浙江M-SAN中鹽核酸酶70950

來源: 發(fā)布時間:2025-04-21

在傳統(tǒng)生物技術(shù)行業(yè)(如抗體、疫苗領(lǐng)域)使用的下游純化工藝步驟,已經(jīng)用于慢病毒的大規(guī)模下游處理。主要是基于膜(過濾/澄清,利用切向流過濾TFF進行濃縮/滲濾,基于膜的色譜)和色譜(離子交換色譜IEC,親和色譜AC,體積排阻色譜SEC)的技術(shù)。這些不同的過程步驟的組合是可變的,在某些情況下,不同的純化方法可以用于相同的目的。此外,采用benzonase/M-SAN HQ中鹽核酸酶降解污染的DNA或者用于下游的一個步驟,或者用于病毒生產(chǎn)階段。M-SAN HQ中鹽核酸酶的生產(chǎn)用原輔料是Non-animal和Non-plant來源的。浙江M-SAN中鹽核酸酶70950

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大多數(shù)研究級別的慢病毒是通過批次濃縮而不是粗制劑之后應(yīng)用的,濃縮基本上是通過兩步離心法產(chǎn)生的。在70000g通過超速離心濃縮后的慢病毒再通過蔗糖緩沖(50000g)純化,然后溶解在配方緩沖液中。一種改進,特別是純度方面的改進,基于離心/色譜聯(lián)用的純化方法。例如,Kutner等評估了組合純化/濃縮方法。蔗糖緩沖的超速離心結(jié)合陰離子交換層析獲得了88.2%的收率,而相反的組合則獲得了77.6%的收率。在兩種方法中,濃縮都超過了100倍,病毒滴度都超過了1010TU/ml(VSV-g包被的慢病毒)。上海上海倍篤生物中鹽核酸酶70950東臺中鹽核酸酶服務(wù)哪家好呢,歡迎咨詢上海倍篤生物 。

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這款核酸酶的適宜pH范圍很廣(pH 7.2 - 8.7),且在125 – 250 mM鹽濃度內(nèi)具有優(yōu)活性。在細胞培養(yǎng)液或收獲的培養(yǎng)上清中,不需調(diào)整任何組分,直接加入M-SAN HQ即可表現(xiàn)良好核酸酶活性。相比傳統(tǒng)的全能核酸酶,M-SAN HQ中鹽核酸酶在生理鹽條件下,對HCD的去除更高效、更徹底。因此,M-SAN HQ中鹽核酸酶非常適合部分病毒載體(如慢病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒及溶瘤病毒等)的生產(chǎn)。ArcticZymesTechnologies成立于20世紀80年代后期,總部位于挪威北部的特羅姆瑟(Troms?)。立足北極海洋區(qū),致力于從海洋生物中識別新的冷適應(yīng)酶,用于分子研究、體外診斷和zhiliao領(lǐng)域。ArcticZymes專注于與全球的合作伙伴和商業(yè)創(chuàng)新者建立牢固可靠的關(guān)系。因此,我們一直在高水平工作,不斷滿足并且超過合作伙伴的期望。

Mayer等(2023)以measles virus(麻疹病毒,MV)為例,評估了四種不同核酸酶(BenzonaseTM、DeneraseTM、M-SAN HQ中鹽核酸酶及SAN HQ高鹽核酸酶)對于染色質(zhì)DNA去除的效果。Vero細胞通過微載體貼壁培養(yǎng)來生產(chǎn)麻疹病毒MV,72h后收獲上清液,使用3μm cellulose filter(Sartorius)過濾后分裝多份,置于-80℃保存便于后續(xù)使用。在解凍后的上清中調(diào)節(jié)對應(yīng)鹽濃度,并加入50 U/ml核酸酶,37℃孵育2hr進行消化,消化后留樣;將消化后上清液過Capto Core 700 (Cytiva)柱子,收集流穿液,之后洗雜、洗脫,并分別留樣。通過SDS-PAGE分析發(fā)現(xiàn),相比Benzonase等傳統(tǒng)核酸酶,在生理鹽條件下M-SAN HQ中鹽核酸酶更高效將染色質(zhì)DNA剪切成更小片段,甚至將核小體DNA剪切更徹底。M-SAN HQ中鹽核酸酶的檢測標準,都符合USP-EP要求。

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M-SAN HQ中鹽核酸酶在生理鹽條件下的優(yōu)勢,讓其成為生物生產(chǎn)工藝中去除核酸污染的更好選擇。經(jīng)過多年的市場宣傳,M-SAN HQ中鹽核酸酶品質(zhì)已得到多個全球TOP CDMOs認可,納入其工藝開發(fā)篩選平臺。此外,目前全球有10+臨床項目涉及的病毒載體生產(chǎn)用到M-SAN HQ中鹽核酸酶。對于同一個項目,用M-SAN HQ替代Benzonase全能核酸酶,酶量減少、HCD去除效果更優(yōu)、病毒載體產(chǎn)量也有一定程度的提高,酶相關(guān)成本降為原有的1/5以內(nèi),極大降低了病毒載體生產(chǎn)成本。致力于從深海microbe中識別新的冷適應(yīng)酶,用于分子研究、IVD和biopharma領(lǐng)域。重慶M-SAN中鹽核酸酶70950-150

M-SAN HQ中鹽核酸酶更適合細胞基因drug(如AAV、LVV、RV及OV等)的生產(chǎn)。浙江M-SAN中鹽核酸酶70950

倫敦大學(xué)學(xué)院(UCL)的工藝開發(fā)團隊,在細胞藥物Car-T涉及的慢病毒(Lentivirus,LV)生產(chǎn)過程中,比較了Benzonase和M-SAN HQ中鹽核酸酶在酶活、酶切時間、各階段LV的穩(wěn)定性等方面的表現(xiàn),發(fā)現(xiàn)在生理鹽條件下M-SAN HQ中鹽核酸酶酶活更高、酶切時間更短,同時用納米顆粒分析(NTA)技術(shù)確認M-SAN HQ組得到的LV病毒顆粒聚集更少、穩(wěn)定性更高。他們會繼續(xù)探究HCD是否影響LV的穩(wěn)定性,及對LV侵染效率和生命周期是否有影響。通過更多研究,我們探究M-SAN HQ中鹽核酸酶助力LV生產(chǎn)的關(guān)鍵機制。浙江M-SAN中鹽核酸酶70950