序列測(cè)定,相比其他的SNP檢測(cè)技術(shù),基于高通量測(cè)序的SNP分型具有更準(zhǔn)確、更靈敏的特點(diǎn)。但是只要這個(gè)突變?nèi)簺]有達(dá)到總?cè)后w的1%,它就只是一個(gè)突變株/系。達(dá)到了1%就是多態(tài)性了。山東STRSNP分型
二代測(cè)序法主要通過PCR的方法,對(duì)目標(biāo)SNP位點(diǎn)進(jìn)行特異性捕獲。為了提型的通量,目前多采用多重PCR的方法同時(shí)對(duì)多個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行捕獲(可同時(shí)對(duì)1-100位點(diǎn)進(jìn)行分型)。由于二代測(cè)序通量是足夠滿足數(shù)百數(shù)千樣本的同時(shí)測(cè)序,因此需要對(duì)不同的樣本添加的樣本標(biāo)簽(Barcode),從而在后續(xù)數(shù)據(jù)分析過程中,能夠進(jìn)行樣本拆分。因此在多重PCR完成輪多SNP位點(diǎn)捕獲后,需要進(jìn)行第二輪PCR,在輪PCR產(chǎn)物的基礎(chǔ)上,添加樣本樣本標(biāo)簽及測(cè)序接頭等序列。通過PCR條件優(yōu)化,目前亦可實(shí)現(xiàn)一次反應(yīng),兩輪PCR接力完成的效果。浙江SSR基因SNP分型報(bào)告現(xiàn)在國(guó)外的趨勢(shì)更傾向于,對(duì)于某一疾病的重要候選基因.
TaqMan熒光探針法優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單,準(zhǔn)確性高(閉管進(jìn)行,減少污染),判讀也很方便,認(rèn)可度高;適合多樣本,少位點(diǎn)。但是其也有不可忽視的限制性,如探針合成耗時(shí)較長(zhǎng),價(jià)格昂貴,為了保證探針的穩(wěn)定質(zhì)量,一般大家會(huì)選擇A公司合成。TaqMan熒光探針法一般為只有幾個(gè)位點(diǎn)時(shí)適用,并且對(duì)樣本的質(zhì)量要求較高,除了樣本無降解外,要需要濃度盡可能的一致。上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司,地址:上海市松江區(qū)龍騰路1015弄中星創(chuàng)意園2號(hào)502
LDR連接酶檢測(cè)法優(yōu)點(diǎn)是適用于任何多態(tài)性位點(diǎn),基于雜交反應(yīng)和連接反應(yīng),分型結(jié)果準(zhǔn)確,可進(jìn)行多重反應(yīng),性價(jià)比較高,且實(shí)驗(yàn)靈活。但是相比TaqMan和直接測(cè)序法的單一位點(diǎn)檢測(cè)而言,LDR法可以實(shí)現(xiàn)多位點(diǎn)的同時(shí)檢測(cè),提高檢測(cè)通量,因此前期需要一定時(shí)間構(gòu)建多重分型方案。因此該方法非常適合相同分型方案,連續(xù)樣本的分型需求,提高實(shí)驗(yàn)通量的同時(shí)降低分型單價(jià)。上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司總部在上海,2011年無錫成立分公司無錫翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司對(duì)于PCR產(chǎn)物模板可通過多重PCR反應(yīng)體系來獲得。
片段長(zhǎng)度多態(tài)性(限制性內(nèi)切酶)法——RFLP(RestrictionFragmentLengthPolymorphism)法的基本原理是通過PCR擴(kuò)增目的片段DNA,擴(kuò)增產(chǎn)物再用特異性內(nèi)切酶酶切成不同大小的片段,直接通過凝膠電泳分辨基因型。不同等位基因的限制性酶切位點(diǎn)分布不同,產(chǎn)生不同長(zhǎng)度的DN*段條帶。上海翼和**團(tuán)隊(duì)富有開創(chuàng)精神,朝氣蓬勃,在肖君華博士的帶領(lǐng)下,秉承“專業(yè)、協(xié)作、進(jìn)取”的企業(yè)精神,為科研用戶提供性價(jià)比高、高質(zhì)量可靠的遺傳學(xué)技術(shù)服務(wù)和產(chǎn)品。微信公眾號(hào):上海翼和生物SNP應(yīng)該在群體中占一定的比例,比如至少是1%。山東STRSNP分型
目前已有多種方法可用于SNP檢測(cè),如根據(jù)DNA列陣的微測(cè)序法、DNA芯片以及TaqMan系統(tǒng)等。山東STRSNP分型
隨著二代測(cè)序技術(shù)的普及,相比Sanger測(cè)序,以降低測(cè)序讀長(zhǎng)的前提,極大增加的測(cè)序通量同時(shí)大幅降低測(cè)序成本。利用二代測(cè)序進(jìn)行SNP分型,不僅測(cè)序讀長(zhǎng)滿足分型需求,可以同時(shí)對(duì)數(shù)十?dāng)?shù)百個(gè)位點(diǎn),上千樣本進(jìn)行分型。該方法相比直接測(cè)序法,除了保留測(cè)序法的優(yōu)點(diǎn)外,彌補(bǔ)了其通量不足的限制,二代測(cè)序分型法也正在快速在領(lǐng)域內(nèi)推廣。無錫分公司(無錫翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司)地址:無錫市濱湖區(qū)梅梁西路138號(hào)七號(hào)樓一樓。微信公眾號(hào):上海翼和生物山東STRSNP分型
上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司位于龍騰路1015弄中星創(chuàng)意園2號(hào)502。公司業(yè)務(wù)涵蓋細(xì)胞組織小鼠質(zhì)控,大健康檢測(cè),生物技術(shù)服務(wù)等,價(jià)格合理,品質(zhì)有保證。公司將不斷增強(qiáng)企業(yè)重點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)力,努力學(xué)習(xí)行業(yè)知識(shí),遵守行業(yè)規(guī)范,植根于醫(yī)藥健康行業(yè)的發(fā)展。翼和生物立足于全國(guó)市場(chǎng),依托強(qiáng)大的研發(fā)實(shí)力,融合前沿的技術(shù)理念,飛快響應(yīng)客戶的變化需求。