無血清快速細(xì)胞凍存液,是一種新型的快速凍存細(xì)胞的保護(hù)液,可將細(xì)胞置于-80^C直接冷凍保存。NM4100內(nèi)含天然抗凍蛋白(Naturalantifrereprotein),不含動(dòng)物來源的血清成分,能夠有效提高細(xì)胞凍存活率和復(fù)蘇活力,減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細(xì)胞安全,能夠滿足大部分體外培養(yǎng)細(xì)胞的凍存需求。注意事項(xiàng):請(qǐng)選擇對(duì)數(shù)生長期細(xì)胞進(jìn)行凍存;凍存液加入細(xì)胞后,請(qǐng)盡快放入-80C冰箱凍存;3.本產(chǎn)品凍存細(xì)胞可以在-80°C冰箱保存3年以上;4.若需長期凍存細(xì)胞,請(qǐng)轉(zhuǎn)移至液氮罐中貯存;凍存液中含DMSO成分,為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套。鏡檢后,研究者可根據(jù)各自方法和需要來進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。蕪湖正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液生產(chǎn)廠家
冷凍速率:冷凍速率是指降溫的速度,直接關(guān)系到冷凍效果。冷凍速度不同,細(xì)胞內(nèi)水分向外流動(dòng)的情況也不相同,不同的冷凍速度既然能使細(xì)胞內(nèi)發(fā)生不同的生理變化,也可以對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生不同的損傷。超快速玻璃化冷凍對(duì)細(xì)胞存活來說是較為理想的冷凍方法。細(xì)胞內(nèi)外呈玻璃化凝固,無冰晶形成或形成很小的冰晶,對(duì)細(xì)胞膜和細(xì)胞器不致造成損傷,細(xì)胞也不會(huì)在高濃度的溶質(zhì)中長時(shí)間暴露而受損。不同細(xì)胞的較適冷凍速率不同。小鼠骨髓干細(xì)胞、酵母、人紅細(xì)胞的較適冷凍速率分別為1.6℃/min、7℃/min和200℃/min。細(xì)胞與細(xì)胞之間的較適冷凍速率可在1.6℃~300℃/min,故對(duì)一種細(xì)胞進(jìn)行冷凍保存之前,首先需要測(cè)定其較適冷凍速率,以保證獲得較高的冷凍存活率。深圳正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液供應(yīng)商無任何外源蛋白和血清,適用于各類動(dòng)物細(xì)胞株凍存。
細(xì)胞凍存的注意事項(xiàng):1.為保持細(xì)胞較大存活率,一般都采用慢凍存融的方法。2.凍存物距液氮面越近溫度越低。標(biāo)準(zhǔn)的低凍速度為-1℃~12℃/分鐘,當(dāng)溫度下降達(dá)-25℃時(shí),下降速度可增至-5~-10℃/分鐘,到-100℃時(shí)則可迅速凍入液氮中。因此要適當(dāng)掌握凍存物下降入液氮中的速度,過快能影響細(xì)胞內(nèi)水分透出,太慢則促冰晶形成。3.初次凍存者在下降凍存時(shí),宜先用細(xì)木棒伸入罐中探測(cè)液面位置,然后需用溫度計(jì)與凍存物并行的辦法,以觀測(cè)下降凍存物的速度、凍存物與液氮液面距離和溫度三者關(guān)系,當(dāng)已掌握以上各參數(shù)和凍存技術(shù)熟練后,光按下降時(shí)間和下降距離便可獲理想凍存效果
無血清細(xì)胞凍存液:1.逐滴加入5-7mL的預(yù)熱的培養(yǎng)基到15mL的離心管中,加入的同時(shí)輕輕混勻。2.室溫(15-25°C)以300xg離心5分鐘。3.吸出培養(yǎng)基,使細(xì)胞沉淀完好無損。使用2mL血清移液管輕輕將細(xì)胞沉淀重懸于1mL的培養(yǎng)基中。小心保持細(xì)胞作為聚集體。4.將0.5mL的細(xì)胞混合物轉(zhuǎn)移到含有培養(yǎng)基的預(yù)包被的6孔板的培養(yǎng)孔中(例如,每個(gè)冷凍管可以鋪板兩個(gè)孔)。注意:鋪板多少孔可能需要根據(jù)凍存的細(xì)胞聚集體數(shù)量進(jìn)行調(diào)整。通常在復(fù)蘇后,要比在常規(guī)的傳代鋪板更多的細(xì)胞聚集體數(shù)量。將培養(yǎng)板放入37°C培養(yǎng)箱??焖偾昂笞笥业膿u晃培養(yǎng)板數(shù)次,將細(xì)胞聚集體分布均勻。24小時(shí)內(nèi)不要移動(dòng)培養(yǎng)板。無血清凍存液用途:無血清凍存液穩(wěn)定性及保存條件:置于2~8℃避光保存,有效期為1年。
無血清細(xì)胞凍存液對(duì)比含血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢(shì):傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存液是使用培養(yǎng)基、血清和DMSO按照一定的比例混合,其中DMSO的含量是10%,血清的含量是10%,統(tǒng)稱為含血清細(xì)胞凍存液。含血清細(xì)胞凍存液的一般的凍存方法是梯度降溫凍存法,如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘,然后移至-20℃冰箱30分鐘,再移至-80℃冰箱保存16-18個(gè)小時(shí)(或隔夜),較后才移至液氮罐中進(jìn)行長期的儲(chǔ)存。(其中需要注意的是-20℃條件下不可超過1個(gè)小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量的死亡。)無血清細(xì)胞凍存液:一些保護(hù)劑不能穿透細(xì)胞,但可以在冰晶形成之前,優(yōu)先結(jié)合細(xì)胞外的水分子。長沙正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液哪家好
隨著細(xì)胞治好以及細(xì)胞儲(chǔ)存產(chǎn)業(yè)發(fā)展,細(xì)胞凍存也面臨從科研應(yīng)用走向產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)化。蕪湖正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液生產(chǎn)廠家
細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來,這樣在需要的時(shí)候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種,起到了細(xì)胞保種的作用。為什么要進(jìn)行細(xì)胞凍存?連續(xù)培養(yǎng)的細(xì)胞系容易發(fā)生遺傳漂變,有限細(xì)胞系較終會(huì)發(fā)生衰老,所有培養(yǎng)的細(xì)胞都易受到微生物污染,即使運(yùn)轉(zhuǎn)情況較好的實(shí)驗(yàn)室也會(huì)遇到設(shè)備故障的問題。由于已建立的細(xì)胞系是一種寶貴資源,更換細(xì)胞系成本高昂,而且耗費(fèi)時(shí)間,因此,十分有必要將細(xì)胞冷凍起來長期保存。除此之外,還可以利用細(xì)胞凍存的形式來購買、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。蕪湖正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液生產(chǎn)廠家