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什么是細(xì)胞培養(yǎng):細(xì)胞培養(yǎng)是指從動(dòng)物或植物中提取細(xì)胞,然后在人工環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)以進(jìn)行科學(xué)研究。較早的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是在100多年前開發(fā)的,為科學(xué)的巨大突破做出了貢獻(xiàn)。如今,它已成為全世界實(shí)驗(yàn)室用于研究細(xì)胞的生理學(xué)、生物化學(xué)、疾病潛在機(jī)制以及藥物和有毒化合物的作用的基本工具。它也可用于在藥物篩選和大規(guī)模制造生物化合物,諸如疫苗和治病性蛋白質(zhì)。貯存:培養(yǎng)基在30℃下放置1天,無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。培養(yǎng)基制備器使用注射器將添加劑加入,確保了添加劑的無菌添加!中國(guó)臺(tái)灣培養(yǎng)基制備器定制
培養(yǎng)基的滅菌:一般培養(yǎng)基可采用121℃高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法。在各種培養(yǎng)基制備方法中,如無特殊規(guī)定,即可用此法滅菌。某些畏熱成分,如糖類,應(yīng)另行配成20%如或更高的濃液,以過濾或間歇滅菌法消毒,以后再用無菌操作技術(shù)、定量加于培養(yǎng)基。明膠培養(yǎng)基亦應(yīng)用較低溫度滅菌。血液、體液和物品等則應(yīng)從無菌操作技術(shù)抽取和加入于經(jīng)冷卻約50℃左右的培養(yǎng)基中。瓊脂斜面培養(yǎng)基應(yīng)在滅菌后立即取出、待冷至55-60℃時(shí),擺置成適當(dāng)斜面、待其自然凝固。貴州培養(yǎng)基制備器供應(yīng)商培養(yǎng)基制備器鋁制表面光滑平坦;易于清潔,無孔隙和裂縫,以防培養(yǎng)基流進(jìn)去.
培養(yǎng)基制備基本方法:培養(yǎng)基配方的選定,同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別。因此,除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外,一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料,加以比較核對(duì),再依據(jù)自己的使用目的加以選用,記錄其來源。培養(yǎng)基pH的初步調(diào)整,培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應(yīng)進(jìn)行pH的初步調(diào)正,因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會(huì)有所變化,例如,牛肉浸液約可降低pH0.2。而腸浸液pH卻會(huì)有明顯的升高。因此,對(duì)這個(gè)步驟,操作者應(yīng)隨時(shí)注意探索經(jīng)驗(yàn)、以期能掌握培養(yǎng)基的很終pH,保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。pH調(diào)正后,還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘,以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。
培養(yǎng)基的類型-根據(jù)培養(yǎng)基的用途來區(qū)分,可分為選擇培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等。1)選擇培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某種物質(zhì)以殺死或抑制不需要的菌種生長(zhǎng)的培養(yǎng)基,稱之為選擇培養(yǎng)基。如鏈霉素、氯霉素等抑制原核微生物的生長(zhǎng);而制霉菌素、灰黃霉素等能抑制真核微生物的生長(zhǎng);結(jié)晶紫能抑制革蘭氏陽性細(xì)菌的生長(zhǎng)等。2)增殖培養(yǎng)基在自然界中,不同種的微生物常生活在一起,為了分離我們所需要的微生物,在普通培養(yǎng)基中加入一些某種微生物特別喜歡的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),以增加這種微生物的繁殖速度,逐漸淘汰其它微生物,這種培養(yǎng)基稱為增殖培養(yǎng)基,這種培養(yǎng)基常用于菌種篩選和選擇增菌中。在某種程度上講,增殖培養(yǎng)基也是一種選擇培養(yǎng)基。3)鑒別培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學(xué)藥品,使難以區(qū)分的微生物經(jīng)培養(yǎng)后呈現(xiàn)出明顯差別,因而有助開快速鑒別某種微生物。真空抽濾不暢應(yīng)清潔濾膜及檢查氣密性。
配制培養(yǎng)基的原則:根據(jù)培養(yǎng)目的需要選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。由于微生物營(yíng)養(yǎng)類型復(fù)雜,不同微生物有不同的營(yíng)養(yǎng)要求。因此,要根據(jù)不同微生物的營(yíng)養(yǎng)需求選擇適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),配制針對(duì)性強(qiáng)的培養(yǎng)基。自養(yǎng)微生物有較強(qiáng)的合成能力,能以簡(jiǎn)單的無機(jī)物如co2和無機(jī)鹽合成復(fù)雜的細(xì)胞物質(zhì)。因此,培養(yǎng)自養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基應(yīng)由簡(jiǎn)單的無機(jī)物組成。異養(yǎng)微生物的合成能力較弱,不能以CO2作為碳源或主要碳源,故應(yīng)在培養(yǎng)基中至少添加一種有機(jī)物。注意營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度與配比要合適:微生物只有在營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度及其比例合適時(shí)才能良好生長(zhǎng)。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度過低不能滿足現(xiàn)生長(zhǎng)需要,過高又抑制其生長(zhǎng)。例如,適量的蔗糖是異養(yǎng)微生物的良好碳源和能源,但高濃度蔗糖則抑制菌體生長(zhǎng)。金屬離子是微生物生長(zhǎng)所不可缺少的礦質(zhì)養(yǎng)分,但濃度擴(kuò)大,尤其是重金屬離子,反而抑制其生長(zhǎng),甚至產(chǎn)生殺菌作用??焖倮鋮s技術(shù)避免熱敏感成分降解,保護(hù)活性物質(zhì)。 設(shè)備兼容不同規(guī)格容器,滿足小試到中試生產(chǎn)需求。河北培養(yǎng)基制備器廠家
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實(shí)驗(yàn)室在制作培養(yǎng)基時(shí)候的經(jīng)驗(yàn)總結(jié):1、培養(yǎng)基成份稱量:培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯(cuò)亂,較好一次完成,不要中斷。可將配方置于傍側(cè),每稱完一種成分即在配方上做出記號(hào),并將所需稱取的藥品一次取齊,置于左側(cè),每種稱取完畢后,即移放于右側(cè)。完全稱取完畢后,還應(yīng)進(jìn)行一次檢查。2、培養(yǎng)基成份的混合與溶化:培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細(xì)菌不易生長(zhǎng)。較好使用不銹鋼加熱溶化,可放入大燒杯或大燒瓶中置于高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化。中國(guó)臺(tái)灣培養(yǎng)基制備器定制