南京基因擴(kuò)增儀PCR儀廠家

來源: 發(fā)布時(shí)間:2025-07-02

放入 PCR 儀:將配置好的反應(yīng)管放入基因擴(kuò)增儀 PCR 儀中,按照設(shè)定的程序進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)。設(shè)置擴(kuò)增程序:一般包括預(yù)變性、變性、退火、延伸和終延伸等步驟。預(yù)變性步驟通常在 94℃-95℃下進(jìn)行 5-10 分鐘,使 DNA 雙鏈充分解開;變性溫度一般為 94℃-95℃,時(shí)間為 30-60 秒,使模板 DNA 雙鏈解鏈;退火溫度根據(jù)引物的 Tm 值確定,一般在 50℃-65℃之間,時(shí)間為 30-60 秒,使引物與模板 DNA 特異性結(jié)合;延伸溫度通常為 72℃,時(shí)間根據(jù)擴(kuò)增片段長度而定,一般為 1-2 分鐘 /kb;終延伸步驟在 72℃下進(jìn)行 5-10 分鐘,確保所有擴(kuò)增產(chǎn)物延伸完整。循環(huán)次數(shù)一般為 30-40 次。RePure-(D)B的雙槽設(shè)計(jì)能夠滿足同時(shí)進(jìn)行不同PCR反應(yīng)的需求,減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間和成本。南京基因擴(kuò)增儀PCR儀廠家

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啟動(dòng)反應(yīng)與結(jié)果分析確認(rèn)參數(shù)無誤后,啟動(dòng) qPCR 程序,儀器自動(dòng)運(yùn)行并實(shí)時(shí)顯示熒光曲線。反應(yīng)結(jié)束后,通過軟件查看結(jié)果:定量結(jié)果:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算未知樣本的初始模板濃度(定量),或通過 ΔΔCt 法分析相對(duì)表達(dá)量(相對(duì)定量)。溶解曲線:若出現(xiàn)單一尖銳峰,說明擴(kuò)增特異性良好;若有雜峰,需排查引物或反應(yīng)條件問題。 污染防控(重點(diǎn))核酸污染:嚴(yán)格分區(qū)操作:將試劑配制區(qū)、樣本處理區(qū)、PCR 擴(kuò)增區(qū)分開,避免交叉污染。使用濾芯吸頭,每次加樣后更換吸頭,避免移液器接觸樣本或試劑瓶口。定期用 10% 次氯酸鈉或 DNA 酶清潔實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、移液器和儀器樣品槽,紫外燈照射消毒操作區(qū)(30 分鐘以上)。試劑污染:試劑分裝保存(避免反復(fù)凍融),陰性對(duì)照(無模板)和空白對(duì)照(無菌水)必須設(shè)置,以監(jiān)測(cè)是否污染。江蘇雙槽基因擴(kuò)增儀PCR儀一般多少錢柏恒RePure系列PCR儀在擴(kuò)增效果方面表現(xiàn)優(yōu)異,具有高靈敏度和穩(wěn)定性,能夠?qū)崿F(xiàn)快速、高效的DNA擴(kuò)增。

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PCR儀是利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù),在體外對(duì)特定DNA片段進(jìn)行大量擴(kuò)增的儀器。其原理是通過高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個(gè)周期,循環(huán)進(jìn)行,使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。具體過程如下:高溫變性:將待擴(kuò)增的DNA雙鏈在高溫(90-95℃)下解鏈,形成單鏈DNA模板。低溫退火:降低溫度(一般為50-65℃),使引物與單鏈DNA模板特異性結(jié)合。適溫延伸:在DNA聚合酶的作用下,以引物為起始點(diǎn),在適宜溫度(一般為72℃左右)下,以dNTP為原料,沿著模板鏈合成新的DNA鏈。

性能指標(biāo)溫度控制準(zhǔn)確性:指樣品孔溫度與設(shè)定溫度的一致性,直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗,一般要求溫度準(zhǔn)確性在±0.1℃-±0.2℃之間。均勻性:指樣品孔間的溫度差異,關(guān)系到不同樣品孔進(jìn)行反應(yīng)結(jié)果的一致性,良好的溫度均勻性可使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更具重復(fù)性,通常溫度均勻性應(yīng)在±0.2℃-±0.5℃范圍內(nèi)。升降溫速度:更快的升降溫速度可以縮短反應(yīng)時(shí)間,提高實(shí)驗(yàn)效率,同時(shí)減少非特異性結(jié)合的機(jī)會(huì),一般PCR儀的升降溫速率在3℃/s-6℃/s左右。模塊規(guī)格:常見的有96孔、48孔、32孔等,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的模塊規(guī)格。此外,一些PCR儀還兼容0.2ml、0.5ml管以及96標(biāo)準(zhǔn)微孔板等不同類型的反應(yīng)容器。程序設(shè)置:包括可記憶程序數(shù)目、比較大程序段數(shù)、比較大溫階步數(shù)、比較大循環(huán)次數(shù)、比較大保溫時(shí)間等。豐富的程序設(shè)置功能可以滿足不同實(shí)驗(yàn)的需求。RePure-(D)B梯度功能的應(yīng)用可有效減少實(shí)驗(yàn)中的試錯(cuò)次數(shù),節(jié)省實(shí)驗(yàn)時(shí)間。

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司法與法醫(yī)鑒定DNA 數(shù)據(jù)庫構(gòu)建應(yīng)用:同時(shí)擴(kuò)增 96 份血樣的 STR 位點(diǎn)(如 CODIS 系統(tǒng)中的 13 個(gè)**位點(diǎn)),加速犯罪現(xiàn)場(chǎng)樣本比對(duì)。親子鑒定批量處理應(yīng)用:法醫(yī)實(shí)驗(yàn)室通過 96 孔板同步處理多個(gè)家庭的樣本,縮短鑒定周期。5. 食品與環(huán)境安全食品微生物高通量檢測(cè)應(yīng)用:同時(shí)檢測(cè)多批次食品中的致病菌(如沙門氏菌、李斯特菌)或過敏原基因(如花生過敏原)。環(huán)境微生物群落分析應(yīng)用:擴(kuò)增土壤 / 水樣中的微生物 16S rRNA 基因,批量構(gòu)建微生物多樣性文庫。Q9604還具備數(shù)據(jù)管理和分析軟件,可以快速生成實(shí)驗(yàn)報(bào)告,方便進(jìn)行數(shù)據(jù)的分析與共享,促進(jìn)合作研究的開展。南京QPCR基因擴(kuò)增儀PCR儀品牌

杭州柏恒熒光定量PCR儀Q9604是一款高性能的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備,專注實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(qPCR)解決方案。南京基因擴(kuò)增儀PCR儀廠家

96 孔 PCR 儀是一種基于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)的儀器,通過 96 孔反應(yīng)板實(shí)現(xiàn)一次性處理 96 個(gè)樣本的基因擴(kuò)增,適用于高通量檢測(cè)場(chǎng)景。其設(shè)計(jì)**是通過精確控溫(加熱、冷卻、恒溫)實(shí)現(xiàn) DNA 的變性、退火、延伸循環(huán),廣泛應(yīng)用于科研、臨床、農(nóng)業(yè)、司法等領(lǐng)域。臨床與醫(yī)學(xué)檢測(cè)大規(guī)模病原體篩查應(yīng)用:、流感病毒、HPV 等傳染病的批量檢測(cè)(如醫(yī)院檢驗(yàn)科、疾控中心)。案例:**期間,96 孔 PCR 儀配合自動(dòng)化移液工作站,單日可完成數(shù)千份樣本的核酸提取與擴(kuò)增。遺傳疾病批量診斷應(yīng)用:同時(shí)檢測(cè)多個(gè)樣本的致病基因突變(如地中海貧血、脊髓性肌萎縮癥)。南京基因擴(kuò)增儀PCR儀廠家