北京碧云天cck8

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-01-25

CCK-8盒子的選購(gòu)還記得***次做CCK-8的實(shí)驗(yàn)時(shí)研究生二年級(jí)的時(shí)候,當(dāng)時(shí)用的***個(gè)盒子是Sigma的,當(dāng)時(shí)的Sigma-Aldrich就是Sigma-Aldrich,還不是現(xiàn)在的Millipore-Sigma。那個(gè)盒子給了我莫大的鼓勵(lì),因?yàn)樵谀侵白龇肿涌寺∫恢倍疾皇呛茼樌?。這個(gè)盒子是我的碩士老板從美國(guó)帶回來(lái)的,品質(zhì)有保證,***的結(jié)果也是很好的。后面在做CCK-8的實(shí)驗(yàn)時(shí),我們?cè)谟羞x擇的情況下都會(huì)買(mǎi)sigma,下圖2是sigma官網(wǎng)的截圖。其實(shí)也不貴,只是到貨時(shí)間太慢。**藥敏試驗(yàn):這個(gè)是用的比較廣的,我見(jiàn)過(guò)做**的團(tuán)隊(duì),買(mǎi)CCK-8都是一整箱,一整箱的買(mǎi)。北京碧云天cck8

讀數(shù)前可在搖床上溫柔混勻,酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的吸光度。

***率(%)= [(對(duì)照孔吸光度-實(shí)驗(yàn)孔吸光度)/(對(duì)照孔吸光度-空白孔吸光度)]×100=IC50

注意事項(xiàng)

CCK8法檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況基于的原理是脫氫酶催化的反應(yīng),如果實(shí)驗(yàn)處理?xiàng)l件中存在還原劑的影響,應(yīng)事先去除。如果實(shí)驗(yàn)條件中存在還原物質(zhì),需單獨(dú)測(cè)定還原物質(zhì)的空白吸光度。如果還原物質(zhì)的吸光度很小,可以忽略不計(jì);但如果吸光度很大,則需要去除培養(yǎng)基,再用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞3次,然后再加入新的 100ul培養(yǎng)基和10ul CCK-8 溶液進(jìn)行檢測(cè)。 浙江碧云天cck8***篩選:在測(cè)定一個(gè)***的毒性和安全有效濃度時(shí),經(jīng)常會(huì)用到CCK-8。

cck8試劑加入后孵育時(shí)間,隨著時(shí)間的增加,OD值就會(huì)增大。總之原則就是把OD值控制在1.0左右。這里我考察了0.5h、1.0h、2.0h。

再說(shuō)一下關(guān)于種板設(shè)置問(wèn)題。眾所周知周?chē)蝗滓驗(yàn)檫吘壭?yīng)都是不用來(lái)做實(shí)驗(yàn)的。一般每組樣品我會(huì)設(shè)置6個(gè)復(fù)孔,得到的OD值去掉**大值與**小值,其余取平均值。我用的是排***,會(huì)省很多力氣,但是也會(huì)增大組內(nèi)誤差。這個(gè)只有通過(guò)校正移液***和選用**適***頭了。

能力有限,表達(dá)不清的大家湊合著看看吧。有疑問(wèn)的歡迎大家留言討論,我們的目標(biāo)是共同進(jìn)步,哈哈。

CCK-8的用途1.細(xì)胞增殖測(cè)定:細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)在很多領(lǐng)域都會(huì)用到,比如**相關(guān)、損傷后修復(fù)等。

2.***篩選:在測(cè)定一個(gè)***的毒性和安全有效濃度時(shí),經(jīng)常會(huì)用到CCK-8。

3.細(xì)胞毒性測(cè)定:這個(gè)可以和各個(gè)處理因素對(duì)細(xì)胞活性和增殖的影響,比如在UV、低氧或者什么化學(xué)物品對(duì)細(xì)胞的影響上。

4.**藥敏試驗(yàn):這個(gè)是用的比較廣的,我見(jiàn)過(guò)做**的團(tuán)隊(duì),買(mǎi)CCK-8都是一整箱,一整箱的買(mǎi),比如果子老師所在的團(tuán)隊(duì),哈哈哈。

5.微生物對(duì)細(xì)胞的毒性或增殖的實(shí)驗(yàn)。 換液的意思是將cck8加在培養(yǎng)基中以換液的形式加在孔板中避免氣泡產(chǎn)生。

CCK法與其他細(xì)胞增殖/毒性檢測(cè)方法的優(yōu)勢(shì)比較檢測(cè)方法MTT法XTT法WST-1法CCK法甲臜產(chǎn)物的水溶性差(需加有機(jī)溶劑溶解再檢測(cè))好好好產(chǎn)品性狀粉末2瓶溶液溶液1瓶溶液使用方法配成溶液后使用現(xiàn)配現(xiàn)用即開(kāi)即用即開(kāi)即用檢測(cè)靈敏度高很高很高高檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)較短較短**短檢測(cè)波長(zhǎng)560-600nm420-480nm420-480nm430-490nm細(xì)胞毒性高,細(xì)胞形態(tài)完全消失很低,細(xì)胞形態(tài)不變很低,細(xì)胞形態(tài)不變很低,細(xì)胞形態(tài)不變?cè)噭┓€(wěn)定性一般較差一般很好批量樣品檢測(cè)可以非常適合非常適合非常適合便捷程度一般便捷便捷非常便捷接種時(shí)注意細(xì)胞懸液一定要混勻,以避免細(xì)胞沉淀下來(lái),導(dǎo)致每孔中的細(xì)胞數(shù)量不一致。浙江碧云天cck8

CCK-8 反復(fù)凍融會(huì)增加背景值,干擾實(shí)驗(yàn)測(cè)定。北京碧云天cck8

隨著科學(xué)技術(shù)發(fā)展,醫(yī)藥冷鏈物流技術(shù)不斷涌現(xiàn),同時(shí)在我國(guó)高度重視下,冷鏈物流標(biāo)準(zhǔn)逐漸完善。但我國(guó)醫(yī)藥健康仍存在體系不完善、物流成本高和技術(shù)、設(shè)施落后的問(wèn)題。在市場(chǎng)機(jī)遇與現(xiàn)存問(wèn)題面前,如何把握醫(yī)藥健康未來(lái)發(fā)展趨勢(shì)顯得尤為重要。根據(jù)細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細(xì)胞增殖,內(nèi)參抗體相關(guān)領(lǐng)域極新技術(shù)發(fā)展趨勢(shì),《2019年本》在鼓勵(lì)類(lèi)條目中新增了新型技術(shù)開(kāi)發(fā)和應(yīng)用的有關(guān)內(nèi)容。例如,在化學(xué)原料藥領(lǐng)域增加了“連續(xù)反應(yīng)”等技術(shù),在技術(shù)領(lǐng)域增加了“基因醫(yī)治”和“抗體偶聯(lián)”等技術(shù),在藥用包裝材料領(lǐng)域增加了“中性硼硅藥用玻璃”等新型材料與技術(shù)的開(kāi)發(fā)應(yīng)用,在醫(yī)藥領(lǐng)域增加了“人工智能輔助醫(yī)藥設(shè)備”等新技術(shù)內(nèi)容。隨著西方健康服務(wù)理念的進(jìn)入及國(guó)內(nèi)需求市場(chǎng)的飛速增長(zhǎng),國(guó)內(nèi)以體檢為重點(diǎn)的有限責(zé)任公司得到了飛速發(fā)展,尤其是近年來(lái),健康服務(wù)機(jī)構(gòu)飛速發(fā)展。盡管中國(guó)老年健康服務(wù)目前仍處于初始發(fā)展階段,但近年來(lái)我國(guó)出臺(tái)了一些扶持政策,市場(chǎng)空間逐漸打開(kāi)。從目前從事生物技術(shù)、物聯(lián)網(wǎng)技術(shù)、網(wǎng)絡(luò)技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā)、技術(shù)咨詢(xún)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)服務(wù),軟件開(kāi)發(fā),電子商務(wù)(不得從事增值電信、金融業(yè)務(wù)),化工產(chǎn)品及原料(除危險(xiǎn)化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、民用物品、易制毒化學(xué)品)、實(shí)驗(yàn)窒設(shè)備的銷(xiāo)售。的公開(kāi)數(shù)據(jù)看,原材料成本、研發(fā)成本、生產(chǎn)成本等占醫(yī)藥整體成本相對(duì)較低,占據(jù)高比例的是運(yùn)營(yíng)成本、商務(wù)成本、資本成本等。預(yù)計(jì)隨著“4+7”試點(diǎn)擴(kuò)大、后續(xù)品種的增加,制藥工業(yè)的營(yíng)銷(xiāo)費(fèi)用將會(huì)面臨巨大的下跌。北京碧云天cck8