安全性:避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。Elisa 試劑盒在病毒檢測方面發(fā)揮重要作用。儀征白介素20(IL20)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
現(xiàn)在常用的幾種ELISA辦法有:測定抗體的直接法,測定抗原的雙抗體夾心法和測定抗原的競爭法等。本試驗選用直接法測定單克隆抗體效價。其主要進程為:首先將已知定量抗原吸附在聚苯乙烯微量反響板的凹孔內(nèi),加待測抗體,保溫后洗刷以除掉未結(jié)合的雜蛋白質(zhì),加酶標抗抗體,保溫后洗刷,加底物保溫30分鐘后,加酸或堿中止酶促反響,用目測或光電比色測定抗體含量。二、試驗意圖1.深化了解ELISA試劑盒法測定抗體效價的原理。2.把握ELISA法測定單克隆抗體效價的辦法。儀征白介素20(IL20)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)Elisa試劑盒的適用范圍非常普遍,可以應用于流行病學、醫(yī)學、生物技術等領域。
一、試驗原理1,ELISA試劑盒是以免疫學反響為基礎,將抗原、抗體的特異性反響與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技能。免疫酶技能是將酶標記在抗體/抗原分子上,構(gòu)成酶標抗體/酶標抗原,稱為酶結(jié)合物。該酶結(jié)合物的酶在免疫反響后,作用于底物使之呈色,依據(jù)色彩的有無和深淺,定位或定量抗原/抗體。2,ELISA法是免疫酶技能的一種,其特點是利用聚苯乙烯微量反響板(或球)吸附抗原/抗體,使之固相化,免疫反響和酶促反響都在其間進行。在每次反響后都要反復洗刷,這既確保了反響的定量聯(lián)絡,也避免了末反響的游離抗體/抗原的別離進程。在ELISA法中.酶促反響只進行一次,而抗原的免疫反響可進行一次或數(shù)次,即可用二抗(抗抗體)、三抗再次進行免疫反響。
elisa試劑盒操作所需主要設備,包被緩沖液(PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液)洗滌緩沖液,稀釋液,終止液,底物緩沖液,TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液,ABTS使用液,抗原、抗體和酶標記抗體。正常人血清和陽性對照血清。聚苯乙烯塑料板(簡稱酶標板)40孔或96孔,elisa試劑盒檢測儀,50μl及100μl加樣器,塑料滴頭,小毛巾,洗滌瓶。小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。4℃冰箱,37℃孵育箱。試驗原理,試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(elisa試劑盒).已知濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。可以先將生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。Elisa試劑盒的結(jié)果可通過光密度測量儀器進行定量分析,結(jié)果準確可靠。
免疫吸附劑已包被抗原或抗體的固相載體在低溫(2~8℃)干燥的條件下一般可保存6個月。對于有些不完整的試盒,單供應包被用抗原或抗體,檢測人員需自行報備,固相載體在elisa試劑盒測定過程中作為吸附劑和容器,不參與化學反應??勺鱡lisa試劑盒中載體的材料很多,較為常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有較強的吸附蛋白質(zhì)的性能,抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后仍保留原來的免疫學活性,加之它的價格低廉,所以被普遍采用。聚苯乙烯為塑料,可制成各種形式。ELISA測定過程中作為吸附劑和容器,不參與化學反應。Elisa試劑盒的使用需要適當?shù)脑O備和試劑,如酶標儀、洗板機、緩沖液等。昆山簇集蛋白(CLU)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Elisa試劑盒的優(yōu)點包括操作簡便、重現(xiàn)性好、靈敏度高、可視化等。儀征白介素20(IL20)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
游離四碘甲狀腺原氨酸試劑盒,該試劑由標記試劑和固相試劑組成。標記試劑存在于有EDTA,蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑和疊氮化鈉的巴比妥鈉緩沖劑中帶吖啶酯標記的T4。固相試劑存在于有EDTA,蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑和疊氮化鈉的巴比妥鈉(二乙基丙二酰脲鈉)緩沖劑中與順磁粒子共價結(jié)合的多克隆兔T4抗體。產(chǎn)品性能結(jié)構(gòu)及組成該試劑由標記試劑和固相試劑組成。標記試劑存在于有EDTA,蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑和疊氮化鈉的巴比妥鈉緩沖劑中帶吖啶酯標記的T4。固相試劑存在于有EDTA,蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑和疊氮化鈉的巴比妥鈉(二乙基丙二酰脲鈉)緩沖劑中與順磁粒子共價結(jié)合的多克隆兔T4抗體。儀征白介素20(IL20)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)