One Step RT-qPCR Probe Kit:高效、特異的RNA定量檢測解決方案One Step RT-qPCR Probe Kit 是一種為探針法實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)設(shè)計(jì)的一步法試劑盒,適用于以RNA為模板的定量檢測。該試劑盒將逆轉(zhuǎn)錄(RT)和qPCR反應(yīng)集成在同一反應(yīng)管中,操作簡便,能夠有效防止污染,提高檢測效率。產(chǎn)品特點(diǎn)高靈敏度與特異性:采用高質(zhì)量的逆轉(zhuǎn)錄酶和熱啟動Taq DNA聚合酶,結(jié)合優(yōu)化的反應(yīng)緩沖體系,能夠?qū)崿F(xiàn)高靈敏度和高特異性的檢測。防污染設(shè)計(jì):部分試劑盒引入了dUTP/UNG防污染系統(tǒng),有效防止PCR產(chǎn)物污染,避免假陽性結(jié)果。操作簡便:RT和qPCR反應(yīng)在同一管中完成,減少了操作步驟,降低了污染風(fēng)險(xiǎn)。適用范圍廣:適用于多種RNA模板,包括病毒RNA、總RNA和低豐度基因的檢測。多重檢測能力:支持多重qPCR反應(yīng),可在同一反應(yīng)中同時(shí)檢測多個(gè)目標(biāo)基因。應(yīng)用場景病毒檢測:適用于RNA病毒的快速定量檢測,如流感病毒、病毒等。基因表達(dá)分析:用于定量檢測特定基因的表達(dá)水平,尤其適合微量RNA樣本。多重檢測:可同時(shí)檢測多個(gè)目標(biāo)基因,適用于高通量樣本分析。FnCas12a在切割DNA時(shí)產(chǎn)生黏性末端,有助于提高同源定向修復(fù)(HDR)的效率。Recombinant Mouse CLEC14A Protein,His Tag
10× DNA Loading Buffer 是一種高濃度的即用型試劑,廣泛應(yīng)用于DNA凝膠電泳實(shí)驗(yàn)中。它通過添加特定的染料和高密度成分(如甘油或蔗糖),使DNA樣品在電泳過程中更容易沉降并被觀察,是DNA分析實(shí)驗(yàn)中不可或缺的工具。產(chǎn)品特點(diǎn)高密度與染料標(biāo)記:10× DNA Loading Buffer 含有高濃度的甘油或蔗糖,能夠使DNA樣品在電泳時(shí)沉降于凝膠孔底部,避免漂浮。同時(shí),其中的染料(如溴酚藍(lán)或二甲苯藍(lán))可以指示DNA遷移的位置,便于實(shí)時(shí)觀察電泳進(jìn)程。即用型設(shè)計(jì):無需額外配制,直接與DNA樣品混合即可使用,簡化了實(shí)驗(yàn)操作。兼容性強(qiáng):適用于多種類型的DNA樣品,包括PCR產(chǎn)物、質(zhì)粒DNA、基因組DNA片段等,也兼容瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠電泳。穩(wěn)定保存:常溫保存,穩(wěn)定性高,無需特殊處理。應(yīng)用場景DNA片段分離:在瓊脂糖凝膠電泳中,用于分離和分析DNA片段,如PCR產(chǎn)物、質(zhì)粒DNA、限制性酶切片段等。電泳指示:染料的遷移速率可以作為DNA片段大小的參考,幫助判斷目標(biāo)片段的位置。DNA回收:在DNA回收實(shí)驗(yàn)中,幫助定位目標(biāo)條帶,便于后續(xù)的切膠回收操作。Recombinant Mouse LY6G6D Protein,His TagPhusion Master Mix (2×) 是一種即用型預(yù)混液包含dNTPs、Mg2?和優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液加入模板和引物可進(jìn)行反應(yīng)。
在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,而Phusion Master Mix (2×) (Without Dye) 則是實(shí)現(xiàn)高保真、高效擴(kuò)增的理想選擇。這種預(yù)混液結(jié)合了Phusion DNA聚合酶的保真性與優(yōu)化的反應(yīng)體系,為科研人員提供了一個(gè)便捷、可靠的實(shí)驗(yàn)平臺。Phusion Master Mix (2×) (Without Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,包含Phusion DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液以及必要的輔助成分。Phusion DNA聚合酶以其高保真性著稱,其錯(cuò)誤率比普通Taq酶低50倍以上,比Pfu酶低6倍。這種高保真性使其成為基因克隆、測序模板制備、突變分析等高精度實(shí)驗(yàn)的優(yōu)先工具。此外,Phusion酶的延伸速度可達(dá)15-30秒/kb,比傳統(tǒng)Pfu酶快10倍,明顯提高了實(shí)驗(yàn)效率。預(yù)混液的無染料配方為實(shí)驗(yàn)提供了更大的靈活性。實(shí)驗(yàn)人員可以根據(jù)具體需求選擇后續(xù)的檢測方法,例如凝膠電泳分析、平末端克隆或測序,而無需擔(dān)心染料對結(jié)果的干擾。這種無染料設(shè)計(jì)特別適合需要進(jìn)一步處理的PCR產(chǎn)物,例如用于構(gòu)建重組質(zhì)?;蜻M(jìn)行下游功能分析。Phusion Master Mix (2×) (Without Dye) 的2倍濃度設(shè)計(jì)進(jìn)一步簡化了實(shí)驗(yàn)操作。實(shí)驗(yàn)人員只需加入模板DNA和引物,即可直接進(jìn)行反應(yīng),減少了手動配制反應(yīng)體系的步驟和可能出現(xiàn)的誤差。
在現(xiàn)代分子生物學(xué)研究中,聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)已成為不可或缺的工具,廣泛應(yīng)用于基因擴(kuò)增、突變檢測、基因表達(dá)分析等多個(gè)領(lǐng)域。而一款PCR Master Mix則是確保實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵因素之一。Phusion Master Mix (2×) (Without Dye)憑借其性能和獨(dú)特的產(chǎn)品特點(diǎn),為科研工作者提供了高效、可靠的實(shí)驗(yàn)解決方案。一、酶性能Phusion Master Mix的成分是Phusion DNA聚合酶,這是一種具有高保真性的熱穩(wěn)定酶。它能夠以極高的準(zhǔn)確性復(fù)制DNA模板,錯(cuò)誤率極低,為普通Taq酶的1/500,這使得它在擴(kuò)增長片段DNA或?qū)π蛄袦?zhǔn)確性要求極高的實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出色。例如,在進(jìn)行基因克隆或構(gòu)建基因文庫時(shí),Phusion酶能夠確保擴(kuò)增產(chǎn)物的序列與原始模板高度一致,從而提高了后續(xù)實(shí)驗(yàn)的成功率。二、快速擴(kuò)增能力盡管Phusion酶具有高保真性,但其擴(kuò)增速度并未受到影響。它能夠在短時(shí)間內(nèi)完成長片段DNA的擴(kuò)增,提高了實(shí)驗(yàn)效率。對于長度在5kb以內(nèi)的DNA片段,Phusion Master Mix可以在幾分鐘內(nèi)完成擴(kuò)增,這對于需要快速獲得實(shí)驗(yàn)結(jié)果的研究人員來說是一個(gè)巨大的優(yōu)勢。例如,在進(jìn)行高通量基因篩查或大規(guī)模樣本分析時(shí),Phusion Master Mix能夠縮短實(shí)驗(yàn)周期,提高工作效率。將Cas9/sgRNA復(fù)合物轉(zhuǎn)染到目標(biāo)細(xì)胞中??梢允褂弥|(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染、電穿孔或其他轉(zhuǎn)染技術(shù) 。
Uracil-DNA Glycosylase (Heat-labile, Bacterium) 是一種來源于嗜冷海洋細(xì)菌的熱敏型尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG/UNG)。該酶能夠特異性地催化水解含有尿嘧啶的DNA鏈中的尿嘧啶堿基,釋放游離尿嘧啶,并在DNA中產(chǎn)生無堿基位點(diǎn)(AP位點(diǎn)),從而防止PCR產(chǎn)物的氣溶膠污染。產(chǎn)品特點(diǎn)與傳統(tǒng)UDG酶相比,熱敏UDG酶在室溫下即可高效發(fā)揮作用,且對溫度極為敏感,可在50℃下10分鐘內(nèi)完全失活。這種特性使其在PCR和RT-PCR反應(yīng)中表現(xiàn)出色,尤其適用于需要快速滅活的場景。此外,該酶對單鏈和雙鏈DNA均具有活性,但對RNA或不含尿嘧啶的DNA無作用。其高純度和低殘留特性使其在高投入量下也不會對檢測體系產(chǎn)生抑制。應(yīng)用場景去除PCR產(chǎn)物污染:通過降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,防止氣溶膠污染導(dǎo)致的假陽性。RT-qPCR防污染:在RT-qPCR反應(yīng)中,熱敏UDG酶可在逆轉(zhuǎn)錄前去除殘留的PCR產(chǎn)物。單鏈或雙鏈DNA處理:用于去除DNA中的尿嘧啶堿基。在使用過程中,建議將酶液存放在冰盒內(nèi)或冰浴上,使用完畢后立即放回-20℃保存。此外,熱敏UDG酶在RT-qPCR反應(yīng)中表現(xiàn)出良好的兼容性,即使在高投入量下也不會對反應(yīng)產(chǎn)生抑制。將含有重組質(zhì)粒的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化到宿主細(xì)胞中,通常是大腸桿菌或其他合適的細(xì)胞系。Hexa-His
其耐血能力可達(dá)20%-50%,在20 μL的PCR體系中,通常可加入1-4 μL的全血樣本。Recombinant Mouse CLEC14A Protein,His Tag
一、產(chǎn)品特點(diǎn)(一)高靈敏度該qPCR Mix采用了先進(jìn)的熱啟動Taq酶技術(shù),通過化學(xué)修飾將酶活性鎖定在低溫條件下,在PCR反應(yīng)的高溫變性階段釋放活性。這一特性有效避免了非特異性擴(kuò)增,顯著提高了反應(yīng)的靈敏度,即使對于低豐度的靶基因,也能實(shí)現(xiàn)檢測。例如,在檢測稀有突變基因時(shí),其高靈敏度能夠確保即使在野生型基因背景中含量極低的突變基因也能被準(zhǔn)確識別,為病痛早期篩查等研究提供了有力支持。(二)高特異性其獨(dú)特的緩沖體系經(jīng)過優(yōu)化,能夠精確調(diào)控引物與模板的結(jié)合過程。在反應(yīng)過程中,該體系可有效減少引物二聚體的形成,同時(shí)增強(qiáng)引物與目標(biāo)模板的特異性結(jié)合能力。這使得在復(fù)雜的基因組背景下,目標(biāo)基因得以高效擴(kuò)增,從而顯著提高了qPCR反應(yīng)的特異性。在多基因家族成員的區(qū)分檢測中,這種高特異性優(yōu)勢尤為明顯,能夠避免因引物錯(cuò)配導(dǎo)致的非目標(biāo)基因擴(kuò)增,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。Recombinant Mouse CLEC14A Protein,His Tag